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抗HCV HVR1模拟合成肽单克隆抗体的制备及特性鉴定被引量：3: 2011年; 目的:制备抗-HCV高变区1(HVR1)合成肽单克隆抗体(mAb),并对其特性进行鉴定。方法:以固相合成的HCV HVR1合成肽与牛血清白蛋白(BSA)偶联后,免疫8周龄的BALB/c小鼠。采用杂交瘤技术,取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合,制备抗-HCV HVR1 mAb。经HAT、HT选择培养及有限稀释法进行克隆化后,用相关的试剂盒鉴定小鼠mAb的Ig亚类;经中和抑制后用ELISA法检测mAb的特异性;用间接ELISA法检测mAb腹水的效价及相对亲和常数。结果:获得1株可分泌抗-HCV HVR1合成肽特异性mAb的杂交瘤细胞1A9G9F11。该株mAb的Ig亚类为IgG3;腹水效价为3.125×10-5;相对亲和常数为1.0×106L/mol。该株mAb与HBsAg、HBeAg、HBcAg、HAAg、牛血清白蛋白、酪蛋白和胸腺5肽均无交叉反应,与HCV HVR1合成肽-牛血清白蛋白出现特异性反应。结论:成功地建立了1株可分泌抗-HCV HVR1 mAb的杂交瘤细胞1A9G9F11,为进一步的实验研究提供了重要的制剂。; 孙杰戚扬迟淑萍由莉越李瑞生刘佳朱雷程云; 关键词：合成肽单克隆抗体

内毒素对人巨噬细胞系U937细胞增殖和肿瘤坏死因子-α分泌影响的实验研究被引量：2: 2010年; 目的探讨不同浓度的内毒素/脂多糖对人巨噬细胞系U937细胞增殖和肿瘤坏死因子-α分泌能力的影响。方法分别以0.0、2.5、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0μg/ml的脂多糖刺激体外6、24、48、72h培养的U937细胞,应用单溶液细胞增殖检测法检测其细胞增殖活力,并计算增殖率;应用酶联免疫吸附实验法检测细胞培养上清肿瘤坏死因子-α的分泌能力。结果实验组与脂多糖为0.0μg/ml时比较,当其浓度为2.5～20.0μg/ml,刺激24、48h时U937细胞增殖活性均明显升高;当脂多糖为50.0、100.0μg/ml时,细胞活力无显著性差异,其中培养24h,脂多糖浓度为2.5μg/ml时,对U937细胞的增殖具有最佳促进作用,增殖率为135.56%。而肿瘤坏死因子-α实验组与脂多糖为0.0μg/ml比较时,培养6h,各浓度组肿瘤坏死因子-α均明显升高,并呈现随培养时间延长而浓度降低的现象,培养6h,脂多糖为5.0μg/ml刺激时,肿瘤坏死因子-α浓度达到峰值为48.2638±5.0098;当其浓度为50.0～100.0μg/ml时能够促进肿瘤坏死因子-α分泌,且也遵循随培养时间延长而浓度降低的规律。结论脂多糖对U937细胞具有一定的增殖作用,且可以激活U937促使其分泌肿瘤坏死因子-α。; 迟淑萍白冰科戚扬由莉越高蓉汪辰程云李进; 关键词：脂多糖 U937 肿瘤坏死因子-Α

丙型肝炎高变区1合成肽对免疫小鼠脾淋巴细胞增殖作用的研究被引量：1: 2010年; 目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)高变区1(HVR1)模拟表位7肽(7P)在体外免疫小鼠后,小鼠脾淋巴细胞的增殖情况。方法20只小鼠随机分为实验组和对照组(n=10)。实验组小鼠皮下多点注射7P(500μl/只,含量5μg),对照组皮下多点注射等量生理盐水,单溶液细胞增殖法(MTS)检测前一天脾内直接注射7P(200μl/只,含量2.5μg)加强。收集脾淋巴细胞,分别加入不同浓度(6.25、12.50、25.0、50.0、100.0μg/ml)的7P,培养24、48、72h后光镜下观察细胞生长情况,应用MTS法检测小鼠脾淋巴细胞增殖活力,并计算增殖率。结果实验组小鼠脾淋巴细胞加入7P后第2天,镜下观察见细胞生长良好,可见散在的细胞增殖集落,对照组未见明显集落出现。与对照组比较,实验组经不同浓度7P诱导后,脾淋巴细胞的增殖活性均明显增强(P<0.01)。培养72h,7P诱导浓度为12.5μg/ml时,对脾淋巴细胞的增殖具有最佳促进效果,增殖率达到184.92%。在相同诱导浓度下,7P的最佳诱导效应随培养时间的延长而增加。结论合成的HVR1模拟表位7P在体外对免疫小鼠脾淋巴细胞具有一定的增殖作用。; 迟淑萍汪辰汪力亚孙杰戚扬由莉越李瑞生程云; 关键词：表位

基于数据挖掘的丙型肝炎患者氨基酸序列与TNF-α间的规律性研究被引量：1: 2012年; 目的研究丙型肝炎患者的丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)高度可变区1(hypervariable region 1,HVR1)各位点氨基酸(amino acid,AA)的极性及带电情况与TNF-α表达量之间的规律性。方法根据样本聚类结果,以HCV的HVR1区域各位点氨基酸的极性及带电情况作为属性,对数据集进行规则挖掘。结果当aa5为极性不带电氨基酸时,TNF-α表达量下调;当aa5为非极性氨基酸,aa16为极性不带电氨基酸时,TNF-α上调。当aa5和aa16为非极性氨基酸,aa10为极性不带电氨基酸时,TNF-α上调。当aa5、aa16和aa10为非极性氨基酸时,aa19不带电,则TNF-α下调;aa19带电则TNF-α上调。结论丙型肝炎患者HCV的HVR1区域氨基酸的极性及带电情况与TNF-α的表达量之间具有一定的规律性。; 由莉越周婷婷迟淑萍孙杰陈红鸽赵庆国刘军程云; 关键词：数据挖掘丙型肝炎 TNF-Α 氨基酸序列

丙型肝炎病毒高变区1模拟表位7肽细胞免疫应答作用的研究: 2012年; 目的探讨丙型肝炎病毒高变区1模拟表位7肽在体外刺激免疫小鼠脾淋巴细胞后的细胞增殖情况。方法选用经7肽皮下多点免疫和脾内直接注射两种免疫途径的免疫小鼠,无菌条件下分离脾淋巴细胞后,实验组分为刺激组与未刺激组,刺激组脾细胞再经7肽刺激,应用单溶液细胞增殖检测法体外检测7肽对免疫小鼠脾淋巴细胞在不同浓度和不同培养时间点增殖的影响。结果体外7肽刺激免疫小鼠脾淋巴细胞后,刺激组的脾淋巴细胞增殖反应与未刺激组比较存在促进作用,与对照组比较出现了明显的增殖反应。结论丙型肝炎病毒高变区1合成肽在体外对免疫小鼠脾淋巴细胞具有一定的促增殖作用。; 迟淑萍白冰珂陈红鸽刘军谢进孙杰由莉越程云; 关键词：淋巴细胞增殖

海鞘醇衍生物SC002抗肿瘤相关分子机制的研究被引量：4: 2011年; 目的:探讨海鞘醇衍生物002(简称SC002)抗肿瘤相关分子机制。方法:应用Western blot检测SC002作用于肿瘤细胞后,VEGF、P53、P21、Bcl-2等肿瘤相关信号分子表达水平的变化;进一步应用ELISA检测SC002对荷瘤小鼠血清中的VEGF和实体瘤组织中Caspase-3,8,9活性的影响。结果:SC002可明显诱导P53的表达,而降低BCL-2的表达,但对p21没有作用;SC002可降低荷瘤小鼠血清中VEGF的含量,同时对瘤体组织中VEGF蛋白表达水平也有抑制作用,但对Caspase-3,8,9的活性无明显影响。结论:SC002可通过激活抑癌基因p53,抑制抗凋亡基因Bcl-2和促血管生成因子VEGF等多种途径,发挥抗肿瘤的活性,这一发现将为SC002作为新型的抗肿瘤药物提供重要的实验依据。; 迟淑萍高蓉汪辰由莉越雷海民程云李进; 关键词：抗肿瘤机制 WESTERN BLOT

丙型肝炎病毒高变区1氨基酸序列差异与丙型肝炎患者生化指标间的相关性分析: 2013年; 目的研究丙型肝炎高变区1(HCV HVR1)氨基酸序列间的差异性以及此差异与生化指标间的相关性。方法以81例丙型肝炎患者氨基酸序列为材料,按照序列同源性进行分组,利用序列对比方法分析氨基酸的变异规律,同时利用生物信息学的手段分析氨基酸序列与丙型肝炎生化指标间的相关性。结果 HCV HVR1氨基酸序列保守性差,其中aa17、aa21的芳香氨基酸丰度高;各个生化指标与序列差异具有一定的相关性,在各组中相关性不尽相同。结论在病理变化过程中,生化指标的改变不可作为患者体内丙型肝炎病毒氨基酸序列发生变异的标志指标。; 迟淑萍由莉越张诗龙刘军吴素体孙杰周婷婷杜丽程云; 关键词：氨基酸序列丙型肝炎病毒生化指标

HCV HVR1序列差异与丙型肝炎细胞因子间的相关性分析: 2011年; 目的:研究HCV HVR1氨基酸序列间的差异性以及此差异与细胞因子间的相关性。方法:以81例丙型肝炎病人氨基酸序列为材料,分组后利用生物信息学的手段分析氨基酸序列与丙型肝炎患者三种细胞因子表达量间的相关性。结果:样本的细胞因子IFN与IL-10量的差异与样本序列差异在所有分组中都具有相关性。结论:在病理变化过程中,如果IFN、IL-10的量具有显著差异,可以在一定程度上推测样本致病蛋白序列发生差异,即IFN、IL-10可作为病情恶化的标志指标。; 由莉越迟淑萍汪辰孙洁周婷婷程云; 关键词：氨基酸序列 HCV 细胞因子

环磷酰胺在动物模型体内抗肿瘤影响及抑瘤机制的研究被引量：17: 2012年; 目的探讨环磷酰胺(CTX)在动物模型体内抗肿瘤影响及抑瘤机制。方法建立小鼠实体瘤模型和腹水瘤模型:分别在昆明系小鼠皮下接种S180肉瘤细胞、腹腔接种鼠源性H22肝癌细胞,同时给予环磷酰胺处理小鼠,其后观察各组肿瘤生长大小,小鼠存活率的变化;应用Western blot技术检测凋亡抑制基因(Bcl-2)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)含量、抑癌基因P53及P21的蛋白表达。结果环磷酰胺组肿瘤重量明显低于模型组(P<0.05),其抑瘤率为88.55%;小鼠存活天数均较模型组长,其生命延长率为57.73%;环磷酰胺可明显诱导P53的表达,抑制BCL-2的表达,从而促进肿瘤细胞的凋亡,但对P21没有作用;对瘤体组织中VEGF蛋白表达水平亦有抑制作用。结论环磷酰胺可通过激活抑癌基因P53,抑制抗凋亡基因Bcl-2和促血管生成因子VEGF等多种途径,发挥抗肿瘤活性,为抗肿瘤动物模型尤其为调节抗肿瘤相关基因表达方面的阳性药物对照提供重要的实验依据。; 迟淑萍白冰珂谢进陈红鸽杜丽由莉越程云; 关键词：环磷酰胺 WESTERN BLOT S180肉瘤 H22肝癌细胞

丙型肝炎病毒高变区1模拟表位7肽刺激小鼠脾淋巴细胞增殖: 2010年; 目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)高变区1(HVR1)模拟表位7肽在体外刺激小鼠经脾内直接免疫后脾淋巴细胞增殖的变化。方法:选用经7肽脾内直接注射免疫的小鼠,分离脾细胞后,脾细胞再经7肽刺激,应用单溶液细胞增殖检测方法,体外检测7肽在不同浓度和不同培养时间点,对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果:7肽刺激免疫小鼠脾淋巴细胞后,实验组的脾淋巴细胞增殖反应与对照组相比有明显促进作用。结论:HCV高变区1模拟表位7肽在体外对脾内直接免疫小鼠脾淋巴细胞具有一定的促增殖作用。; 迟淑萍汪辰戚扬由莉越孙杰尹笛李瑞生程云; 关键词：模拟表位脾淋巴细胞小鼠增殖

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由莉越

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