王金成 作品数:47 被引量:198 H指数:10 供职机构: 南京农业大学 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 国家科技支撑计划 天津市自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
口岸重要植物病原线虫形态和分子检测技术创新写应用 2019年 本项目属植物检疫领域。长期以来,由于植物线虫体形小、形态变异大,加之对其分类研究不足、检测手段单一,造成我国口岸普遍存在检测难、鉴定难、标准缺的问题。针对上述背景,本项目开展了系列检测方法研究,在线虫基因组DNA提取、新型临时玻片制作、核糖体通用扩增引物筛选以及新种鉴定等方面,均有多项创新和实际应用,填补了国内外相关研究空白,达到国际先进水平。 顾建锋 顾建锋 王金成 何洁 王金成 方亦午 王暄 林宇 方亦午关键词:分子检测 技术创新 基因组DNA提取 植物检疫 3种粒线虫多重PCR检测方法 被引量:12 2006年 剪股颖粒线虫[Anguina ag rostis(S teinbuch,1799)F ilipjev,1936]、小麦粒线虫[Anguina tritici(S teinbuch,1799)F ilipjev,1936]和维氏粒线虫[Anguina w evelli(Van den Berg,1985)S idd iq i,2000]都是重要的植物病原线虫,它们在成熟种子和虫瘿中的虫态通常是幼虫,而这3种线虫的幼虫形态非常相似,难以根据其特征对它们进行快速准确的种类鉴定。本研究根据这3种线虫的rDNA-ITS区域序列,分别设计筛选了特异性引物AgrF1/AgrR1、TriF1/TriR1、W evF1/W evR1,构建了这3种线虫单条幼虫多重PCR检测体系,获得3个大小差异明显的片段,表明这些引物设计合理,适合这3种线虫的快速准确检测。 马以桂 王金成 谢辉 周春娜 杜宇 黄国明 李芳荣关键词:剪股颖粒线虫 DNA 多重PCR 南方、花生和爪哇根结线虫PCR检测方法 被引量:4 2016年 为快速、准确、稳定的鉴定南方、花生和爪哇根结线虫,利用已报道的南方和爪哇根结线虫的两对特异性引物,结合本研究设计的花生根结线虫特异性引物,通过优化PCR反应体系,建立了3种根结线虫的PCR检测方法。结果表明,该方法能够特异性扩增以上3种根结线虫,特征片段长度分别为399、335和670 bp,灵敏度达到单条2龄幼虫的水平。研究结果将为以上3种根结线虫的快速鉴定提供技术支持。 容万韬 王金成 林宇 顾建锋 陈先锋 魏亚东关键词:根结线虫 南方根结线虫 花生根结线虫 爪哇根结线虫 分子鉴定 小麦粒线虫与剪股颖粒线虫单条幼虫PCR-RFLP检测分析 被引量:2 2004年 剪股颖粒线虫 (Anguinaagrostis)是牧草、草坪上的重要线虫 ,小麦粒线虫 (Anguinatritici)是危害小麦的一种重要线虫。这两种线虫均可以对寄主植物造成严重危害 ,导致产量下降 ;由于该类线虫大多数时间以幼虫形态出现 ,鉴定种类比较困难。本实验比较两种线虫的虫瘿形态特征、对单条线虫DNA进行PCR扩增 ,并使用RsaⅠ、MspⅠ、AluⅠ、HinfⅠ和HaeⅢ五种限制性内切酶对PCR产物进行了限制性酶切 ,通过酶切图谱可以将两种线虫区分开。 马以桂 王金成 蔡国瑞关键词:剪股颖粒线虫 寄主植物 腐烂茎线虫不同地理种群ITS区序列比对及系统发育 被引量:14 2007年 为弄清我国腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor)不同地理种群ITS(Internal transcribed spacer)区之间的碱基差异及系统发育关系,本研究通过网络软件Clustalw1.83对腐烂茎线虫的核糖体ITS区核酸序列进行了比对,结果发现腐烂茎线虫的8个种群中,DEll、DEly、DEAY987007三个种群(I组)内部之间的碱基差异在1%以内,其它的5个种群(II组)之间的差异为0~1%,而I组与II组种群之间的差异达到了15%(根据ITS1+5.8s+ITS2序列)或20%(根据ITS1+ITS2序列)。这说明我国腐烂茎线虫很可能是1个复合种。根据ITS区核酸序列构建的系统发育图同样显示,我国腐烂茎线虫的7个地理种群明显分为2个分支A和B。 王金成 季镭 黄国明 杨秀丽 林茂松关键词:腐烂茎线虫 鳞球茎茎线虫 系统发育关系 根结线虫DNA条形码适用性及其系统发育分析 DNA条形码技术,是借助生物体DNA片段的序列信息对其进行快速鉴定的技术,作为传统分类学的辅助手段,具有简单、迅速和可靠的优点.根结线虫(Meloidogyne spp.)是一类分布广泛、为害严重的植物固定内寄生线虫,对... 林宇 王金成 王暄 宋志强 王宁 李红梅关键词:根结线虫 DNA条形码 系统发育 马铃薯腐烂茎线虫种群分化和致病性变异 <正>甘薯茎线虫(Ditylenchus destructor)、鳞球茎茎线虫(D.dipsaci)及食菌茎线虫(D. myceliophagus)为农业上重要病原线虫,也是我国重要的植物检疫对象。本研究通过网络软件Cl... 季镭 王金成 林茂松文献传递 关于构建Nema-log植物线虫分子标记系统的设想 目前世界上已记载的植物线虫约5000种。2007年农业部公布的我国进境植物检疫性线虫约160种。2000年统计,全世界因线虫危害给粮食和纤维作物造成的损失约为12.7%,对蔬菜、花生、烟草和某些果树造成的损失超过20%。 王金成 杨秀丽 刘跃庭 林茂松关键词:RFLP PCR 限制性内切酶 文献传递 郁金香种球传带南芥菜花叶病毒的检测 被引量:7 2007年 对从荷兰进口的郁金香种球进行检疫,应用培育长出的叶片作为检测材料,采用双抗夹心酶联免疫吸附测定方法(DAS-ELISA)和RNA逆转录PCR扩增法(RT-RCR)进行南芥菜花叶病毒的检测。从这些种球上发现了我国进境植物检疫二类危险性有害生物—南芥菜花叶病毒。 高崇省 郭京泽 刘鹏 王金成关键词:郁金香种球 南芥菜花叶病毒 五种短体线虫 DNA 条形码鉴定方法 被引量:5 2013年 以穿刺短体线虫、咖啡短体线虫、伤残短体线虫、斯克里布纳短体线虫和落选短体线虫5种短体线虫的18个种群为试验材料,将其测序获得的ITS序列与GenBank中已提交的短体线虫序列进行了Blast比对和系统发育分析,以验证核糖体ITS序列作为DNA条形码的可行性。结果显示,核糖体ITS序列作为DNA条形码可以很好的用于鉴别以上5种短体线虫。 魏亚东 容万韬 赵立荣 王金成 黄国明 郭京泽 孙建华关键词:短体线虫 ITS 系统发育 DNA条形码