目的:探讨si RNA沉默检测点激酶1(Chk1)基因对人卵巢癌细胞HO8910增殖和周期调控的影响及其作用机制。方法:设计并合成3条Chk1 si RNA干扰片段,转染进入卵巢癌细胞HO8910,Western blot检测转染前后HO8910细胞中Chk1蛋白的表达情况,筛选出有效片段。将Chk1 si RNA有效片段转染进入HO8910细胞,采用MTT法和流式细胞仪分析Chk1si RNA对HO8910细胞增殖和周期的影响;Western blot方法分别检测细胞周期相关基因Cyclin A、CDK4、Cdc25A蛋白表达。结果:3个si RNA中,1条是有效si RNA。该有效Chk1 si RNA片段转染后,HO8910细胞中Chk1蛋白水平下降约53.6%,明显低于未转染组和脂质体转染组(P=0.000)。转染48 h后,Chk1 si RNA转染组HO8910细胞增殖活性下降,抑制率为(52.1±5.1)%,明显高于脂质体转染组的(7.6±3.8)%(P=0.000)。流式细胞仪检测显示Chk1 si RNA转染组HO8910细胞G2/M期比例为(5.03±2.62)%,明显低于未转染组(19.35±2.19)%和脂质体转染组(19.76±2.67)%(P=0.000)。Western blot结果显示转染Chk1 si RNA后,细胞内与细胞周期相关的Cyclin A、CDK4、Cdc25A蛋白水平表达明显增强,与未转染组和脂质体组比较,差异有统计学意义(P=0.000)。结论:si RNA沉默Chk1基因后,可明显抑制卵巢癌细胞HO8910细胞的增殖,其抑制增殖作用与减弱G2/M期阻滞有关。
目的：通过对克罗米芬（clomiphene citrate,CC）抵抗的多囊卵巢综合征（plycystic ovary syndrome,PCOS）患者相关危险因素的logistic回归分析,探讨临床上难治性PCOS诊疗的思路和策略。方法：92例PCOS患者分为CC有效组和CC抵抗组,均测其体质量、身高、年龄、葡萄糖耐量实验（glucose tolerance test,OGTT）（0’、120’）、胰岛素（insulin）（0’、120’）、卵泡刺激素（follicule-stimulating hormone,FSH）、黄体生成素（luteinizing hormone,LH）、睾酮（testosterone,T）、雌二醇（estradiol,E2）以及同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）,并计算体质指数（body mass index,BMI）和稳态模式评估法测定胰岛素抵抗指数（homeostasis model assessment for insulin resistance,HOMA-IR）。将差异有统计学意义的指标进行logistic回归分析以及ROC曲线分析。结果：CC抵抗组与CC有效组之间比较,年龄（P=0.000）、BMI（P=0.005）、Hcy（P=0.000）、OGTT（0’）（P=0.000）、INS（0’）（P=0.014）、T（P=0.042）、HOMA-IR（P=0.000）差异有统计学意义;Hcy、OGTT（0’）、INS（0’）、T、HOMA-index、BMI、年龄指标与CC抵抗呈负相关;Hcy的ROC曲线下面积为0.981,95%CI=0.972-0.990。结论：Hcy在预测难治性CC抵抗的PCOS中是1项最佳的危险预测指标。
