王欢欢 作品数:8 被引量:7 H指数:1 供职机构: 第三军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
XPC蛋白促进膀胱癌细胞DNA损伤修复的作用 被引量:4 2014年 目的探讨着色性干皮病基因C(xeroderma pigmentosum group C,XPC)对膀胱癌T24细胞紫外线(ultraviolet ray,UV)介导的DNA损伤修复的作用及机制。方法利用shRNA策略,Western blot鉴定XPC沉默效果,建立稳定抑制XPC的膀胱肿瘤T24细胞模型;CCK-8法检测UV对细胞增殖的影响;宿主反应实验检测细胞DNA损伤修复能力的差异;免疫荧光检测UV损伤处理、XPC干扰前后p-ATM蛋白分子向细胞核DNA损伤部位募集情况。结果成功建立稳定抑制XPC的膀胱肿瘤T24细胞模型,干扰XPC后,细胞对UV损伤敏感性出现显著差异(P<0.01),干扰组DNA损伤修复能力较对照组降低(P<0.01),p-ATM向损伤区域的募集作用降低(P<0.01)。结论 UV损伤条件下,膀胱癌T24细胞通过XPC介导p-ATM向损伤区域的募集,以降低细胞UV损伤修复能力。 王欢欢 黄亚琴 余瑾 石家仲 陈志文 杨劲关键词:膀胱癌 DNA损伤 紫外线 膀胱癌XPC表达缺失参与影响染色体中心体畸变的分子机制研究 细胞基因组DNA不断受到来自环境的各种外源性因素和来自机体的内源性因素损伤,在众多的修复途径中,核苷酸切除修复(NER)在多种损伤类型中发挥作用,被认为是维持细胞遗传稳定性的主要途径之一。XPC分子是NER修复通路中最早... 王欢欢 陈志文 支轶 张艺 杨劲关键词:XPC 膀胱癌 中心体 染色体畸变 DNA损伤修复 文献传递 肿瘤细胞XPF表达量与顺铂耐药的相关性研究 目前,顺铂广泛应用于临床抗肿瘤治疗中,但肿瘤耐药的出现严重制约其抗肿瘤效果.因而,寻找克服顺铂耐药的有效方法成为当前抗肿瘤研究的一个新方向.DNA损伤修复能力的增强是肿瘤耐药的重要机制之一. 张乔 袁方 余瑾 黄亚琴 石家仲 王志 王欢欢 杨劲关键词:XPF 肿瘤 顺铂 耐药 着色性干皮病C组基因蛋白缺失对膀胱癌细胞自噬的影响 被引量:1 2016年 目的探讨膀胱癌细胞中着色性干皮病C组基因(xeroderma pigmentosum group C,XPC)蛋白缺失对自噬的影响。方法利用shRNA策略,建立稳定干扰XPC的膀胱癌T24细胞模型,蛋白印迹技术检测干扰XPC后自噬表征蛋白LC3Ⅱ的表达,瞬时转染GFP-LC3,荧光显微镜观察细胞荧光聚集情况,CCK-8法检测细胞的增殖状况,免疫印迹技术检测自噬及凋亡相关蛋白的表达。结果成功建立干扰XPC的膀胱癌T24细胞模型;干扰XPC后,膀胱癌T24细胞自噬小体的形成[(1.53±0.81)%vs(3.30±0.70)%,P<0.05]明显减少,顺铂作用下膀胱癌T24细胞自噬小体的形成[(2.19±0.37)%vs(3.20±0.29)%,P<0.05]明显减少;顺铂促进XPC缺失后的膀胱癌T24细胞自噬;XPC缺失后的自噬为非保护性自噬。结论 XPC蛋白参与调控膀胱癌T24细胞的自噬。 刘宇 王欢欢 石家仲 黄亚琴 余瑾 杨劲 陈志文关键词:膀胱癌 自噬 DNA损伤 稳定高表达miR-449c的5637膀胱癌细胞株的建立 被引量:1 2016年 目的构建稳定表达miR-449c的人膀胱癌细胞株。方法以HEK293细胞基因组DNA作为模板,采用高保真酶进行扩增得到pre-miR-449c序列,将所得目的片段克隆到Ftet UGW-T载体上;经测序鉴定后,感染5637人膀胱癌细胞;经嘌呤霉素筛选后,利用倒置荧光显微镜观察筛选后的细胞增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达强度,采用荧光实时定量PCR检测miR-449c的表达,Western blot法检测其下游靶基因C-myc蛋白的水平。结果成功构建了Ftet UGW-T/miR-449c慢病毒载体,慢病毒包装后感染5637人膀胱癌细胞成功表达EGFP,感染后的细胞中高表达miR-449c,在稳定表达的膀胱癌细胞中C-myc蛋白表达较对照组显著降低。结论成功构建了稳定高表达miR-449c的5637膀胱癌细胞株。 万鹏飞 黄亚琴 王志 王欢欢 石家仲 杨劲 陈志文关键词:MICRORNA 膀胱癌 C-MYC XPC表达缺失影响染色体畸变的分子机制研究 生物细胞基因组不断受到各种外源性或内源性的损伤刺激,一旦损伤没有及时修复或者错误修复,则易导致损伤的累积乃至突变进而导致染色体畸变(chromosome aberration,CA)。染色体畸变包括染色体结构畸变和染色体... 王欢欢关键词:染色体畸变 分子机制 DNA损伤 文献传递 肿瘤细胞XPF表达量与顺铂耐药的相关性研究 目前,顺铂广泛应用于临床抗肿瘤治疗中,但肿瘤耐药的出现严重制约其抗肿瘤效果。因而,寻找克服顺铂耐药的有效方法成为当前抗肿瘤研究的一个新方向。DNA损伤修复能力的增强是肿瘤耐药的重要机制之一。通过研究DNA损伤修复系统中的... 张乔 袁方 余瑾 黄亚琴 石家仲 王志 王欢欢 杨劲关键词:XPF 肿瘤 顺铂 耐药 文献传递 膀胱癌XPC表达缺失参与影响染色体中心体畸变的分子机制研究 细胞基因组DNA不断受到来自环境的各种外源性因素和来自机体的内源性因素损伤,在众多的修复途径中,核苷酸切除修复(NER)在多种损伤类型中发挥作用,被认为是维持细胞遗传稳定性的主要途径之一. 王欢欢 陈志文 支轶 张艺 杨劲关键词:XPC 膀胱癌 中心体 染色体畸变 DNA损伤修复