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药用真菌Agrocybe aegerita cDNA文库构建及表达序列标签分析: 从药用真菌Agrocybe aegerita子实体干粉获得的混和蛋白组分在体外和体内试验中,都表现出很强的抗肿瘤活性。我们认为药用真菌蛋白质是除多糖之外, 另一大类重要的抗肿瘤活性成分,但由于药用真菌遗传背景极其复杂造成...; 梁一王昆林嘉诚汤子建孙慧; 关键词：药用真菌 CDNA文库; 文献传递

荧光光谱法研究杨树菇半乳糖凝集素与半乳糖和β-半乳糖苷的相互作用被引量：1: 2006年; 半乳糖凝集素是一类具有重要生理功能的蛋白质,杨树菇(Agrocybe aegerita)半乳糖凝集素(AAL)是被报道的第四种真菌半乳糖凝集素。本文用荧光光谱法研究了半乳糖、乳糖和X-gal两种含β-半乳糖残基的分子与AAL的相互作用。研究结果表明:半乳糖对AAL的荧光光谱无明显影响;乳糖的结合使AAL折叠为更紧密的结构而使其光谱蓝移;X-gal与AAL的结合强烈猝灭AAL的荧光,且X-gal的紫外吸收光谱与AAL的荧光发射光谱有一定程度的重叠,由此得出了其反应的结合常数(Kb=7.33×103L.mol-1),结合位点数(n=8.3)及作用距离(r=2.79 nm)。用同步荧光光谱法比较了乳糖和X-gal对AAL构象的影响,结果表明,乳糖和X-gal对AAL的结合方式有可能不同。此结果为深入研究AAL的生理功能提供了线索。; 郭骊骊王昆王迷陈希梁一孙慧; 关键词：荧光光谱

抗肿瘤蛋白AAL与靶蛋白MRG15的共定位研究: 2007年; 一种从食用真菌Agrocybe aegerita中提取的凝集素AAL具有显著的抗肿瘤效果。该蛋白的基因序列已经通过RT-PCR得到。T7噬菌体展示库筛选发现该蛋白可以在体外和细胞核内的细胞周期调控蛋白mortality factor related gene on chro-mosome 15(MRG15)发生相互作用。本实验目的是证实AAL和MRG15在细胞核内的共定位,为AAL与MRG15的体内的互作提供证据。构建质粒,将aal与mrg15分别连接到pEGFP-C1和pDsRed-C1上,共转染Hela细胞。将pEGFP-C1和pD-sRed-C1空载体共转染Hela细胞作为对照。利用激光共聚焦显微镜研究AAL和MRG15在细胞内的共定位。AAL和MRG15均定位在细胞核内,荧光图片的重叠表明AAL和MRG15在核内共定位。而对照组中的EGFP和DS-RED在细胞内呈弥散分布。这些为AAL和MRG15在细胞核内的相互作用提供了证据。; 周泽华梁一林嘉成王亮节王昆; 关键词：凝集素抗肿瘤凋亡共定位

东亚钳蝎毒素BmαTX14的基因组克隆、真核表达纯化及功能的初步研究被引量：5: 2005年; 以东亚钳蝎(Buthus martensii Karsch,BmK)BmαTX14全长cDNA序列设计引物,克隆BmαTX14成熟肽,插入毕赤酵母表达载体pPIC9K中,转化酵母,诱导表达。Tricine-SDS-PAGE和Westernblot分析显示,表达产物以可溶性分子形式存在于培养上清中,诱导84h时的表达量达到高峰,约为120mgL。通过Ni金属螯合层析柱亲和层析、聚乙二醇沉淀、凝胶分子筛层析获得纯化的rBmαTX14融合蛋白,经毒性实验表明,具有明显的抗昆虫活性。同时以蝎基因组总DNA为模板进行PCR扩增,得到BmαTX14基因克隆,序列分析显示:BmαTX14在编码信号肽的基因序列中有1个长408bp的内含子,其基因组织结构具有α型Na+通道毒素的特征。从功能活性和基因组织结构两个角度证实BmαTX14为α型Na+通道毒素。; 吕猛王昆曹志贱蒋达和毛歆李文鑫; 关键词：蝎毒素毕赤酵母真核表达

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王昆