王屹
- 作品数：18 被引量：42H指数：5
- 供职机构：中国康复研究中心更多>>
- 发文基金：北京市教委科技发展计划国家重点基础研究发展计划北京市优秀人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人脐血非造血干细胞的基本特性被引量：6
- 2006年
- 目的:通过对体外培养人脐血来源非造血干细胞生长特性的观察和对细胞免疫表型的检测,探讨人脐血来源非造血干细胞的一般特性,为进一步研究人脐血来源非造血干细胞提供依据。方法:实验于2005-01/10在首都医科大学北京神经科学研究所和首都医科大学组织学胚胎学教研室实验室完成。脐带血由首都医科大学附属天坛医院提供,经密度梯度离心法分离新鲜脐带血,获取的单个核细胞进行培养。①倒置显微镜下观察细胞形态。②培养基中加入白血病抑制因子或用Mescencult间充质干细胞培养基进行培养,记录细胞生长状况。③流式细胞术分析脐血单个核细胞的免疫表型。结果:①人脐血非造血干细胞形态观察:较低密度接种细胞并不能形成大量贴壁细胞,而以5×106细胞密度接种则在48～72h后出现贴壁的梭形细胞,培养过程中细胞形态逐渐形成均一梭形。②生长特性:人脐血非造血干细胞接种5d后增殖速度加快,随后的几天内保持较快的增殖速度,15d后进入平台期。高糖DMEM培养基+胎牛血清和高糖DMEM培养基+胎牛血清+白血病抑制因子,两种培养体系在细胞增殖上未显示差异,白血病抑制因子并没有显著改善人脐血非造血干细胞生长增殖速度。③免疫表型:新鲜脐血经分离得到的单个核细胞中有少量CD34阳性细胞,CD90,CD166阳性细胞比例分别为(24.18±5.46)%和(36.44±6.26)%;人脐血非造血干细胞体外培养10d左右无CD34阳性细胞,CD166阳性细胞的比例达(76.48±4.54)%,较单个核细胞中CD166阳性细胞比例明显增高,并且表达HLA-ABC,而少量表达HLA-DR。结论:合适的细胞接种密度有利于人脐血非造血干细胞贴壁生长。白血病抑制因子并不能增加体外培养的人脐血非造血干细胞的生长增殖速度。人脐血非造血干细胞体外培养10d左右可以获得纯度较高的CD166阳性细胞。
- 王屹季凤清孙海梅赵春礼曾晓蓓杨慧
- 关键词：脐带胎血流式细胞术
- 人脐血干细胞定向分化为神经细胞的诱导方法被引量：5
- 2006年
- 目的:分析人脐血干细胞在体外和体内向神经细胞分化的不同诱导条件。资料来源:应用计算机检索Medline数据库1990-01/2005-10相关脐带血干细胞向神经细胞分化文章,检索词为“umbilicalcordblood,mesenchymalstemcells,neuraldifferentiation”,分别组合进行检索,限定文章语言种类为English,同时计算机检索中文期刊数据库2000-01/2005-10相关脐带血间充质干细胞向神经分化文章,检索词为:“脐带血,间充质干细胞,神经分化”,分别组合进行检索,限定文章语言种类为中文。资料选择:初审资料,选取包括人脐血干细胞分化为神经细胞的文章。纳入标准:①脐带血间充质干细胞。②间充质干细胞向神经细胞分化。排除标准:①脐带血造血干细胞。②文献综述,重复研究,Meta分析类文章。资料提炼:共收集到68篇符合要求的文章,查找全文,选取其中近期相关文章19篇。将所有文章按照脐血干细胞诱导分化体外实验和体内实验进行分类综合。资料综合:脐带血干细胞来源丰富、采集方便、安全,且体外扩增迅速,在体外和体内一定条件下可以分化为神经细胞,然而不同的诱导条件对其分化的影响有不同,人们运用各种手段希望能找到诱导效率较高的诱导方法,包括几种化学诱导剂联合,生长因子之间配伍,化学诱导剂与生长因子联合,或应用接近生理状态的条件培养基等。在改进诱导条件的同时人们开始关注单一表型的细胞群作为实验对象是否能有效地提高诱导效率。研究者以期找到一种高效率而具有应用价值的诱导方法,为将脐带血干细胞应用于神经科学领域提供有力的证据。结论:人脐血干细胞在体外和体内一定条件下可以分化为神经细胞,应用于中枢神经系统疾病的细胞治疗具有广阔前景,然而寻找高效实用的诱导方法仍需要进一步研究。
- 王屹季凤清杨慧
- 关键词：干细胞细胞分化神经细胞
- 318例中国汉族非综合性耳聋患者基因突变分布
- 目的:应用基质辅助激光解析/离子化飞行时间质谱对先天性非综合性耳聋患者进行耳聋基因筛查.
方法:采集318份先天性非综合性耳聋患者抗凝静脉全血,应用多重PCR和基质辅助激光解析/离子化飞行时间质谱的方法进行中国...
- 王屹陈蕾刘志忠
- 关键词：基因突变汉族人群
- 帕金森病患者肠道微生物及短链脂肪酸差异分析被引量：2
- 2022年
- 目的 肠道微生物和短链脂肪酸在帕金森病(PD)中具有重要作用,但其变化情况尚不明确。文中旨在分析PD患者、年龄匹配对照组间,PD不同H-Y分级患者间肠道微生物和短链脂肪酸的差异,寻找可能参与PD病理过程的因素。方法 收集2018年1月至2019年12月北京市海淀医院神经内科门诊就诊的PD患者(PD组,n=20)和体检中心健康人群(对照组,n=13)粪便样本。通过基于16S rRNA高通量测序技术检测肠道微生物群,应用气相色谱-三重四极杆质谱检测两组粪便样本中短链脂肪酸的浓度。结果 PD组和对照组粪便样本中微生物群落组成差异有统计学意义(R=0.266,P=0.002)。与对照组相比,PD组粪便样本中OUTs数量Sobs指数及Chao指数明显降低(P<0.05)。PD组粪便样本中变形菌门、韦荣球菌科和瘤胃菌科(厚壁菌门)细菌、双歧杆菌科(放线菌门)细菌丰度明显高于对照组(P<0.05),氨基酸球菌科(厚壁菌门)细菌显著低于对照组(P<0.05)。PD组粪便样本中丙酸的绝对浓度(10.07±2.80)和乙酸的相对浓度(57.19±6.58)较对照组(16.27±6.91、63.49±6.16)显著下降(P<0.05)。H-Y 3级PD患者拟杆菌门细菌丰度、乙酸的绝对浓度明显高于H-Y 1-2级PD患者(P<0.05)。结论 PD患者肠道微生物多样性降低,部分微生物丰度增加,其代谢产物短链脂肪酸中的乙酸和丙酸浓度减低,为帕金森病提供一种新的预防和治疗方案的选择。
- 王屹陈新平陈亮刘志忠
- 关键词：帕金森病肠道微生物短链脂肪酸
- 人脐血干细胞定向分化为多巴胺能神经元的实验研究被引量：9
- 2007年
- 目的探讨人脐血干细胞定向分化为多巴胺(DA)能神经元的最佳诱导条件。方法体外分离、原代培养人脐血干细胞,流式细胞仪检测其表面标志,分别以EGF+bFGF、ATRA、ATRA+EGF+bFGF、纹状体条件培养液、纹状体星形胶质细胞条件培养液对其进行诱导,倒置相差显微镜观察细胞形态的变化。应用免疫荧光染色技术检测DA能神经元标志物酪氨酸羟化酶(TH)的表达。结果比较各组对人脐血干细胞定向分化为DA能神经元的诱导作用,纹状体星形胶质细胞条件培养液>纹状体条件培养液>ATRA+EGF+bFGF组>ATRA组>EGF+bFGF组>对照组。结论纹状体组织对人脐血干细胞定向分化为DA能神经元的诱导作用优于其他各组,并且此作用可能主要源于纹状体的星形胶质细胞。
- 李荣平季凤清孙海梅王屹曾晓蓓赵春礼杨慧李雪梅贾晓芳
- 关键词：干细胞多巴胺能神经元纹状体免疫细胞化学人脐带血
- 不同诱导因子对人脐带血非造血干细胞神经分化的影响被引量：4
- 2007年
- 目的探讨诱导人脐带血非造血干细胞向神经细胞分化的最佳条件。方法通过密度梯度离心法原代培养脐带血非造血干细胞;用流式细胞术分析脐带血获得的贴壁细胞的CD34、CD90、CDl66、HLA-ABC、HLA-DR等免疫表型;并用不同诱导因子组合:1.维甲酸(RA);2.表皮生长因子(EGF)+碱性成纤维细胞生长因子(bFGF);3RA+EGF+bFGF;4二甲基亚砜(DMSO)+丁羟基茴香醚(BHA)诱导后,用免疫荧光化学法检测各组脐带血非造血干细胞中β-微管蛋白-Ⅲ(β-tubulin-Ⅲ)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、半乳糖苷酶-C(Gal-C)等神经细胞、星型胶质细胞及少突胶质细胞的特异性标记抗原的表达。结果脐带血非造血干细胞CD90、CD166、HLA-ABC表达阳性;无论那一种诱导因子组合,分化为少突胶质细胞的比率均高于神经元及星型胶质细胞;即各组分化为少突胶质细胞数>神经元的细胞数>星型胶质细胞数。对于少突胶质细胞(Ga-C)以RA+EGF+bFGF组合诱导率最高,达57.02%,其次是DMSO+BHA诱导组。而对于神经元及星型胶质细胞的分化各组比较,以RA组最高,其次是DMSO+BHA诱导组合。结论RA对神经元及星型胶质细胞的诱导作用较好,而RA+EGF+bFGF组合对于少突胶质细胞诱导作用最明显。
- 季凤清王屹孙海梅李荣平王丹妮曾晓蓓赵春礼王秀琴杨慧
- 关键词：神经细胞胶质细胞人脐带血
- 不同培养条件下人脐血间充质干细胞的差异被引量：13
- 2006年
- 目的:观察不同条件对人脐血间充质干细胞培养的影响。方法:实验于2004-10/2005-10在首都医科大学组织学胚胎学教研室实验室完成。①用复方枸橼酸血液保存液和肝素钠两种不同的抗凝血剂保存的人脐带血,经密度梯度离心法分离新鲜脐带血,获取的单个核细胞,经椎虫蓝染色进行活细胞计数,比较所获得的单个核细胞数。②用不同密度1×109L-1,2×109L-1,5×109L-1接种单个核细胞,倒置显微镜下观察细胞形态。用流式细胞仪检测所培养的细胞免疫表型。③分别用高糖和低糖DMEM培养液(含体积分数0.1的胎牛血清)培养单个核细胞,其他条件相同,从72h后对所形成的细胞克隆进行计数,对两种培养基形成的细胞克隆和生长状况进行比较。结果:①不同抗凝血剂抗凝的人脐带血所获得的单个核细胞数及细胞生长状态:用肝素钠抗凝血剂保存的人脐带血所获得的单个核细胞数和细胞生长状态明显优于用复方枸橼酸血液保存液保存的人脐带血(P<0.05)。②不同接种密度人脐血间充质干细胞的贴壁生长状态及人脐血间充质干细胞的免疫表型:较低密度接种细胞并不能形成大量贴壁细胞,而以5×109L-1密度接种,72h后单个核细胞开始贴壁并开始形成细胞克隆,在10d后出现梭形细胞,培养过程中细胞形态逐渐形成均一梭形。用流式细胞仪检测所培养的细胞为非造血间充质干细胞。③两种培养基形成的细胞克隆数和生长状况:在10d以后,用低糖DMEM组培养的单个核细胞形成的细胞克隆数与高糖DMEM组相比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:①肝素钠作为人脐带血保存液能获得大量的单个核细胞,有利于人脐血间充质干细胞的培养。②5×109L-1细胞接种密度有利于人脐血间充质干细胞贴壁生长。③用低糖DMEM作为培养人脐血间充质干细胞的培养基有利于细胞克隆的形成和维持,对保持人脐血间充质�
- 孙海梅季凤清李荣平王屹曾晓蓓张立新
- 关键词：胎血干细胞细胞培养技术
- 伴前庭水管扩大的非综合征性听力障碍耳聋基因突变谱研究
- 2023年
- 目的观察伴前庭水管扩大(EVA)的非综合征性听力障碍(NSHI)患者耳聋基因突变谱。方法2015年10月至2016年8月,对湖北宜昌特殊教育学校确诊为NSHI的患者85例进行颞骨CT检查,基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱对GJB2、GJB3、SLC26A4和线粒体DNA(mtDNA)12S rRNA的20个耳聋相关基因突变位点进行检测。结果颞骨CT显示EVA患者31例。与非EVA患者相比,EVA患者携带突变的比例明显增高(χ^(2)=11.160,P=0.001),主要表现为SLC26A4基因中c.919-2A>G突变水平显著增高(χ^(2)=23.870,P<0.001)。结论伴EVA的NSHI患者耳聋基因突变谱不同于非EVA患者,可优化耳聋基因检测方案,为伴EVA的NSHI的早诊断、早干预提供帮助。
- 王屹王屹陈振波王晶俏李勇
- 关键词：前庭水管扩大基因突变
- 一株杂交瘤细胞及其应用
- 本发明公开了一株杂交瘤细胞及其应用。本发明提供的杂交瘤细胞（3H4）pS129syn（3H4），保藏号为CGMCC No.6178。本发明还保护所述杂交瘤细胞pS129syn（3H4）分泌的单克隆抗体。本发明还保护所述单...
- 杨慧段春礼王屹刑昊鲁玲玲赵春礼
- 文献传递
- 康复医院多重耐药菌目标性监测
- 目的:运用PDCA循环质量管理模式,对某三甲康复医院多重耐药菌感染控制进行效果分析.
方法:2013年3月-2015年12月对某康复医院开展MDROs目标性监测,运用PDCA循环质量管理模式完善工作,并对三年M...
- 李晨王屹谢家兴张海青白志珍刘志忠
- 关键词：多重耐药菌目标性监测
