王子露
- 作品数：30 被引量：48H指数：4
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- 4-硝基喹啉-1-氧化物诱导大鼠舌癌过程中Notch1的表达特点被引量：3
- 2014年
- 目的:研究Notch1在大鼠舌癌模型发生发展过程中的表达变化。方法:将40只SD大鼠随机分为对照组(A组10只)和实验组(B、C、D组各10只),使用质量百分比浓度为0.004%的4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline-1-oxide,4NQO)饮用水喂养实验组SD大鼠,用蒸馏水喂养对照组SD大鼠。B、C、D组分别于8、16、24周取大鼠舌体组织;A组在8、16、24周同时各取3只、3只、4只作为正常对照。行常规组织学观察,并使用免疫组织化学法检测Notch1在病变不同阶段的舌粘膜内的表达。结果:4NQO可以有效诱导大鼠舌黏膜鳞状细胞癌的发生。在不同的给药时间点,可以诱导大鼠舌黏膜产生不同程度的癌前病变。Notch1在正常舌黏膜、癌前病变、舌鳞癌中的表达逐渐增高(P<0.01)。随着异常增生程度的增加,阳性表达部位逐渐由基底层向表层扩展,且Notch1的膜型表达逐渐增多。结论:Notch1的高表达及其在细胞膜上的集中表达可能与舌癌的发生、发展过程相关。
- 谢友群王钊储伟明张玮钟旖祁兵王子露吴煜农宋晓萌宋晓萌
- 关键词：舌鳞癌NOTCH1
- RNA干扰抑制人舌鳞癌细胞MMP-1表达对细胞侵袭、转移能力的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨基质金属蛋白酶-1(MMP-1)短发夹RNA(shRNA)的慢病毒表达载体在人舌鳞癌细胞株CAL27中对MMP-1表达及细胞侵袭、转移的作用。方法设计合成用于干扰人MMP-1的shRNA并与载体PLKO.1连接,构建重组的慢病毒载体质粒PLKO.1/MMP-1-shRNA,稳定感染CAL27细胞。Western blot检测CAL27细胞中MMP-1蛋白表达,划痕实验和Transwell实验分别检测CAL27细胞的迁移和侵袭能力。结果成功构建慢病毒载体PLKO.1/MMP-1-shRNA;其能明显下调CAL27细胞中MMP-1蛋白表达,抑制CAL27细胞迁移和侵袭能力。结论慢病毒载体PLKO.1/MMP-1-shRNA能有效抑制MMP-1表达、细胞迁移和侵袭。MMP-1可能是舌鳞癌细胞转移的重要调节因子。
- 郭瑞储伟明王子露
- 关键词：短发夹RNA基质金属蛋白酶-1舌鳞癌细胞
- 微小RNA-29b体外抑制皮肤成纤维细胞胶原蛋白1的研究被引量：4
- 2011年
- 目的探讨微小RNA-29b（miR-29b）如何参与皮肤成纤维细胞胶原蛋白1的表达调控。方法应用生物信息学平台预测靶向胶原蛋白1的miRNA。转染miR．29b模拟物和抑制剂48h后，应用定量逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot检测胶原蛋白1-α1和以的表达。应用荧光素报告酶实验验证胶原蛋白1是否受miR．29b直接调控。结果miR-29b过表达降低胶原蛋白1-α mRNA56，8％／蛋白51．6％、以mRNA47．8％／蛋白40．8％。抑制miR．29b表达增强胶原蛋白1-αmRNA4．4倍／蛋白3．6倍、0L2mRNA2．2倍／蛋白1．7倍。体外共转染报告载体和模拟物后显著降低报告载体的荧光素酶活性，分另0达52．1％和43．4％。且差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-29b是参与皮肤成纤维细胞胶原蛋白1的转录后调控分子之一。
- 王琰玲王子露杨迷芳程杰吴煜农
- 关键词：成纤维细胞微小RNA转录
- NRP-1在调控人舌鳞状细胞癌细胞分化中的作用
- :构建神经纤毛素1(Neuropilin-1,NRP-1)短发夹RNA(short hairpin HNA ,shRNA)慢病毒表达载体，体外评价其对人舌鳞状细胞癌细胞株SCC25(squamous cell carci...
- 唐子春王子露宋晓萌朱江吴煜农
- 关键词：舌鳞状细胞癌细胞分化慢病毒介导
- 体外鉴定甲状旁腺激素相关蛋白与Bmi-1的相互作用
- 2010年
- 目的:探索并鉴定甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone related protein,PTHrP)与Bmi-1的结合作用,为进一步研究PTHrP相关信号转导通路提供线索。方法:应用RT-PCR方法体外扩增鼠源性PTHrP基因,经测序后重组人原核表达载体pGEX-2TK,将构建正确的pGEX-2TK/mPTHrP原核表达载体转化E.coli BL21,IPTG诱导表达。表达产物经活性鉴定,通过体外GST pull-down技术和免疫印迹实验,检测PTHrP与Bmi-1蛋白的相互作用。结果:成功构建和表达了重组载体pGEX-2TK/mPTHrP;通过体外蛋白质结合实验证实了PTHrP与Bmi-1蛋白可以相互作用。结论:PTHrP与Bmi-1蛋白之间存在相互作用,此结果为研究PTHrP介导的下游信号转导通路的机制奠定了基础。
- 王子露苗登顺季吉
- 关键词：甲状旁腺激素相关蛋白BMI-1
- Semaphorin 3A及其受体Neuropilin-1在人舌鳞状细胞癌/大鼠背根神经节共培养中对轴突芽生的影响
- 2012年
- 目的:构建人舌鳞状细胞癌/大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)体外共培养的实验模型,研究神经轴突导向因子Semaphorin 3A(Sema3A)及其受体Neuropilin-1(NRP-1)在肿瘤排斥神经的现象中可能发挥的作用。方法:鉴定Sema3A在人舌鳞状细胞癌细胞系SCC25中的表达以及NRP-1在大鼠DRG神经元中的表达,建立人舌鳞状细胞癌/大鼠DRG体外共培养的实验模型,针对NRP-1靶点进行特异性拮抗,观察SCC25排斥DRG轴突生长的程度变化。结果:免疫荧光结果显示,Sema3A在SCC25中表达,而NRP-1在大鼠DRG神经元中也呈阳性表达;共培养实验结果表明,DRG组织块中NRP-1被特异性拮抗后,SCC25对DRG轴突的排斥程度较对照组明显减弱。结论:Sema3A及其受体NRP-1在SCC25排斥大鼠DRG轴突生长过程中起着重要作用。
- 唐子春王子露宋晓萌朱江吴煜农
- 关键词：舌鳞状细胞癌背根神经节NEUROPILIN-1共培养
- 重组真核表达载体pEGFP-N1/hIL-1ra的构建及其在NIH3T3细胞中的稳定表达
- 2009年
- 目的构建重组人白细胞介素1受体拮抗剂(rhIL-1ra)基因真核表达载体pEGFP-N1/hIL-1ra,稳定转染小鼠成纤维细胞(NIH3T3)并检测其表达,为使用细胞因子拮抗剂基因治疗牙周炎奠定实验基础。方法Trizol法提取人乳腺癌组织总RNA,RT-PCR方法扩增目的基因。胶回收、纯化后产物与克隆载体pMD18-T连接、转化,测序鉴定正确后将重组克隆载体与真核表达质粒pEGFP-N1分别用HindⅢ和BamHⅠ双酶切,体外连接。重组DNA转化感受态细菌E.coliTOP10,筛选阳性克隆并鉴定。将构建正确的pEGFP-N1/hIL-1ra重组质粒DNA由脂质体介导转染NIH3T3细胞,G418加压筛选20d,RT-PCR检测基因的表达,ELISA检测蛋白的表达。结果重组质粒pEGFP-N1/hIL-1ra经PCR及双酶切鉴定均证实人IL-1ra基因已与pEGFP-N1正确重组。稳定转染NIH3T3细胞后,RT-PCR得到目的基因片段,ELISA检测到目的蛋白的表达。结论本实验成功构建了编码人IL-1ra基因的重组质粒pEGFP-N1/hIL-1ra,并获得了稳定表达目的蛋白人IL-1ra的NIH3T3细胞系,为牙周炎基因治疗的后续研究奠定了实验基础。
- 何雅丽苏毅王子露李建民徐艳
- 关键词：真核表达载体稳定转染
- β-tubulin-Ⅲ基因的表达与长春瑞滨治疗非小细胞肺癌疗效关系的研究被引量：6
- 2008年
- 目的:研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤组织中β-微管蛋白-Ⅲ(β-tubulin-Ⅲ)基因的表达与患者对长春碱类药物化疗敏感性的关系,为患者选择适当的药物治疗提供依据。方法:共入选35例NSCLC患者,随机分入长春瑞滨(NVB)联合顺铂(PDD)或卡铂(CBP)组成NP方案化疗组和吉西他滨(GEM)联合PDD或CBP组成GP方案组,观察两组对化疗的反应;同时以RT-PCR法检测患者病理组织中β-tubulin-ⅢmRNA的表达,以Westernblot检测β-tubulin-Ⅲ蛋白的含量。结果:NP组19例,GP组16例,两组患者临床特点无明显差别,对化疗总的有效率相似,在NP组内,有效10例,无效9例,有效患者的肿瘤组织中β-tubulin-Ⅲ mRNA测量值为4.8±1.9,而无效患者为15.8±8.0,两者有显著性差异(P<0.01);有效患者β-tubulin-Ⅲ蛋白的测量值为3.7±1.5,无效患者为13.5±6.2(P<0.01)。GP组7例无效,9例有效,有效与无效患者肿瘤组织中β-tubulin-Ⅲ mRNA和β-tubulin-Ⅲ蛋白表达均无显著性差异(P>0.05)。结论:NSCLC患者肿瘤组织中β-tubulin-Ⅲ基因的表达与患者对长春碱类药物的敏感性有关,β-tubulin-Ⅲ基因高表达,提示对长春碱类药物的敏感性低,宜换用其他药物治疗。
- 王峻蒲骁麟俞明峰马俊青王子露
- 关键词：非小细胞肺癌化学治疗
- PGC-1α-shRNA慢病毒载体对牙髓干细胞分化的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:构建过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(peroxisome proliferators activated receptor γ coactivator 1α,PGC-1α)短发夹RNA(short hairp in RNA,shRNA)慢病毒表达载体,体外评价其对牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSC)分化的影响。方法:根据shRNA设计原则,设计合成用于体内干扰PGC-1α编码序列的shRNA,重组入慢病毒载体PLKO.1。将构建正确的PLKO.1/PGC-1α-shRNA感染DSPC,实时荧光定量PCR检测PGC-1α的表达,细胞化学染色和实时荧光定量PCR检测其对DPSC分化的影响。结果:测序证实重组质粒构建成功;体外试验表明,DPSC转染了PGC-1α-shRNA后PGC-1α表达水平降低,干扰效率达81%,而且细胞钙化结节增多,牙本质涎磷蛋白和Ⅰ型胶原的表达明显上调,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论:慢病毒介导的PGC-1α-shRNA成功在体外抑制了目的基因的表达,并影响牙髓干细胞的分化。
- 王子露曹灵郑阳玉杨迷芳王舒舒于金华
- 关键词：短发夹RNA慢病毒载体牙髓干细胞
- 日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30保护性免疫力持续时间的研究被引量：2
- 2004年
- 目的 确定日本血吸虫单克隆抗独特型抗体 NP30主动免疫诱导保护性免疫力的持续时间。方法 实验组昆明种小鼠腹腔注射 NP30 10μg/鼠 ,主动免疫 3次 ,每次间隔 2周 ,对照组腹腔注射生理盐水。末次免疫后 8、12、16、2 0、2 4周感染日本血吸虫尾蚴 (4 0± 1)条 ,尾蚴感染后 4 0 d行足垫试验。结果 NP30末次免疫后 8、12、16周感染日本血吸虫尾蚴的减虫率为 2 1.4 3%～4 1.16 % ,分别与对照组相比差异有显著性 ;足垫试验结果显示 8、12周实验组与对照组差异有显著性。结论 NP30主动免疫诱导的保护性免疫力持续约 4个月 ;
- 赵文娥冯振卿李玉华仇镇宁王子露李芸茜管晓虹
- 关键词：日本血吸虫抗独特型抗体主动免疫
