王喜军
- 作品数：62 被引量：179H指数：7
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 表达西尼罗热病毒PrM/E蛋白的重组新城疫LaSota疫苗株
- 本发明成功构建了表达西尼罗热病毒(West Nile virus，WNV)PrM/E蛋白的重组新城疫病毒LaSota疫苗株rLa-WNV-PrM/E，其保藏号为CGMCC No.10199，并在小鼠模型中系统评价了重组病...
- 步志高温志远葛金英华荣虹王喜军
- 文献传递
- 抗埃博拉病毒VP40蛋白单克隆抗体的制备及在抗原捕捉ELISA中的应用被引量：9
- 2008年
- 本研究以原核表达、纯化的扎伊尔株埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)VP40蛋白片段免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备单克隆抗体,获得一株分泌抗EBOV VP40蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系。以重组杆状病毒表达EBOV VP40蛋白为抗原,经Western blot和间接免疫荧光检测该单克隆抗体显示出良好的特异性免疫反应。采用该株杂交瘤细胞系经腹腔注射接种8日龄BALB/c小鼠,制备腹水,并经纯化和HRP标记,获得HRP标记的抗EBOV VP40蛋白单克隆抗体。从而,初步建立一种抗原捕捉ELSIA诊断方法,以原核表达EBOV VP40蛋白片段兔抗血清为一抗,应用HRP标记的抗EBOV VP40蛋白单克隆抗体检测杆状病毒表达的重组EBOV VP40蛋白显示出良好的敏感性和特异性。结果表明,初步建立的抗原捕捉ELSIA诊断方法有希望成为一种理想的检测EBOV感染的诊断方法。
- 王淑杰王喜军胡森秦立廷林祥梅步志高
- 关键词：单克隆抗体
- 狂犬病毒Evelyn-Rokitnicki-Abelseth(ERA)减毒活疫苗候选株的构建与筛选
- 本发明涉及一种狂犬病毒减毒疫苗突变株，其中狂犬病毒的糖蛋白的333位点由精氨酸突变为谷氨酸。本发明还涉及该狂犬病毒减毒疫苗突变株的制备方法和应用。
- 步志高夏咸柱葛金英王喜军杨松涛冯娜
- 犬瘟热病毒CDV/R-20/8疫苗株的反向遗传操作系统及其应用
- 本发明涉及一种犬瘟热病毒(Canine distemper virus，CDV)CDV/R-20/8疫苗株的反向遗传操作系统及其应用，该系统包含：转录质粒，所述转录质粒能够表达所述犬瘟热病毒CDV/R-20/8疫苗株的基...
- 步志高夏咸柱王喜军冯娜葛金英高玉伟
- 文献传递
- 嵌合狂犬病病毒株rLEP333Q-L(H)的构建及其生物学功能的研究
- 本发明属于重组病毒疫苗领域。本发明涉及一株嵌合狂犬病病毒rLEP333Q-L(H)弱毒疫苗株，其表达的狂犬病病毒rLEP糖蛋白第333位精氨酸(Arg)突变为谷氨酰胺(Gln)，同时将L基因替换为HEP的L基因。本发明还...
- 步志高陶丽红葛金英王喜军
- 文献传递
- AP2M1在狂犬病病毒侵入中的作用研究被引量：3
- 2019年
- 本研究前期利用RNA干扰技术在人类全基因组水平上筛选到了与狂犬病病毒(RABV)生命周期有关的宿主基因AP2M1。为进一步研究AP2M1影响RABV感染的机制,本实验在人胚胎肾细胞(HEK-293)中沉默或过表达AP2M1,采用高内涵筛选、病毒滴度检测等方法分析AP2M1对RABV感染率的影响。结果显示:敲低AP2M1,RABV感染率显著下降;过表达AP2M1,RABV感染率上升。酸绕过实验显示AP2M1在RABV感染过程中发挥作用。激光共聚焦观察显示RABV G蛋白与AP2M1无共定位。免疫共沉淀实验显示AP2M1与RABV G蛋白无直接相互作用。本研究结果表明,AP2M1基因在RABV感染过程中发挥作用,但不是通过与RABV G蛋白的直接作用影响病毒的感染。本研究为阐明AP2M1在RABV生命周期中具体作用奠定了基础。
- 马骁王翀王金良王子龙王鑫鑫帅磊王喜军葛金英温志远步志高
- 关键词：狂犬病病毒G蛋白
- 表达狂犬病病毒G蛋白重组犬瘟热病毒Snyder Hill株的构建及鉴定
- 2019年
- 为构建一株表达狂犬病病毒(RV) G蛋白的重组犬瘟热病毒(CDV),本研究以本实验室分离的CDVSnyder Hill疫苗株为基础,在CDV P和M基因之间插入RV弱毒疫苗株ERA G蛋白基因,构建重组质粒p CI-CDV-RVG及表达CDV N、P和L蛋白的辅助质粒p CI-CDVN、p CI-CDVP和p CI-CDVL,将重组质粒和辅助质粒共转染BSR细胞,拯救获得了表达RV G蛋白的重组犬瘟热病毒(rCDV-RVG),将该重组病毒在Vero细胞中传代,通过RT-PCR、间接免疫荧光试验(IFA)和western blot鉴定。结果显示RV G基因能够在r CDV-RVG中稳定存在并正确表达。病毒生长动力学曲线显示,重组病毒在Vero细胞中的增殖效率与拯救的亲本病毒r CDV无显著差异(p>0.05)。本研究表明CDV Snyder Hill株作为载体表达外源基因的潜力,为研制高效、安全、廉价的CDV-RV二联活载体疫苗奠定基础。
- 李翠霞王喜军赵丹丹帅磊步志高葛金英
- 关键词：狂犬病病毒G蛋白
- 杆状病毒表达SARS冠状病毒核蛋白作为诊断抗原的研究
- 2004年
- 严重急性呼吸道综合症(SARS)是新出现的人类病毒性传染.作为新发传染病,人类对SARS-CoV具有高度的易感性.SARS-CoV感染者大量表现为隐形感染或一过性非典型肺炎症状.同时,种种迹象显示动物,特别是野生动物可能是该病毒的自然储藏宿主或传播宿主.开展广泛、严密的血清学调查,对流行病学监测、查清自然或传播宿主SARS-CoV源意义重大.……
- 胡森王喜军王清华邓国华王笑梅吴东来步志高
- 表达西尼罗热病毒PrM/E蛋白的重组新城疫LaSota疫苗株
- 本发明成功构建了表达西尼罗热病毒(West Nile virus，WNV)PrM/E蛋白的重组新城疫病毒LaSota疫苗株rLa‑WNV‑PrM/E，其保藏号为CGMCC No.10199，并在小鼠模型中系统评价了重组病...
- 步志高温志远葛金英华荣虹王喜军
- 文献传递
- 杆状病毒表达SARS冠状病毒核蛋白抗原性的研究被引量：3
- 2005年
- 目的 对杆状病毒表达SARS冠状病毒NP抗原性进行分析与比较。方法 利用SDS PAGE、Western Blot和ELISA证明重组核蛋白(rSN)在昆虫细胞获得高效表达,具有特异免疫反应原性。结果 表达rSN的昆虫细胞裂解、稀释后直接包被ELISA板,来检测SARS CoV康复病人血清特异抗体,敏感性稍高于Vero细胞培养的全病毒(OD分别为2 .8和0 .6 ) ,与健康人血清不发生特异反应(OD值为0 .0 1) ;表达rSN昆虫细胞用于间接免疫荧光,快速检测血清特异抗体反应,同样表现了良好的敏感性和特异性。结论 昆虫细胞表达rSN有望替代SARS CoV全病毒,作为安全、敏感和特异的诊断抗原,应用于ELISA和IFA血清学检测。
- 胡森王喜军王清华吴东来邓国华王笑梅步志高
- 关键词：SARS冠状病毒核蛋白重组杆状病毒IFA
