王利芳
- 作品数：8 被引量：22H指数：3
- 供职机构：泸州医学院更多>>
- 发文基金：四川省卫生厅科研基金四川省教育厅科学研究项目泸州市科技局基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 吸虫排泄分泌产物成分及其功能的研究进展被引量：3
- 2010年
- 吸虫是一类重要的人兽共患寄生虫，不仅影响水产业和家畜业的生产，还严重威胁人类的健康。吸虫的排泄分泌产物（excretory—secretory products，ESP）在虫体致病机制中发挥重要的作用，研究其组成成分和相应的功能对探讨虫体和宿主的相互关系有重要的意义。目前已开展通过蛋白质组学和基因组学的相关技术对ESP的成分进行分离、提纯、重组表达，并在体内、外探讨各生物活性分子的生物活性和免疫调节功能的研究。该文就吸虫排泄分泌产物及功能的国内外研究进展作一综述。
- 王利芳张锡林
- 关键词：吸虫蛋白质组学
- 微量研磨器
- 本实用新型公开了一种微量研磨器，包括研磨管和研磨棒，所述研磨管分为上下两部分，上部为圆柱形，下部为圆锥形，所述研磨棒包括研磨柄和位于研磨柄前端的研磨头，所述研磨头为与研磨管的圆锥形部分相配合的圆锥形；本实用新型中，研磨管...
- 佘俊萍王利芳张锡林
- 文献传递
- 人体蠕形螨基因组DNA提取方法的比较研究被引量：2
- 2011年
- 目的比较两种人体蠕形螨基因组DNA提取方法，用随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphicDNA，RAPD）方法进行初步分析。方法分别用经典方法和小型昆虫试剂盒提取人体蠕形螨基因组DNA，并设计5条随机引物，应用RAPD技术对人体毛囊蠕形螨基因组DNA进行随机扩增，扩增产物经1．5％琼脂糖凝胶电泳后分析。结果小型昆虫试剂盒提取人体蠕形螨基因组DNA的纯度高于酚氯仿抽提方法，但浓度低。引物P3扩增出2条人体蠕形螨条带。引物P4扩增出3条条带。结论经典方法提取人体蠕形螨基因组的DNA能够满足基因组DNA的RAPD分析要求。
- 佘俊萍张锡林王光西杨燕何谐王利芳
- 关键词：毛囊蠕形螨DNA抽提随机扩增多态性DNA
- 三种显微技术对人毛囊蠕形螨的观察和研究被引量：8
- 2011年
- 目的采用荧光显微镜、扫描电镜和激光共聚焦显微镜对人体毛囊形蠕形螨进行形态学观察。方法选用5μg/mL碘化丙啶(propidine iodide,PI)对虫体进行荧光染色,避光染色15min,分别置于荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察;2.5%戊二醛固定虫体标本,梯度酒精和叔丁醇脱水,金喷镀后扫描电镜观察。结果荧光显微镜下碘化丙啶对虫体有很强的结合力,虫体荧光信号均匀展示于细胞表面,充分展现虫体形态,扫描电镜更加清楚、细致地展示人体毛囊型蠕形螨的超微结构,激光共聚焦显微镜将虫体分层扫描图片进行三维重建,真实、完全、直观地展露了虫体。结论三种显微技术均可展示蠕形螨超微形态。PI对虫体有很好的荧光染色作用,使激光扫描共聚焦显微镜能够获得更加精准的超微形态结构,结合三维重建技术有着广泛的应用价值。
- 佘俊萍张锡林王光西荣华牛慧王利芳
- 关键词：碘化丙啶荧光显微镜激光共聚焦显微镜扫描电镜
- 斯氏狸殖吸虫童虫、成虫排泄分泌产物的分析研究被引量：3
- 2010年
- 目的分析斯氏狸殖吸虫童虫、成虫排泄分泌产物(ES)的蛋白条带和抗原性,并对两者进行免疫组织定位。方法十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离斯氏狸殖吸虫童虫ES蛋白、童虫虫体可溶性蛋白、成虫ES蛋白、成虫虫体可溶性蛋白,采用Western-blot方法分别用肺吸虫病人血清、小鼠抗血清识别特异性反应条带,并用酶标免疫组织化学技术对ES抗原进行组织定位。结果经SDS-PAGE分离的斯氏狸殖吸虫的虫体可溶性蛋白和ES蛋白,Western-blot结果显示,感染血清识别的童虫ES蛋白、成虫ES蛋白条带分别在28000、70000Mr和90000Mr处,小鼠抗血清识别的童虫ES蛋白、成虫ES蛋白条带分别在28000、70000Mr和45000、70000Mr处。童虫ES主要定位在后尾蚴的排泄囊,成虫ES主要定位在成虫肠腔上皮。结论 28000、70000Mr的童虫ES蛋白可能为斯氏狸殖吸虫的特异诊断抗原。
- 王利芳张锡林牛靖萱何谐陈琳
- 关键词：斯氏狸殖吸虫
- 免疫组化技术对斯氏狸殖吸虫成虫免疫诊断相关抗原的初步研究被引量：4
- 2010年
- 目的初步分析斯氏狸殖吸虫成虫表膜和肠相关抗原,探讨肺吸虫病的免疫诊断的特异性诊断抗原。方法斯氏狸殖吸虫成虫制备成15μm的冰冻切片,肺吸虫患者血清识别斯氏狸殖吸虫成虫特异性抗原,采用免疫金标记和免疫酶标记检测技术对抗原进行定位,激光共聚焦显微镜技术进行半定量分析以及免疫透射电镜对其细微结构的观察。分实验组和对照组。结果肺吸虫患者血清识别的斯氏狸殖吸虫成虫抗原定位于虫体的表膜和肠腔,表膜抗原半定量分析平均灰度值为80.65,肠腔抗原半定量分析平均灰度值为71.26,电镜下可见胶体金附着于肠腔和表膜的双层结构。结论肺吸虫患者血清识别的斯氏狸殖吸虫成虫抗原都为表膜相关抗原和肠相关抗原,因此与肺吸虫病免疫诊断相关的诊断抗原为虫体表膜和肠上皮产生的相关蛋白。
- 牛靖萱张锡林王利芳陈文碧何谐陈琳
- 关键词：斯氏狸殖吸虫表膜肠腔免疫组化
- 三峡库区上、下游血吸虫病流行区钉螺线粒体cox1基因遗传变异研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究三峡库区上、下游血吸虫病流行区钉螺线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚单位1(cox1)基因的遗传变异。方法采集三峡库区上游四川、云南及下游安徽、湖北4省共7个地、市的钉螺样本,提取基因组DNA,PCR特异性扩增线粒体cox1基因并测序,用ClustalX(1.81)软件进行多序列比对,MEGA(4.0)软件Kimura2-parameter法计算遗传距离,邻接法(NJ)和最大简约法(MP)构建系统发生树。结果上游与下游不同地域株钉螺间cox1基因差异约为16%,下游地区的肋壳与光壳钉螺cox1基因差异约为3.7%,上游不同地域株钉螺碱基差异约为5.4%。遗传距离显示,上游四川与云南地域株的遗传距离为0.022～0.050,下游安徽与湖北地域株的遗传距离为0.014～0.027,而上游与下游各地区螺群间的遗传距离在0.127～0.138之间,明显大于上游或下游各地区螺群内的遗传距离。进化树结果表明,下游湖北的荆州、石首和安徽的芜湖、宁国钉螺形成一支系,上游四川的绵竹、新都钉螺同属一支系,但两种方法构建的进化树在云南大理钉螺的归属上存在差异,MP法提示大理钉螺从上游的分支中独立出来,单独形成一类。结论上游与下游不同地域株钉螺cox1基因遗传差异较显著,下游肋壳和光壳钉螺种群内遗传变异较小,而上游光壳钉螺种群内遗传变异较大。
- 陈琳张锡林何谐牛慧王利芳
- 关键词：湖北钉螺线粒体DNA遗传多态性
- 荧光双染和三维重建技术对蠕形螨的形态观察和功能探讨被引量：2
- 2012年
- 目的分别采用两种荧光染料对人体蠕形螨染色后置于激光共聚焦显微镜下进行三维重建,对其重要结构进行功能性探讨。方法先用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)对虫体进性初染,再用碘化丙啶(propidium iodide,PI)复染,置于激光共聚焦显微镜下,用Imaris5.0软件进行三维重建,观测、鉴定毛囊蠕形螨形态特征。结果异硫氰酸和碘化丙啶均能与虫体充分结合,在三维重建技术下清楚观察到了虫体外部形态及前段摄食通道等内部结构。结论荧光双染和三维重建技术的结合,对深入研究人体蠕形外部形态、内部结构及探讨其功能、意义奠定了坚实基础。
- 佘俊萍张锡林王光西孙源王利芳胡朝惠
- 关键词：蠕形螨异硫氰酸碘化丙啶三维重建
