王中乾
- 作品数：6 被引量：10H指数：3
- 供职机构：西南民族大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 脂质体介导外源基因体外转染牦牛乳腺上皮细胞条件的优化(英文)
- 2010年
- [目的]优化脂质体介导外源基因体外转染牦牛乳腺上皮细胞的条件。[方法]通过胶原酶消化法和组织块贴壁法,体外分离培养得到牦牛乳腺上皮细胞。采用免疫细胞化学技术检测细胞角蛋白在细胞内的表达。以绿色荧光蛋白为报告基因,通过脂质体介导外源基因转染牦牛乳腺上皮细胞,统计在不同细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间下的转染效率,寻求最佳转染条件。[结果]采用胶原酶消化法,24h内细胞团块贴壁生长,纤维样细胞沿着细胞团块生长,后上皮样细胞爬出。上皮细胞与纤维细胞界限明显,细胞呈椭圆形,排列紧密,岛屿状生长。纯化至5代左右可得到较纯的上皮样细胞。采用组织块贴壁法,6d左右组织块周围出现细胞晕,有少量纤维样细胞生长;8d左右,上皮样细胞长出,并往外不断铺展。在荧光显微镜下观察,试验组细胞角蛋白检测呈阳性,细胞质呈绿色,细胞核复染呈红色。牦牛乳腺上皮细胞在细胞融合度为81%～90%,脂质体的量为1.8μl,脂质体与质粒比例为2∶1,转染时间为4h时,转染效率最高。[结论]该研究可为乳腺生物反应器构建提供试验依据。
- 田甜李键王中乾
- 关键词：免疫细胞化学转染
- 牦牛异种核移植显微操作针的制备被引量：3
- 2010年
- 结合制备用于牦牛异种核移植显微操作针的经验,介绍了制备显微操作用针的具体方法,并对一些在显微操作针制作过程中可能出现的影响因素及其注意事项加以总结。
- 王中乾李键毕琳田甜罗添添
- 关键词：核移植胚胎
- 小鼠乳腺上皮细胞体外原代培养方法研究进展被引量：5
- 2010年
- 综述了有关于小鼠乳腺上皮细胞体外原代培养方法的研究进展,阐述了乳腺细胞培养的意义,介绍了乳腺组织原代培养的过程,并分析了所取得的研究成果。
- 毕琳李键王中乾
- 关键词：小鼠乳腺上皮细胞原代培养细胞工程
- 激素和生长因子对牦牛乳腺上皮细胞生长的影响
- 实验通过胶原酶消化法,分离培养获得牦牛乳腺上皮。为观察激素和生长因子对牦牛乳腺上皮细胞生长影响,添加一定浓度的胎牛血清、胰岛素、胰岛样生长因子-1、氢化可低松,转铁蛋白-硒钠。倒置显微镜观察细胞形态,通过细胞计数绘制牦牛...
- 田甜李键毕琳梁天宇王中乾
- 关键词：激素
- 文献传递
- 激素和生长因子对牦牛乳腺上皮细胞生长的影响
- 实验通过胶原酶消化法，分离培养获得牦牛乳腺上皮。为观察激素和生长因子对牦牛乳腺上皮细胞生长影响，添加一定浓度的胎牛血消、胰岛素、胰岛样生长因子-1、氢化可低松，转铁蛋白-硒钠。倒置显微镜观察细胞形态，通过细胞计数绘制牦牛...
- 田甜李键毕琳梁天宇王中乾
- 关键词：牦牛乳腺上皮细胞激素胶原酶消化法
- 脂质体介导外源基因体外转染牦牛乳腺上皮细胞条件的优化被引量：3
- 2010年
- [目的]优化脂质体介导外源基因体外转染牦牛乳腺上皮细胞的条件。[方法]通过胶原酶消化法和组织块贴壁法,体外分离培养得到牦牛乳腺上皮细胞。采用免疫细胞化学技术检测细胞角蛋白在细胞内的表达。以绿色荧光蛋白为报告基因,通过脂质体介导外源基因转染牦牛乳腺上皮细胞,统计在不同细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间下的转染效率,寻求最佳转染条件。[结果]牦牛乳腺上皮细胞在细胞融合度为81%～90%,脂质体的量为1.8μl,脂质体与质粒比例为2∶1,转染时间为4h时,转染效率最高。[结论]该研究可为乳腺生物反应器构建提供试验依据。
- 田甜李键王中乾
- 关键词：免疫细胞化学转染
