牛坤
- 作品数：60 被引量：38H指数：3
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- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学农业科学更多>>
- 一种辅因子平衡的高产D-泛酸的基因工程菌、构建及应用
- 本发明涉及一种辅因子平衡的高产D‑泛酸的基因工程菌、构建方法，及其在微生物发酵制备D‑泛酸中的应用。所述基因工程菌通过以下步骤构建获得：(1)以大肠杆菌Escherichia coli ZJB18003(CCTCC NO...
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- 一种发酵生产D-泛酸的方法
- 本发明公开了一种发酵生产D‑泛酸的方法，在发酵培养时将保藏号为CCTCC NO：M2018914的大肠杆菌接种到发酵培养基中发酵培养生产D‑泛酸，当发酵至13h时，往发酵罐中流加补料培养基，控制发酵液中葡萄糖的浓度为0....
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- 文献传递
- 一种高产L-甲硫氨酸的重组大肠杆菌及其应用
- 本发明公开了一种高产L‑甲硫氨酸的重组大肠杆菌及其应用，所述重组大肠杆菌按如下方法构建：应用CRISPR‑Cas9基因编辑技术在大肠杆菌基因组中将L‑甲硫氨酸合成酶基因启动子分别替换为trc启动子，引入宿主菌基因组，筛选...
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- 文献传递
- 一种用于重组表达棘白菌素B脱酰基酶的表达盒及应用
- 本发明公开了一种用于重组表达棘白菌素B脱酰基酶的表达盒及应用，所述表达盒包括依次连接的启动子核酸序列、RBS核酸序列、编码OmpA信号肽的核酸序列、编码第一促溶肽的核酸序列、编码棘白菌素B脱酰基酶α亚基的核酸序列、第一终...
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- 文献传递
- 一种高产两性霉素B的重组结节链霉菌及其应用
- 本发明公开了一种产两性霉素的重组结节链霉菌及其应用，所述重组结节链霉菌是将SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4与SEQ ID NO.5所示的透明颤菌血红蛋白(Vh...
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- 代谢工程改造大肠杆菌一碳模块高效合成L-甲硫氨酸被引量：1
- 2023年
- L-甲硫氨酸又名L-蛋氨酸,是人体必需8种氨基酸之一,在饲料、医药、食品领域具有重要应用。以实验室前期构建的M2(Escherichia coli W3110?IJAHFEBC/PAM)为出发菌株,以模块化代谢工程策略构建了一株L-甲硫氨酸高产菌株。首先通过过表达亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MetF)和筛选不同来源的丝氨酸羟甲基转移酶(hydroxymethyltransferase,GlyA),增强了一碳模块甲基供体的生成,优化了一碳模块。随后针对一碳模块的前体供应,过表达了胱醚裂解酶(cysteamine lyase,MalY)和半胱氨酸内运基因(fliY),有效地提高了L-高半胱氨酸和L-半胱氨酸的供应。最终摇瓶发酵L-甲硫氨酸的产量由2.8 g/L提高至4.05 g/L,5 L发酵罐中达到18.26 g/L。研究结果表明,一碳模块对L-甲硫氨酸的生物合成具有十分重要的影响,在细胞内通过优化一碳模块,可以实现L-甲硫氨酸的高效生物合成。本研究为进一步提高微生物发酵生产L-甲硫氨酸的水平奠定了基础。
- 张博王莹王莹柳志强牛坤
- 关键词：生物合成L-甲硫氨酸代谢工程发酵工程
- 一种产O-乙酰L-高丝氨酸菌株发酵方法
- 本发明属于代谢改造菌株发酵技术领域，公开了一种优化后的产O‑乙酰L‑高丝氨酸菌株发酵方法，所述产OAH菌株的优化后的发酵条件为：初始甘油浓度为37.46g/L，氯化铵浓度为3.43g/L，酵母粉浓度为6.82g/L。本发...
- 柳志强刘鹏张博牛坤郑裕国
- 文献传递
- 阿尼芬净合成前体棘白菌素B发酵条件优化被引量：1
- 2017年
- 阿尼芬净为新一代棘白菌素类抗生素,其前体物质棘白菌素B(ECB)发酵单位的高低将直接影响阿尼芬净的市场前景.利用构巢曲霉发酵合成ECB,采用单因素实验考察不同参数对ECB产量的影响.结果显示:低温培养有利于ECB的合成,选择前3天37℃培养,后9天25℃培养,ECB产量可达1 237 mg/L,比25℃恒温培养提高了69.9%;最佳的初始pH为6.5;添加0.6g/L ZnCl2可使ECB产量达到1 100mg/L,比初始发酵培养基提高了69.2%;前体物质脯氨酸及鸟氨酸的添加可以显著提高ECB产量,在第6天添加2g/L脯氨酸或在第3天添加2g/L鸟氨酸可使ECB产量分别提高57.4%和55.2%.
- 牛坤吴豪毛健邹树平
- 关键词：构巢曲霉发酵
- 一种棘白菌素B合成培养基及应用
- 本发明公开了一种棘白菌素B合成培养基及制备棘白菌素B的应用，所述培养基质量浓度组成为：油酸甲酯20‑100g/L，淀粉10‑60g/L，油酸10‑30g/L，组氨酸10‑30g/L，谷氨酸5‑20g/L，L‑苏氨酸2‑5...
- 胡忠策郎克鹏牛坤邹树平柳志强郑裕国
- 文献传递
- 代谢工程改造Escherichia coli生产3-羟基丙酸
- 2017年
- 以提高3-羟基丙酸的产量为目标,对实验室构建的基因工程大肠杆菌进行改造,敲除形成副产物1,3-丙二醇的主要酶基因——乙醛脱氢酶基因yqh D,得到E.coli W3110Δyqh D(p CDFDuet-tac-gpd1-TUkgsadh/p ACYCDuet-tac-dha B1-4),该工程菌摇瓶发酵产量达到2.53 g/L,相比未敲除yqh D基因的菌株,产量提高了5.8倍。另外,敲除了甘油代谢途径中的抑制因子glpR基因,得到E.coli W3110ΔglpR(p CDFDuet-tac-gpd1-TUkgsadh/p ACYCDuet-tac-dha B1-4),该工程菌摇瓶发酵产量达到2.86 g/L,相比未敲除glpR基因的菌株,产量提高了6.7倍。后经5 L罐发酵培养后,3-羟基丙酸的产量提升到15.4 g/L。该实验为进一步利用大肠杆菌工程菌发酵生产3-羟基丙酸提供了研究基础。
- 程秀丽秦海彬熊涛牛坤
- 关键词：3-羟基丙酸基因敲除重组大肠杆菌
