潘松
- 作品数:13 被引量:15H指数:2
- 供职机构:咸宁学院更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- Math1基因重组慢病毒的构建及其在293T细胞中的表达被引量:2
- 2011年
- 目的构建携带Math1基因的重组慢病毒载体,检测其滴度,检测其在293T细胞中的表达。方法 PCR扩增Math1基因,将其连入慢病毒载体pLenti-GFP中;在感受态细胞DH5α中培养扩增,并行Math1基因的测序鉴定;将重组的慢病毒四质粒共转染293T细胞,收获并浓缩病毒;感染293T细胞和提取细胞DNA后用实时定量PCR法检测病毒滴度。用逆转录PCR和Western blot法检测Math1基因在感染病毒的293T细胞中的表达。结果构建的慢病毒载体pLenti-Math1-GFP经测序分析证实基因序列正确。四质粒共转染293T细胞后,荧光显微镜下可见大量绿色荧光。包装后慢病毒测定滴度约为3×1011Tu/L。逆转录PCR和Western blot法均能检测Math1基因在感染病毒的293T细胞中的表达。结论成功构建携带Math1基因的重组慢病毒,并能在293T细胞中表达。
- 潘松付勇刘强刘立思刘杰
- 关键词:MATH1慢病毒293T细胞
- 胚胎大鼠神经干细胞的冷冻及复苏被引量:2
- 2010年
- 目的:研究胚胎大鼠神经干细胞(NSCs)冻存复苏后的存活率及再培养生长情况,观察低温冻存对NSCs生物特性的影响。方法:含有10%BSA及7.5%DMSO的NSCs无血清培养液(不含神经生长因子)作为冻存液,将利用无血清培养液体外培养的原代、第3代、第6代胚胎大鼠NSCs进行冻存,于1周、4周、8周、12周、16周分别复苏,计数活细胞比例并进行再培养、分化鉴定。结果:不同的细胞代数,不同的冻存时间对复苏后的细胞存活率都无明显影响。复苏后NSCs的存活率均达到60%~70%,并能分化为神经元和星型胶质细胞。结论:本实验成功地对胚胎大鼠NSCs进行了冻存复苏及再培养,为择期应用NSCs耳蜗内移植治疗感音神经性聋的实验研究奠定了基础。
- 付勇潘松刘强龚树生
- 关键词:神经干细胞胚胎冻存
- NF-κB在上颌窦鳞状细胞癌中的表达被引量:4
- 2006年
- 【目的】探讨核因子-κB(NF-κB)在上颌窦鳞状细胞癌中的表达及其与主要临床指标间的关系。【方法】采用免疫组化SP法检测42例上颌窦鳞状细胞癌和20例正常上颌窦黏膜组织中NF-κB的表达情况。【结果】20例正常上颌窦黏膜组织表达全部为阴性,42例上颌窦鳞状细胞癌中28例NF-κB表达上调(阳性率66.7%)。NF-κB的表达与肿瘤分期、淋巴结转移之间无明显相关性,而与组织分化程度显著相关,低分化上颌窦鳞状细胞癌较中、高度分化上颌窦鳞状细胞癌NF-κB的表达明显增高(P<0.05);具有NF-κB阳性表达的上颌窦鳞状细胞癌患者3年生存率明显低于阴性患者(P<0.05)。【结论】NF-κB的表达在上颌窦鳞状细胞癌的发生、发展中起一定作用,并可作为判断上颌窦鳞状细胞癌生物学行为和预后的一个参考指标。
- 吕红吴立连潘松
- 关键词:上颌窦肿瘤NF-ΚB
- 胚胎大鼠海马源性神经干细胞的分离、培养、分化和鉴定被引量:2
- 2011年
- 目的:探讨胚胎大鼠海马源性神经干细胞(N SC)的分离、培养、分化和鉴定的方法。方法:机械分离出胚胎大鼠海马区细胞,以无血清培养基培养,再以血清培养基诱导其分化;在显微镜下观察其形态学特征,逆转录PCR(RT-PCR)和免疫荧光化学法检测神经干细胞和其诱导后细胞的表面标志物。结果:无血清培养基条件下培养的细胞在光镜下可见呈悬浮生长,易聚集成神经球,RT-PCR和免疫荧光化学法可检测到N SC表面标志物N estin的表达;经血清培养基诱导分化后,光镜下可见细胞呈贴壁生长,可见胞体呈树突状突起或呈梭形,RT-PCR和免疫荧光化学法可检测到星形胶质细胞的表面标志物GFAP和神经元细胞的表面标志物N SE的表达。结论:胚胎大鼠海马区分离的细胞具有N SC的特性,并能在含特定生长因子的无血清培养基保持其分化潜能,为进一步针对N SC的研究奠定了基础。
- 潘松付勇刘强刘杰刘立思
- 关键词:细胞分离细胞培养干细胞海马胚胎
- Re1A反义寡核苷酸对喉癌Hep-2细胞增殖的影响被引量:1
- 2010年
- 目的:探讨Re1A反义寡核苷酸对喉癌Hep-2细胞增殖的影响。方法:设计Re1A反义寡核苷酸序列,转染Hep-2细胞后在不同的时间点行MTT检测瘤细胞生长抑制情况,取转染48h的Hep-2细胞行克隆形成实验,应用RT-PCR和Western blot检测RelA mRNA和蛋白的表达。结果:MTT显示转染Re1A反义寡核苷酸可明显抑制Hep-2细胞的增殖,随时间延长抑制率升高,与对照组比较差异有统计学意义。克隆形成实验显示Re1A反义寡核苷酸的Hep-2细胞克隆形成率明显低于对照组,与对照组比较差异有统计学意义。RT-PCR和Western blot结果显示Re1A反义寡核苷酸分别在mRNA和蛋白水平显著抑制RelA基因表达。结论:Re1A反义寡核苷酸可抑制Re1A的mRNA和蛋白的表达,并抑制Hep-2细胞增殖和克隆形成。
- 潘松万敬枝吴立连赵骥
- 关键词:喉肿瘤HEP-2细胞反义寡核苷酸RELA细胞增殖
- 耳后进路大鼠耳蜗中阶侧壁显微注射携带EGFP慢病毒的实验研究被引量:2
- 2010年
- 目的探讨经大鼠耳后进路耳蜗中阶侧壁导入携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)慢病毒的实验可行性,为后续携带目的基因慢病毒治疗大鼠感音神经性聋的实验打下基础。方法大鼠经耳后进路,耳蜗中阶侧壁开孔,显微注射携带EGFP慢病毒液或人工内淋巴液。术后3周,处死动物取耳蜗,行耳蜗冰冻切片,荧光显微镜下观察携带EGFP慢病毒的表达情况。术前和术后3周动物处死前,行听性脑干反应(ABR)检测其听功能改变。结果术中、术后动物一般情况好。EGFP可见在耳蜗中阶血管纹边缘细胞、Corti器、螺旋神经和螺旋神经节细胞内表达。术后实验组大鼠手术耳ABR阈值提高(55.8±4.9)dBSPL。结论大鼠经耳后进路,耳蜗中阶侧壁开窗,可将慢病毒携带的EGFP基因导入,并在耳蜗中阶Corti器表达。
- 潘松付勇刘杰刘立思
- 关键词:耳后进路慢病毒显微注射增强型绿色荧光蛋白
- 核因子-κB在上颌窦鳞状细胞癌中的表达
- 2006年
- 目的探讨核因子-κB(NF-κB)在上颌窦鳞状细胞癌中的表达及其与主要临床指标间的关系。方法采用免疫组化SP法检测42例上颌窦鳞状细胞癌和20例正常上颌窦粘膜组织中NF-κB的表达情况。结果20例正常上颌窦粘膜组织中NF-κB表达全部为阴性,42例上颌窦鳞状细胞癌中28例NF-κB表达上调。NF-κB的表达与肿瘤分期、淋巴结转移之间无明显相关性,而与组织分化程度显著相关,低分化上颌窦鳞状细胞癌NF-κB的表达较中、高度分化上颌窦鳞状细胞癌明显增高(P<0.05)。结论NF-κB的表达在上颌窦鳞状细胞癌的发生发展中起一定作用,NF-κB可能成为上颌窦鳞状细胞癌治疗的新靶点。
- 吕红吴立连潘松
- 关键词:上颌窦肿瘤鳞状细胞核因子-ΚB
- 环氧合酶-2在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义
- 2007年
- 【目的】探讨环氧合酶-2(COX-2)蛋白在喉癌中的表达及其临床意义,同时探讨其在喉乳头状瘤和声带息肉中的表达情况。【方法】采用免疫组化SP法检测38例喉鳞癌、7例喉乳头状瘤及10例声带息肉组织中COX-2蛋白的表达水平。【结果】COX-2蛋白在喉癌中的表达水平明显高于声带息肉(P<0.01);喉乳头状瘤中的表达明显高于声带息肉(P<0.01);声带息肉中几乎未见COX-2表达。在喉癌组的组织分级中,COX-2蛋白在高分化组织中的表达明显高于中度分化(P<0.01)和低分化(P<0.01);在中度分化组织中的表达明显高于低分化(P<0.01);COX-2蛋白在各临床分期、T分级、N分级、肿瘤部位及年龄中差异均无显著性(P>0.05)。【结论】①COX-2蛋白与喉鳞状细胞癌的组织学分化程度密切相关;②COX-2蛋白在小儿喉乳头状瘤复发和成人乳头状瘤发生方面可能起到一定的作用。
- 潘松吴立连梁建伟吕红
- 关键词:鳞状细胞喉肿瘤
- 铁钉滞留咽部1例
- 2006年
- 陶维泉潘松
- 关键词:铁钉透X线异物入院检查半流质饮食粘膜充血椎体高度
- 人工耳蜗植入术在不同内耳畸形中应用的研究进展被引量:2
- 2006年
- 潘松吴立连
- 关键词:人工耳蜗植入术内耳畸形大前庭水管综合征语言交流能力极重度聋人工耳蜗技术