潘勤
- 作品数：47 被引量：46H指数：4
- 供职机构：武汉大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项湖北省杰出青年人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 运用SELEX技术筛选特异性高亲和IVB型纤毛结构蛋白RNA适配子被引量：5
- 2004年
- 目的 获得特异性高亲和IVB型纤毛结构蛋白prepilS的RNA适配子 (aptamers) ,为开发预防、治疗伤寒杆菌肠热症的新型药物试剂奠定基础。方法 采用SELEX技术 (SystematicEvolutionofLigandsbyExponentialEn richment)筛选IVB型纤毛结构蛋白prepilS的特异性适配子 ,通过体外构建一个长度为 88nt含有 30个随机序列的单链DNA(ssDNA)文库 ,PCR扩增为双链DNA随机文库后 ,体外转录构建RNA随机文库 ,以Sepharose 4B为筛选介质 ,筛选具有特异性高亲和力prepilS蛋白的RNA适配子。结果 经 8轮筛选获得具有特异性高亲和prepilS蛋白的RNA适配子库。结论 成功地筛选出具有特异性高亲和力的RNA适配子库 ,该RNA适配子库可显著抑制伤寒杆菌侵入THP
- 潘勤章晓联汪付兵何攀文吴红艳屈雪菊戚中田
- 关键词：伤寒杆菌人体细胞
- 能抑制伤寒杆菌侵入人体细胞的RNA适配子及其制备方法
- 本发明公开了一种能抑制伤寒杆菌侵入人体细胞的RNA适配子，涉及微生物感染免疫和检验，以及SELEX技术。该RNA适配子为预防和治疗伤寒杆菌肠热症提供了新型的拮抗剂，为克服临床上伤寒感染治疗出现的日益严重的耐药问题，提供了...
- 章晓联潘勤
- 文献传递
- P35识别结合HCV糖蛋白的研究被引量：2
- 2007年
- 目的:研究P35(L-ficolin)作为一种凝集素补体,能否结合HCV包膜糖蛋白E1。方法:用PC DNA3-P35质粒转染细胞,建立稳定表达P35的细胞系CT26-P35,RT-PCR和Western Blot检测该细胞系,建立稳定表达HCV E1蛋白的细胞系E1-CT26,用FCM检测该细胞胞内胞膜上E1的表达。用FCM检测蛋白P35与HCV E1的作用。结果:成功建立稳定细胞系P35-CT26。E1-CT26细胞胞内和胞膜均有E1表达。FCM分析,P35与E1-CT26结合能力强于P35与CT26的结合。结论:成功建立稳定表达P35的细胞系;P35能识别并结合HCV的糖蛋白E1。
- 占玲俊向田潘勤刘万红章晓联
- 关键词：P35HCVE1巨噬细胞
- 利用细菌侵袭实验方法研究纤维胶凝蛋白(L-ficolin)对伤寒杆菌的调理吞噬作用
- 目的MBL或纤维胶凝蛋白(L-ficolin)是凝集素补体途径的重要起始物质。本文研究纤维胶凝蛋白(L-ficolin)介导的单核吞噬细胞对伤寒杆菌的调理吞噬作用。方法构建携带L-ficolin基因的重组真核表达载体,转...
- 罗风玲陈明潘勤章晓联
- 关键词：L-FICOLIN伤寒杆菌
- 文献传递
- 沉默人DAPK1基因表达的shRNA分子及其应用
- 本发明提供了一种沉默人DAPK1基因表达的shRNA分子及应用，沉默人DAPK1基因表达的shRNA分子，包括正义链和反义链，正义链的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，反义链的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示...
- 潘勤章晓联王亚平孙月华
- 文献传递
- 过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型的建立
- 2024年
- 为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞(TLR2^(-)),嘌呤霉素筛选获得稳定表达TLR2分子的Nalm-6细胞(TLR2^(+))。利用倒置荧光显微镜观察细胞状态和绿色荧光表达情况,通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测相关蛋白表达水平,采用CCK-8以及流式细胞术检测细胞存活率和细胞增殖水平。结果显示:倒置荧光显微镜下可见成功转染慢病毒的Nalm-6细胞表达绿色荧光和嘌呤霉素抗性。Western Blot检测到TLR2在Nalm-6细胞中成功表达,且TLR2信号的激活明显增强PI3K-AKT信号轴分子的磷酸化水平。CCK-8和流式细胞术发现TLR2活化可提升细胞存活率,促进细胞增殖。研究成功构建了过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型,并在此基础上验证TLR2活化不仅能够增强B细胞PI3K-AKT信号通路传导,还可促进细胞增殖。此模型为进一步探究TLR2通路对B细胞抗感染免疫功能的影响奠定基础。
- 徐菁何柳周芳婷潘勤陈姗罗靓
- 关键词：慢病毒载体B淋巴细胞PI3K-AKT信号通路细胞增殖
- 基于适配子和生物芯片的结核病等传染病诊断新技术及其应用
- 章晓联潘勤陈凡曹洁陈德陈芳
- 项目属于实验诊断学的传染病诊断领域。结核杆菌、丙型肝炎病毒(HCV)以及人伤寒杆菌分别导致的结核病、丙型肝炎以及伤寒病均是严重危害人类健康的重要传染病 。特别是全球结核病状况仍然十分严峻。随着人类免疫缺陷病毒(HIV)流...
- 关键词：
- 关键词：结核病传染病诊断生物芯片
- 结核分枝杆菌RD区蛋白EspK的表达及对巨噬细胞Ⅰ型干扰素产生的影响被引量：1
- 2021年
- 目的:构建结核分枝杆菌Rv3879c基因的原核表达质粒并进行体外表达,研究Rv3879c基因编码蛋白EspK的生物学功能。方法:将Rv3879c基因克隆至原核表达载体pET-28a中,诱导表达后采用亲和层析纯化重组蛋白,经SDS-PAGE和Western Blot鉴定后,用纯化的蛋白免疫小鼠制备血清多克隆抗体,ELISA法检测免疫小鼠的特异性抗体滴度;体外实验检测EspK蛋白对巨噬细胞Ⅰ型干扰素产生的影响;pulldown实验和质谱筛选宿主细胞内与EspK相互作用的蛋白;运用生物信息学软件ProtParam对蛋白进行理化性质和亲疏水性分析,TMHMM和SignalP 5.0 server预测蛋白的跨膜区和信号肽,NPS@SOPMA预测蛋白的二级结构,Scansite 4.0预测蛋白模体结构。结果:成功构建Rv3879c的重组原核表达质粒;SDS-PAGE和Western Blot结果表明,表达产物亲和层析纯化后,获得分子质量为74 kU的EspK蛋白;ELISA检测免疫小鼠血清抗体滴度可达1∶409 600;EspK蛋白能促进小鼠巨噬细胞Ⅰ型干扰素的表达;成功筛选到4种与EspK相互作用的蛋白;生物信息学分析结果显示EspK蛋白为亲水性蛋白,无跨膜区及信号肽结构;EspK的二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成,有两个Erk1模体结构,可能参与多种生物学过程。结论:成功表达并纯化出重组蛋白EspK,EspK蛋白可促进巨噬细胞Ⅰ型干扰素的表达,利用生物信息学分析蛋白的结构及性质,为进一步研究EspK蛋白在结核病发生发展中的作用奠定了基础。
- 钟燕霄刘丽莎刘敏潘勤章晓联罗凤玲
- 关键词：结核分枝杆菌原核表达
- 传统教学混搭翻转课堂在医学免疫学教学的实施被引量：5
- 2019年
- 医学免疫学是一门重要的医学基础学科,学好它对于医学本科生夯实基础、提高科研素养和培养临床实践能力都具有重要作用。翻转课堂是一种新式教学模式,倡导“先学后教”,注重培养学生学习兴趣和自主学习能力。在本科生教学中,运用传统教学混搭翻转课堂模式后,问卷调查和学生成绩分析显示,80%以上的学生对混搭式教学满意。通过混搭教学模式,高分段的学生比例提高,同时也促进了教师专业成长。
- 刘敏罗凤玲熊洁刘万红章晓联潘勤
- 关键词：医学免疫学教学改革
- 基于医学免疫学的新课程——《损伤与反应》的课程设计与教学实践
- 2014年
- 《损伤与反应》课是在医学免疫学的基础上,以免疫学内容为主线,辅以相关的病理及病理生理学内容,并紧密结合临床的一门新课程。通过这门课程的教学,使学生在掌握医学免疫学的基础知识的同时,也了解了临床相关疾病及其发生的病理和病理生理机制,以提高学生的学习兴趣、增强学生独立思考问题、解决问题的能力,为免疫学这一基础学科的教学拓展新的视角。
- 刘敏潘勤罗凤玲熊洁张秋萍章晓联
- 关键词：医学免疫学
