满晓辉
- 作品数：10 被引量：11H指数：3
- 供职机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金高等学校优秀青年教师教学科研奖励计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 远端胃癌和贲门癌中杂合性丢失的差异研究
- 目的:近年来,远端胃癌的发病率显著下降,而近端胃癌尤其是贲门癌的发病率则呈逐年上升趋势。许多研究表明,相对于远端胃癌,贲门癌有着不同的临床表现和治疗效果,同时还具有独特的生物学和流行病学特征。这些生物学差异反映了与其发生...
- 徐岩满晓辉吕志罗阳张学徐惠绵
- 关键词：远端胃癌贲门癌杂合性丢失
- 文献传递
- cyclinG2表达载体的构建及其对人胃癌细胞生长的作用
- 2006年
- 目的:构建包含人cyclinG2基因的真核表达载体,并探讨其对人胃癌细胞体外生长的作用。方法:从POE4细胞总RNA反转录产物中扩增出cyc-linG2cDNA,亚克隆至双顺反子真核表达载体pIRESneo中获得pIRES-G2重组质粒,基因转染SGC-7901细胞,G418筛选阳性克隆,免疫蛋白印迹杂交方法检测cyclinG2蛋白表达情况,平板克隆形成能力和四甲基噻唑蓝(MTT)比色法对转染后细胞的增殖活性进行分析。结果:成功构建包含cyclinG2基因真核重组表达载体pIRES-G2;转染pIRES-G2的SGC-7901细胞克隆的增殖活性明显下降。结论:cyclinG2基因转染后SGC-7901细胞体外增殖能力下降。
- 刘洁田玉楼崔泽实罗阳满晓辉张学
- 关键词：细胞周期蛋白类转染胃肿瘤基因
- 远端胃癌和贲门癌中杂合性丢失的差异研究
- 目的：肿瘤的发生是一个多阶段的过程，是各种遗传改变累积的结果，涉及癌基因的激活和肿瘤抑制基因(tumorsuppressorgene，TSG)的失活。根据Knudson的TSG失活形式的理论，检测肿瘤细胞染色体上特定DN...
- 满晓辉
- 关键词：杂合性丢失染色体远端胃癌贲门癌
- Cyclin G2抑制胃癌细胞增殖的实验研究被引量：4
- 2007年
- 目的研究cyclinG2对体外培养胃癌细胞增殖能力的影响,探讨cyclinG2作为肿瘤干扰阻断药靶的有效性和临床使用性。方法应用脂质体转染技术将包含有cyclinG2cDNA的pIRES-G2和对照空质粒pIRES-neo分别转染胃癌细胞株SGC-7901,经G418(400μg/mL)选择性培养基筛选两周后获得转入cyclinG2基因的细胞克隆,通过细胞化学法和免疫蛋白印迹杂交检测外源性cyclinG2蛋白表达情况;倒置显微镜下观察克隆细胞形态,Giemsa染色后进行克隆计数。结果转染pIRES-G2获得的细胞克隆中cyclinG2蛋白的表达水平明显高于转染pIRESneo,表明cyclinG2基因被成功地转入SGC-7901细胞稳定表达;转染pIRES-G2组的阳性细胞集落数目明显减少,pIRESneo组的集落数为(87±3),pIRES-G2组的集落数为(53±4),占对照组的60.1%(P<0.01);与对照组相比,pIRES-G2组集落内细胞数目减少,细胞皱缩,形态变得不规则,胞质内出现大量颗粒和空泡。结论cyclinG2可显著抑制体外培养胃癌细胞的增殖,并可能和肿瘤细胞信号传导系统存在某种联系。
- 刘洁崔泽实罗阳满晓辉张学
- 关键词：CYCLING2胃癌基因转染细胞抑制
- 胃癌贲门癌4q，18q，1p35-pter杂和性丢失的遗传学差异研究
- 近年来,远端胃癌的发病率明显下降而贲门癌的发病率显著升高。与远端胃癌相比,贲门癌预后差且五年生存率低。这些差异与环境及遗传因素相关,有些环境因素已经明确。但胃癌和贲门癌之间的遗传学差异仍未明确。以前的研究发现远端胃癌5q...
- 满晓辉徐岩吕志王振宁任群李万东罗阳徐惠绵张学
- 文献传递
- 高表达人cycli nG2基因的SGC-7901细胞克隆筛选和鉴定
- 2005年
- 应用脂质体基因转染技术建立稳定表达cyclin G2基因的胃癌克隆细胞,为深入研究cyclin G2在胃癌细胞周期调控的作用和机制提供理想的生物学模型。构建以新霉素基因作为筛选标志基因的包含人cyclin G2基因真核重组表达载体pIRES-G2,大量扩增纯化后经限制性内切酶BamH I/BstX I双酶切鉴定;利用阳离子脂质体介导的基因转染法将其和对照空载体pIRESneo转染人胃癌细胞SGC-7901,经G418选择性培养基筛选后有限稀释法连续克隆化,免疫细胞化学染色检测cyclin G2蛋白表达情况。酶切结果表明cyclin G2cDNA已成功插入pIRESneo的多克隆位点内;经G418筛选后在转染pIRES-G2和转染pIRESneo组均见多个细胞克隆出现,细胞化学染色证实pIRES-G2转染组cyclin G2蛋白的表达水平明显高于pIRESneo转染组;经过多次有限稀释获得稳定高表达cyclin G2的细胞克隆。应用脂质体转基因技术成功建立高表达cyclin G2基因的人胃癌细胞克隆。
- 刘洁崔泽实罗阳满晓辉张学
- 关键词：G2基因转染细胞克隆培养基筛选基因转染细胞克隆酶切鉴定G2
- CDK2蛋白质分子结构与其入核转运过程关系的初步分析(英文)被引量：2
- 2004年
- 应用重组技术构建野生型及缺失型CDK2基因的真核表达载体 ,分别使野生型及缺失型CDK2蛋白与增强型绿色荧光蛋白 (Enhanced greenFluorescentProtein ,EGFP)形成融合蛋白。通过脂质体介导的方法将载体转染人宫颈癌细胞系HeLa和中华仓鼠卵巢细胞系CHO ,经过细胞周期同步化处理后于荧光显微镜下观察EGFP的亚细胞定位以示踪野生型及缺失型CDK2基因的表达。结果表明 ,野生型CDK2基因的表达产物定位于细胞核 ,而两种缺失型CDK2基因分别编码的CDK2蛋白N 端 1～ 2 0 1及 98～ 2 98多肽均主要定位于细胞质。以上结果提示 ,CDK2蛋白序列中不含有与核定位直接相关的信号 ,其入核过程可能是由其N 端 1～ 97及 2 0 2～ 2 98多肽范围内的部分氨基酸共同形成高级结构 ,并依赖此高级结构与其他含有入核信号的蛋白形成复合物 ,从而被带动进入细胞核的。
- 刘琦罗阳姜莉周伟强满晓辉张学
- 关键词：CDK2增强型绿色荧光蛋白质粒转染
- 多重置换扩增结合激光捕获显微切割技术在胃癌基因组学研究中的应用被引量：3
- 2007年
- 目的探讨多重置换扩增(MDA)与激光捕获显微切割(LCM)技术相结合,并应用到胃癌细胞杂合性丢失(LOH)分析等研究的可行性。方法利用LCM技术从胃癌组织冰冻切片中分别获取正常胃黏膜细胞和胃癌细胞,提取基因组DNA后,进行全基因组多重置换扩增。进而,将MDA产物用于聚合酶链反应(PCR)扩增ACE2、TP53和ACTB基因片段,以及微卫星位点的LOH分析。结果位于不同染色体的3个基因片段均得到较好的扩增,而且MDA产物的扩增效率明显高于未经MDA的基因组DNA。另外,MDA产物的LOH分析结果与未经MDA的基因组DNA结果一致。结论MDA与LCM技术相结合,是一种可行的全基因组扩增技术路线,可用于后续的基因组学研究。
- 吕志徐岩满晓辉王振宁罗阳曹磊徐惠绵
- 关键词：胃癌杂合性丢失基因
- 激光捕获显微切割细胞的全基因组多重置换扩增技术
- 研究肿瘤基因组水平上的改变,将有助于对其发生机制的阐明。为了保证研究结果的可靠性,常用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术克服组织异质性,特异性选择靶细胞。但从LCM...
- 吕志徐岩满晓辉王振宁罗阳张学
- 文献传递
- 贲门癌中染色体8p21-p23杂合性丢失的研究被引量：3
- 2006年
- 染色体Sp21-p23区域存在与多种肿瘤相关的抑癌基因。为明确该染色体区域的抑癌基因与贲门癌的关系，我们进行了贲门癌中染色体8p21-p23区域微卫星标记的杂合性丢失研究。首先采用激光捕获显微切割技术从19例贲门癌组织中获得均质的肿瘤细胞及正常的胃粘膜细胞，然后利用多重置换扩增技术扩增捕获细胞的全基因组DNA。选择覆盖染色体8p21-p23区域的13个微卫星标记，利用PCR结合硝酸银染色方法分析了肿瘤细胞中染色体8p21-p23的杂合性丢失情况。结果显示，在贲门癌中染色体8p21-p23的总丢失频率高达63．2％（12／19），单一标记的丢失频率为25％～55．6％。根据不同肿瘤组织中杂合性丢失的情况，我们确定了一个最小缺失区域，即8p22GGAA-8p22ATCT标记间约1．2Mb的范围。研究结果表明，染色体8p22区域抑癌基因在贲门癌发生发展中起重要作用；染色体最小重叠区域的确定对最终鉴定该区域内的抑癌基因有参考价值。
- 满晓辉徐岩王振宁吕志徐米多姜莉罗阳徐惠绵张学
- 关键词：贲门癌抑癌基因杂合性丢失
