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干细胞因子对骨髓间充质干细胞的促增殖分化作用被引量：5: 2004年; 郭军林国生贾光宏杨波鲍翠玉汪蕾刘维新; 关键词：干细胞因子骨髓间充质干细胞增殖分化心肌细胞 SCF MSC

干细胞因子对骨髓间充质干细胞的促增殖、分化作用: 目的本实验旨在探讨干细胞因子(SCF)促进骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖及促进其向心肌细胞分化的作用。方法将SD大鼠随机分成SCF组和对照组,每组12只。SCF组用rhSCF(20μg·k-1·-1)连续5天皮下注射,...; 郭军林国生贾光宏杨波汪蕾; 文献传递

体外模拟心肌微环境下骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究被引量：11: 2004年; 目的 :探讨粒细胞集落刺激因子 (G CSF)和干细胞因子 (SCF)预处理对骨髓间充质干细胞 (MSCs)向心肌细胞分化的影响。方法 :MSCs均采用全骨髓法提取 ,通过换液传代逐渐纯化细胞 ,取传 4代的MSCs,在共培养前用DAPI标记 ,心肌细胞在培养的第 3d与MSCs共培养。对照组 :未施加任何干预的MSCs与心肌细胞共培养 ;实验组 :联合使用G CSF和SCF对大鼠在体动员 ,提取其MSCs与心肌细胞共培养。共培养前测定心肌细胞的活力 ,在共培养第 3、4、5d用免疫荧光标记肌钙蛋白T ,分析DAPI MSCs向心肌细胞分化的百分率。结果 :在共培养的第3、4、5d ,G CSF和SCF处理的DAPI MSCs的分化率分别为 (1.2 4± 0 .16 ) %、(3.4 6± 0 .2 1) %、(7.2 1± 0 .11) % ,均显著高于对照组的 0、(1.2 7± 0 .13) %、(1.32± 0 .2 5 ) %。结论 ::G CSF和SCF对MSCs具有促分化作用。; 郭军贾光宏林国生鲍翠玉汪蕾杨波刘维新; 关键词：骨髓间充质干细胞分化

人HCN4基因重组腺病毒载体的构建和鉴定被引量：4: 2005年; 目的:构建超极化激活环核苷酸门控通道基因(HCN4)重组腺病毒载体.方法:采用基因工程技术,将HCN4cDNA定向克隆至穿梭载体pAdTrackCMV中,利用胞包装、扩增,CsC1密度梯度超速离心纯化.采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中带有绿色荧光蛋白GFP报告基因,对病毒滴度和感染效率进行监测.结果:测序结果证明成功构建了HCN4基因重组腺病毒载体,病毒滴度达2.0×1015pfu/L.结论:应用细菌内同源重组法成功构建了含人HCN4基因的重组腺病毒载体.; 蔡军林国生江洪王腾曾彬罗浩郭军李俊汪蕾; 关键词：腺病毒科

干细胞因子对大鼠骨髓间充质干细胞增殖与分化的影响被引量：30: 2004年; 目的　探讨干细胞因子 (StemCellFactor ,SCF)促进骨髓间充质干细胞 (MSCs)增殖及促进其向心肌细胞分化的作用。方法　SCF对MSCs预处理 ,流式细胞术测定第 4代MSCs的细胞周期 ,DAPI -MSCs在体外模拟的心肌微环境下培养。用数码显微摄像及免疫荧光技术分别记录和检测心肌特异性肌节肌球蛋白重链 (MHCα/β)、肌钙蛋白T(TroponinT ,TnT)的表达 ,分析MSCs向心肌细胞分化的百分率。结果　实验组的G0 /G1期细胞百分率均显著低于对照组 (P <0 0 1) ,S期、G2 /M期细胞百分率及PI值均显著高于对照组 (P <0 0 1)。在共培养的第 2、3、4、5d ,SCF组表达MHC的DAPI -MSCs阳性百分率分别为 (1 96± 0 3 3 ) %、(4 76±0 3 2 ) %、(5 15± 0 42 ) %、(8 5 2± 0 45 ) % ,显著高于对照组的 (0 5 2± 0 2 1) %、(1 2 5± 0 47) %、(1 75± 0 2 8) %、(3 64± 0 3 2 ) % (P<0 0 1) ;在共培养的第 3、4、5d表达TnT的DAPI -MSCs阳性百分率分别为 (1 10± 0 15 ) %、(2 64± 0 18) %、(5 43± 0 2 4) %均显著高于对照组的 0、(1 2 7± 0 13 ) %、(1 3 2± 0 2 5 ) % (P <0 0 1)。结论　SCF对MSCs具有促增殖、促分化的作用。; 郭军林国生鲍翠玉贾光宏杨波汪蕾刘维新; 关键词：干细胞因子骨髓间充质干细胞 MSC SCF 共培养百分率

心肌细胞共培养诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化被引量：11: 2005年; 目的在体外以新生大鼠心肌细胞(CM)与骨髓间充质干细胞(MSCs)共同培养的方式模拟心肌微环境,研究MSCs分化为心肌细胞的机制。方法分离大鼠MSCs在体外培养纯化后进行细胞标记,将已标记的MSCs分别与搏动的CM、停止搏动的CM以及心肌细胞条件培养液混合培养。分别在共培养后第4、5天用免疫荧光染色检测MSCs细胞中的心肌特异性肌钙蛋白T(Troponin T)。结果与搏动的CM共培养后第4天MSCs出现自发收缩,与CM同步搏动并表达Troponin T,而在抑制心肌细胞搏动或缺乏与心肌直接接触的情况下MSCs未出现上述变化。结论说明在与CM直接接触的前提下,CM对MSCs的机械牵拉刺激为诱导MSCs分化为心肌细胞的必须条件。单纯的心肌细胞条件培养液则非关键因素。了解MSCs分化为心肌细胞的机制对于寻找适宜的细胞移植条件有重要指导意义。; 汪蕾林国生杨波郭军刘维新; 关键词：骨髓间充质干细胞共培养分化心肌

心肌直接接触诱导骨髓间充质干细胞成心肌样分化被引量：10: 2005年; 目的应用新生大鼠心肌细胞(CM)与骨髓间充质干细胞(MSCs)体外共培养的方法模拟心肌内环境,研究模拟环境下MSCs分化为CM的相关因素及其适宜条件。方法利用CM与MSCS不同比例直接接触和非直接接触共培养的方法模拟心肌微环境,分析MSCS形态和结构蛋白表达等方面的变化。结果直接接触共培养的MSCS与CM同步搏动,表达心肌特异性肌钙蛋白T,且MSCs与CM等比例培养时分化率最高;而在缺乏直接接触条件下,单纯的CM条件培养液无法单独诱导MSCS的横向分化。结论与CM间的直接接触为诱导MSCS分化为CM的必需条件,共培养的细胞密度对于诱导分化率有影响,条件培养液则非关键因素。; 汪蕾林国生蒋学俊杨波郭军刘维新; 关键词：细胞分化骨髓间充质干细胞心肌细胞体外培养

直接与间接接触对诱导骨髓间充质干细胞成心肌样分化的影响被引量：4: 2004年; 目的　观察心肌细胞 (cardiomyocytes ,CM)与骨髓间充质干细胞 (bonemarrowstromalcells ,MSCs)直接接触和非直接接触对诱导MSCs成心肌样分化的影响。方法　体外以新生大鼠CM与MSCs直接接触和非直接接触的培养方式模拟心肌微环境 ,分析MSCs形态和结构蛋白表达等方面的变化。结果　直接接触共培养的MSCs与CM同步搏动 ,且心肌特异性肌钙蛋白T染色阳性 ,阳性率为 1.3 % ;而心肌细胞条件培养液无法单独诱导MSCs的横向分化。结论　与CM细胞间的直接接触是诱导MSCs分化为心肌细胞的必须条件 ,条件培养液则非关键因素。; 汪蕾林国生郭军蒋学俊杨波; 关键词：骨髓间充质干细胞横向分化 MSC 条件培养液共培养微环境

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汪蕾