江月
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 一种荧光免疫层析图像处理方法、系统、设备及介质
- 本发明提供一种荧光免疫层析图像处理方法、系统、设备及介质，该荧光免疫层析图像处理方法包括：获取待处理荧光免疫层析图像以及历史数据集；分别对待处理荧光免疫层析图像以及各历史荧光免疫层析图像进行分析，得到待处理荧光免疫层析图...
- 张露艾竹君王高雪李孟韩江月唐鸿溶潘兴罗小妹向值质丁世家陈锐李娟陈维贤邹远
- 串联亲和纯化技术筛选肠病毒71型3D聚合酶的相互作用蛋白被引量：5
- 2012年
- 目的利用串联亲和纯化技术筛选与肠病毒71型3D聚合酶相互作用的宿主细胞蛋白。方法利用RT-PCR方法从EV71BrCr株全基因组中获得3D聚合酶全长基因,构建pcDNA3.0-3D-Flag-HA真核表达载体并转染RD细胞,48 h后收集细胞。用Western blot方法检测3D蛋白在RD细胞内的表达情况。串联亲和纯化技术筛选与3D聚合酶相互作用的宿主蛋白并进行质谱分析,确定与3D聚合酶相互作用的蛋白或多肽。并采用免疫共沉淀实验,对候选蛋白CyclinG1与3D的相互作用进行验证。结果成功构建了pcDNA3.0-3D-Flag-HA载体,在RD细胞内检测到3D蛋白的表达。经串联亲和纯化和质谱分析得到LATS2、Nek2、APC5、CyclinG1、PI3K等一系列参与细胞凋亡及细胞周期调控的蛋白。免疫共沉淀实验证实3D蛋白与CyclinG1的相互作用。结论 3D聚合酶可能与宿主细胞内蛋白相互作用,引起细胞凋亡及细胞周期改变。
- 江月丛浩龙王健李梨
- 关键词：肠道病毒71型串联亲和纯化
- EV71 3D真核表达载体构建及相互作用蛋白筛选的实验研究
- 目的：肠道病毒71型(Enterovirus71，EV71)是手足口病的主要病原体之一。为深入研究EV713D聚合酶的功能及作用机制，本实验构建EV713D真核表达载体并利用串联亲和纯化技术筛选与EV713D聚合酶相互作...
- 江月
- 关键词：肠道病毒71型真核表达载体相互作用蛋白
- 肠道病毒71型3C基因原核表达质粒的构建表达及纯化
- 2012年
- 目的构建肠道病毒71型(Entervirus71,EV71)3C基因的原核表达质粒,在大肠杆菌中进行表达并纯化。方法以病毒的反转录产物为模板,PCR扩增EV71 3C基因,克隆至pGEx-4T-1载体中,构建重组表达质粒pGEx-3C,转化大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。表达的重组融合蛋白GSR-3C经GST-Agarose亲和层析和分子筛层析纯化后,Western blot检测其反应原性。结果重组表达质粒pGEx-3C经双酶切及测序证实构建正确;表达的重组融合蛋白相对分子质量约46 000,表达量约占菌体总蛋白的50%,主要以可溶性形式表达;纯化后的重组融合蛋白纯度大于90%,可与小鼠抗EV71单克隆抗体特异性结合。结论成功构建了重组表达质粒pGEx-3C,在大肠杆菌中高效分泌表达并纯化了重组GST-3C融合蛋白,为EV713C蛋白酶结构与功能的研究及3C靶向药物和疫苗的研究奠定了基础。
- 江月丛浩龙李梨
- 关键词：原核细胞基因表达纯化
