段巨洪
- 作品数：20 被引量：69H指数：6
- 供职机构：新乡医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学生物学更多>>
- 人TLR4胞外段的克隆、表达及功能活性分析被引量：2
- 2011年
- 目的:获得高纯度、高活性的人TLR4胞外段蛋白。方法:采用PCR方法从含人TLR4 cDNA的质粒pCDNA3-TLR4中扩增人TLR4胞外段基因片段,将其插入载体pET32a并导入大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达。用Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化融合蛋白。SDS-PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的相对分子质量和抗原性,ELISA和FCM鉴定其功能活性。结果:获得1 911 bp的人TLR4胞外段基因片段,构建成重组表达载体pET32a-TLR4并在大肠杆菌中表达。TLR4-Trx融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的12%,其纯度较高。ELISA和FCM检测显示,TLR4-TrX融合蛋白不仅与配体LPS结合,还能竞争性抑制LPS与THP1细胞结合。结论:所获TLR4-Trx融合蛋白纯度高,功能活性好,为进一步研究TLR相关的免疫调节机制提供物质基础。
- 王凡平王明永孙瑞利郭庆合张婧婧杨景瑞张新富段巨洪
- 关键词：基因克隆功能活性
- 医学检验专业授课教师对后进生转化的有效方法探讨被引量：3
- 2014年
- 怎样促进后进生转化是教学过程中普遍存在的问题。在医学院校,负责检验专业学生工作的主要是辅导员,但笔者认为授课教师可通过适当改变教学方法、以身示范、给予学生充分的自信、提升教师的人格魅力等来有效促进后进生的转化。本文对以上内容进行了简要的探讨和阐述。
- 张俊丽段巨洪王凡平原增艳丁肖华李向平郭庆合赵晓会王明永
- 关键词：授课教师后进生转化
- 改革实验教学方式——提高临床微生物学与检验的教学质量被引量：12
- 2014年
- 医学检验在临床上可以帮助医生对疾病做出准确的诊断,为快速制定准确的治疗方案提供可靠依据,因此医学检验已经成为现代医学不可或缺的一部分。而临床微生物学与检验作为医学检验的一个专业学科,更是由于这几年与微生物相关的一些疾病的流行变得更加重要。作为一门实践性和应用性很强的课程,临床微生物学与检验实验课程的教学质量直接影响到学生今后的临床工作,所以应该受到足够的重视。结合参加工作两年来的实验室工作体验及临床微生物学与检验的实验课代课经历,感觉实验教学还有提高的空间。传统的教学内容方法存在一定的局限性,传统考核方式很难全面评价学生的学习效果和综合素养。为提高临床微生物学与检验的教学质量,改革实验教学方式已迫在眉睫。
- 张俊丽段巨洪杜纪英王凡平郭庆合丁肖华张晓琴赵晓会王明永
- 关键词：教学质量实验教学方式示教无菌操作实验考试
- mTORC1信号促进前成骨细胞MC3T3-E1的分化成熟被引量：2
- 2016年
- 目的:研究mTORC1信号对前成骨细胞MC3T3-E1向成骨细胞分化成熟的调控作用。方法:通过向MC3T3-E1转染pcDNA3.1-Raptor,对mTORC1信号相关蛋白Raptor进行过表达。向MC3T3-E1转染Raptor siRNA,对mTORC1信号蛋白Raptor进行基因沉默。通过Real-time PCR方法测定Raptor的基因表达,通过蛋白免疫印迹法测定Raptor蛋白水平,并通过茜素红染色检测成骨矿化情况,以测定成骨分化程度。通过Real-time PCR检测成骨分化指标的基因表达。结果:与对照组相比,Raptor过表达组的Raptor mRNA和蛋白水平明显增加;茜素红染色结果显示Raptor过表达组染色更深,说明成骨矿化程度更高;荧光定量PCR结果显示,Raptor过表达组的成骨分化标记基因以及成骨转录因子的表达量均高于对照组。与对照组相比,Raptor siRNA组的Raptor mRNA和蛋白水平明显降低;茜素红染色结果显示Raptor siRNA组染色更浅,说明成骨矿化程度更低;荧光定量PCR结果显示,Raptor siRNA组的成骨分化标记基因以及成骨转录因子的表达量均低于对照组。结论:mTORC1信号促进前成骨细胞MC3T3-E1向成骨细胞分化成熟。
- 张婧婧张楠吴伟王鹏杨景瑞段巨洪于海川
- 关键词：成骨分化
- 凌霄花有效部位的制备及其抗抑郁用途
- 本发明涉及凌霄花有效部位及其抗抑郁用途，可有效解决抑郁症的临床治疗问题，其解决的技术方案是：将凌霄花加10倍重量质量浓度为50%~90%的乙醇浸泡30min，超声提取1h，过滤得滤液；药渣再加入8倍、质量浓度为50%~9...
- 于海川吴娇隋娟翟鹏飞张轶王侠段巨洪
- MBL抑制白假丝酵母菌刺激THP1/CD14细胞产生TNF-α和IL-8被引量：10
- 2011年
- 目的 探讨甘露聚糖结合凝集素（mannan-binding lectin,MBL）对白假丝酵母菌（Candida albicans）刺激的THP1/CD14细胞产生TNF-α和IL-8的影响.方法 以不同浓度人MBL预处理THP1/CD14细胞2 h后,再用热灭活的酵母相C.albicans和/或菌丝相C. albicans刺激细胞24 h,收集培养上清,以ELISA从蛋白水平分析其TNF-α和IL-8的产生.收集细胞提取总RNA,以RT-PCR从转录水平评估TNF-α和IL-8的表达,Western blot分析NF-KB的细胞核移位.结果 ELISA检测发现,两种相态的C. albicans均可刺激各组细胞分泌TNF-α和IL-8,酵母相C.albicans刺激细胞产生细胞因子水平稍高;高浓度MBL（10～20 mg/L）均可抑制两种相态的C. albicans诱导细胞分泌TNF-α和IL-8,低浓度MBL（1 mg/L）则几乎无影响;RT-PCR分析亦显示,与相应只用C. albicans刺激的实验组相比,高浓度MBL（20 mg/L）对两种相态的C. albicans诱导的TNF-α、IL-B的mRNA表达均有不同程度的抑制作用;Western blot分析显示,高浓度MBL（20 mg/L）对两种相态的C. albicans诱导的NF-KB细胞核移位有显著的抑制作用.结论 MBL可抑制C.albicans诱导的THP1/CD14细胞产生TNF-α和IL-8,提示MBL能够在抗C.albicans 免疫中起调控作用.
- 王明永王凡平郭晓芳孙瑞利郭庆合张婧婧杨景瑞张新富段巨洪
- 关键词：甘露聚糖结合凝集素白假丝酵母菌细胞因子免疫调节
- 参与式实验教学促进学生实践能力培养被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨学生参与实验准备工作对于学生实践能力的影响。方法:将河南省某高校2006年级部分学生分为实验组与对照组,实验组课前跟随教师参与实验准备工作,而对照组不参加,只按常规模式上实验课,课程结束后,在同一时间内以相同的方法一同进行实验考核。结果:实验组在20个骨髓细胞的辨认、肠杆菌科分离及生化鉴定、肥达反应效价判断、质粒的提取与纯化、不规则抗体的筛选与鉴定、白细胞分类计数等6项内容的考核结果与对照组相比较,有显著性差异(P<0.05);而回收试验实验组与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:医学检验专业是医学院校各专业中实践性较强的一个专业,学生利用课余时间参与实验准备工作,能够增强专业学习兴趣,提高实践动手能力。
- 张婧婧张楠张新富段巨洪杨景瑞贺志安
- 关键词：医学检验专业实验教学质量
- MBL调节白假丝酵母菌相态转化的作用及机制的初步分析被引量：5
- 2014年
- 目的：探讨甘露聚糖结合凝集素（Mannan-binding lectin,MBL）对白假丝酵母菌（Candida albicans,C.albicans）相态转化的调节作用及机制。方法：以人MBL处理C.albicans 2、4、8 h,37℃200 r/min震荡培养,倒置相差显微镜下观察C.albicans的菌丝形成情况;FACS分析MBL与C.albicans的结合情况;RT-PCR分析C.albicans相态转化调控基因HWP1、DDR48的表达。结果：倒置相差显微镜观察发现MBL在早期（2~4 h）能够抑制C.albicans酵母相（Yeast form,Y）向菌丝相（Hyphal form,H）转化;FACS分析表明MBL能够以Ca2＋浓度依赖关系与C.albicans细胞结合;RT-PCR结果表明MBL能够减少C.albicans相态转化调控基因HWP1的表达,而其对DDR48表达的影响尚无规律可循。结论：MBL能够通过调控HWP1的表达抑制C.albicans酵母相向菌丝相转化。
- 翟晶晶王明永凌明智王凡平郭康宋士军段巨洪张娜李梦杰左萌洁赵雯瑕
- 关键词：甘露聚糖结合凝集素白假丝酵母菌基因表达
- MBL在制备预防或治疗效应T细胞引发疾病药物中的应用
- 本发明公开了MBL在制备预防或治疗效应T细胞引发疾病药物中的应用，属于甘露聚糖结合凝集素的新用途技术领域。本发明的技术方案要点为：MBL在制备预防或治疗效应T细胞引发的感染性疾病、自身免疫性疾病或/和变态反应性疾病药物中...
- 王凡平王明永穆永慧张卫斌王帅杨帆吴敏娜陈晨段巨洪牛志国
- 手术对腹部肿瘤患者凝血功能的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨手术对腹部肿瘤患者凝血功能的影响。方法检测63例腹部肿瘤患者手术前后血浆血小板(PLT)计数、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)和D-二聚体(D-D),并比较手术前后各项指标的差异。结果与术前比较,术后血浆PLT降低(P<0.05),PT、TT、APTT缩短(P<0.05),FIB、D-D明显增高(P<0.01)。结论腹部肿瘤患者手术可增加血栓或出血风险,应在手术期间及时采取预防措施。
- 陈琼张婧婧段巨洪
- 关键词：腹部肿瘤围手术期凝血
