梁广铁 作品数:48 被引量:81 H指数:6 供职机构: 广州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广州市医药卫生科技项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 机械工程 电子电信 更多>>
微流控芯片优选人类精子研究 被引量:2 2009年 目的:探讨微流控芯片技术对精子的优选能力。方法:自行设计和制造微流控芯片,利用芯片对40例人精液标本进行精子分选实验,优化其分选条件,观察芯片处理前后精液各参数变化。同时对其中30例精液标本(A组:a+b级精子<20%组,n=15;B组:a+b级精子≥20%组,n=15)同时用芯片法和密度梯度离心法分选,比较2种方法分离前后精子活力、形态等参数的变化。结果:①优选后精子活力和精子正常形态率都可见显著提高(P<0.001;P<0.01)。②在精子活动力优选上A、B组芯片法均明显优于密度梯度离心法(P<0.01),尤其在A组这种优势更为明显(P<0.001)。而在精子形态优选上,2种方法无显著差异(P>0.05)。结论:微流控芯片技术在优选精子中具有较高的分选效率,且具有操作简单、分选时间短,对精子损伤小的特点,在辅助生殖技术中特别是体外受精中将有良好的应用前景。 王维 梁广铁 刘大渔 周小棉关键词:微流控芯片 精子优选 辅助生殖技术 多层纸芯片乳腺癌组织微阵列用于抗肿瘤药物测试 被引量:6 2016年 开发了一种多层纸芯片细胞培养平台,将乳腺癌细胞分别接种于多层的图形化纸芯片的亲水区,折叠后构建了仿真实体肿瘤。多层纸芯片覆以微孔薄膜,用以仿真血管内皮层。培养不同时间后,拆解多层纸芯片检测乳腺癌组织内各层面的细胞形态、存活率、细胞周期分布以及细胞内乳酸含量。实验结果显示,各层纸芯片培养的乳腺癌细胞存活率均高于80%,并形成了类组织结构。芯片乳腺癌组织内部呈酸化倾向,且酸化程度随着培养时间的延长而升高。与二维(2D)培养细胞相比较,纸芯片乳腺癌组织内细胞增殖比例显著降低(15%vs 60%)。多层纸芯片乳腺癌组织显示了更接近体内情况的药物反应机制,细胞存活率随阿霉素浓度升高呈现缓慢下降趋势,IC50值显著高于2D培养细胞组(5.0μmol/L vs 1.144μmol/L)。这种多层纸芯片乳腺癌组织微阵列构建简便、仿真度高,有望成为抗肿瘤药物反应测试的有力工具。 刘未平 林锦琼 杜燕 齐明月 梁广铁 杨娜 刘大渔关键词:乳腺癌 组织微阵列 微环境 抗肿瘤药物 芯片电泳在免核酸提取PCR产物分析中的应用 被引量:1 2014年 目的探讨两种免核酸提取试剂联合应用DNA芯片电泳是否能快速、准确地用于新德里金属酰胺酶(NDM-1)阳性细菌的鉴定,了解该联合检测方法在流行病病原体快速鉴定中的应用价值,为流行性病原体的快速鉴定提供便捷手段。方法取1个(或0.1个)麦氏单位NDM-1(+)菌液加入免核酸提取试剂后直接进行PCR扩增,扩增产物用自制的芯片电泳进行产物分析,通过样品迁移时间与标准品比较精确计算出目的基因片段长度并大致推算产物的含量。结果两种免核酸提取试剂联合芯片电泳分析技术能快速、准确、高效地扩增出新德里金属酰胺酶NDM-1(+)细菌的目的基因片段,尤其湖南某厂家的试剂灵敏度更高。结论该联合检测方法在流行病尤其是突发性病原体的快速鉴定、监测中具有潜在的临床应用价值。 雷秀霞 李卓然 梁广铁 龙幼敏 陈英姿 张小精 王秋平PDMS-纸复合微流控芯片上的肝癌细胞三维培养 张琼 刘大渔 严伟 梁广铁 张其超 周小棉基于微流控芯片的尿路感染细菌鉴定及抗生素敏感性测试 被引量:4 2016年 发展了一种微流控芯片纸基细菌分析技术,用于多重细菌鉴定与抗生素敏感性测试。制备了阵列培养池芯片,以滤纸作为衬底固定显色培养基和抗生素。利用PVDF疏水薄膜止流阀,将尿液样品引入芯片并分隔于不同培养池。借助于培养池阵列的空间分辨力,实现多重细菌分析。根据特异性显色结果实现细菌鉴定,通过实时显色强度分析实现细菌定量,依据抑制显色反应的最低抗生素浓度确定抗生素敏感性。以3种泌尿系统感染常见病原菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和粪肠球菌)为模拟测试对象进行分析,结果表明,芯片方法可以在18 h内实现对3种细菌的同时鉴定及6种抗生素敏感性测试。对照实验显示,芯片法与传统方法细菌鉴定和抗生素敏感性测试结果一致性分别为94.1%和93.9%。本研究建立的微流控芯片细菌分析方法简便快速,非常适合于医疗资源匮乏条件下的细菌分析。 齐明月 杜燕 刘未平 陈斌 梁广铁 徐邦牢 刘大渔关键词:微流控芯片 细菌鉴定 利用多相液段分隔与融合在毛细管中集成DNA提取和扩增 相比较芯片系统,毛细管尺寸小、价格便宜且流体控制简便,因而更加适合于简单廉价的快速核酸分析。之前已经报导了基于毛细管的核酸提取和扩增技术,进一步的问题是如何在毛细管中将核酸提取和扩增结合,实现集成化分析。在毛细管中偶联核... 刘大渔 梁广铁关键词:毛细管 液滴 老年心脑血管病影像学诊断与MTHFR基因多态性及同型半胱氨酸水平的相关性 被引量:5 2019年 目的探讨心脑血管疾病影像学诊断与MTHFR基因多态性及同型半胱氨酸(Hcy)水平的相关性,为临床老年心脑血管疾病的早期诊治及实施预防管理提供依据。方法检测864例60岁以上住院患者的MTHFR基因多态性,筛选处于65~89岁的294例老年患者并采集其颈部彩色多普勒超声影像、颅脑CT/MRI影像及病案诊断等信息;对入选病例行血浆Hcy水平检测。结果脑梗死组CC型、CT型和TT型3种基因型所占百分率依次为43.38%、43.80%、12.82%,与非脑梗死组56.82%、36.36%、6.82%相比差异有统计学意义(χ^2=18.438,P <0.001)。各疾病观察组TT型患者血浆Hcy水平均显著高于CC型(P <0.05)。颈动脉内膜中层厚度(IMT)与血浆Hcy水平无相关性(P> 0.05);各基因型IMT以及颈动脉内膜分级差异均无统计学意义。结论 TT基因型患者的血浆Hcy水平显著高于CC基因型;MTHFR基因多态性与脑梗死、冠心病发生风险密切相关,但与颈动脉粥样硬化的发生未见直接相关性。 李卓然 高咏璇 林楚莹 秦琴保 梁广铁 阙志权 雷秀霞 江新青关键词:MTHFR基因多态性 同型半胱氨酸 过滤式微流控芯片上的循环肿瘤细胞分选 被引量:3 2012年 目的本研究加工了一种封接有多孔聚碳酸酯薄膜的过滤式微流控芯片用于循环肿瘤细胞分选。方法依据肿瘤细胞与血细胞在粒径和变形能力方面的差别,这种微过滤式芯片可以选择性截留肿瘤细胞。循环肿瘤细胞分析整个过程,包括细胞过滤、固定、标记和计数,均在芯片上完成。使用8μm孔径滤膜,可以选择性截留Hela细胞。以Hela细胞为模型,实验优化了肿瘤细胞的分选条件并考查了分选效果。结果在500μL/min流速下,Hela细胞的回收率可以达到85%,而血细胞残留可以控制在3000个以下。截留细胞使用微小染色体维持蛋白7抗体标记,可以有效辨别肿瘤细胞与血细胞。结论基于过滤式微流控芯片上的循环肿瘤细胞分选方法简单、快速、廉价,有望成为一种实用的循环肿瘤细胞检测技术。 刘大渔 严伟 张琼 马薇 梁广铁 Yi-Kuen Lee关键词:循环肿瘤细胞 微流控芯片 多孔薄膜 两种实时荧光定量核酸检测试剂盒测定TB DNA结果比较 被引量:2 2013年 目的探讨两种国产实时荧光定量PCR(FQ-PCR)试剂盒快速诊断肺结核病的准确性和可行性。方法选取60例活动期肺结核患者样本及正常对照样本、标准品和质控品,使用两种国产实时荧光定量核酸检测试剂盒分别进行TBDNA检测。结果两种试剂阴阳结果符合率为100%,均未出现假阳性和假阴性结果;两种试剂在TBDNA载量为104~107IU/mL范围内线性关系良好,重现性试验显示变异系数均小于4%;60例阳性标本中湖南某公司TBDNA定量结果高于广州某公司结果45例,低于广州某公司结果15例;两组资料TBDNA定量比较,P<0.01;相应地其CT结果均低于广州某公司试剂,CT相差值的波动范围在(3.44±1.66)之间。结论两种国产实时荧光定量PCR试剂盒能快速、有效地诊断肺结核病,其特异性较高,能够满足结核早期诊断的要求。 龙幼敏 李国豪 梁广铁 明凯华 雷秀霞关键词:结核分枝杆菌 聚合酶链反应 CRP、血常规检验在儿科疾病中的临床效果分析 被引量:4 2017年 目的:探讨CRP、血常规在儿科疾病检验中的应用效果及其临床价值,为以后的医疗实践提供可靠的科学依据。方法:选取我院儿科2015年4—10月收治的62例肺炎、发烧患儿作为研究组,另选同期来院体检的60例健康幼儿作为参考组,两组幼儿均行CRP、血常规检验,观察两组幼儿临床检验结果,对比其CRP阳性率、CRP指标水平与血常规检验结果等。结果:经检验发现,研究组患儿CRP阳性率为100.0%,与参考组幼儿的3.3%相比,差异具有统计学意义(P<0.05),且其CRP指标水平明显高于参考组,各指标数据比较差异均存在明显统计学意义(P<0.05)。研究组血常规检验超敏C-反应蛋白数、白细胞总数以及中性粒细胞数等均升高例数均高于参考组,白细胞总数与中性粒细胞数等正常例数低于参考组。两组幼儿血常规检验情况比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:儿科疾病采用CRP、血常规检验,检验结果准确、客观,能够为患儿的临床诊断和治疗提供有效依据,具有较高的推广和应用价值。 黄婷婷 周志健 陈林强 梁广铁关键词:CRP 血常规检验 儿科疾病