柯细松
- 作品数:9 被引量:52H指数:3
- 供职机构:挪威卑尔根大学更多>>
- 发文基金:重庆市卫生局科研项目重庆市科委基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- PD98059对胰腺癌Panc-1细胞株及裸鼠荷瘤增殖、凋亡的影响被引量:2
- 2010年
- 目的:探讨MAPK/ERK1/2细胞信号通路在胰腺癌演化中的作用和机制.方法:用不同浓度PD98059处理Panc-1细胞及裸鼠,采用MTT法观察其对胰腺癌细胞增殖的影响,利用流式细胞仪检测胰腺癌细胞周期以及细胞凋亡的变化,使用Hoechst33258染色观察凋亡细胞的形态,应用Westernblot检测裸鼠荷瘤MAPK/ERK1/2通路P-ERK1/2蛋白的表达变化.结果:不同浓度的PD98059均可显著抑制胰腺癌Panc-1细胞的增殖(均P<0.05),且随着处理时间的延长,PD98059浓度的增加,其抑制能力逐渐增强.96h50μmol/L的PD98059抑制Panc-1细胞增殖的能力最强,其A490与对照相比具有统计学差异(0.391±0.029vs0.994±0.057,P<0.05).此时Panc-1细胞的凋亡率较对照组明显增加(11.77%±1.33%vs1.13%±0.19%,P<0.05),而20μmol/L的PD98059处理后,细胞凋亡率与对照组无明显增加.PD98059同时可以降低裸鼠荷瘤P-ERK1/2蛋白的表达,其完全抑制浓度(50μmol/L)具有最强的抑制能力.结论:MAPK/ERK1/2信号通路是调控胰腺癌细胞重要的因素之一,其作用机制与磷酸化的ERK1/2蛋白有关.
- 胡益群司丽娟叶震世林振和柯细松
- 关键词:PD98059胰腺癌增殖凋亡裸鼠
- 人内皮抑素在大肠杆菌中的高效表达及活性研究被引量:2
- 2002年
- 目的 :表达人内皮抑素蛋白 ,制备多克隆抗体 ,检测其生物学活性。方法 :采用PCR法扩增人内皮抑素基因 ,构建pGEX -ES融合表达载体 ,IPTG(异丙基硫代 - β-D半乳糖苷 )诱导表达。初步纯化的内皮抑素包含体蛋白制备兔多克隆抗体 ,Western -blot检测其在小鼠肝、肾等的表达。亲和纯化的内皮抑素蛋白用内皮细胞抑制实验检测其生物学活性。结果 :诱导表达的人内皮抑素蛋白经凝血酶酶切后 ,分子量约为 2 0kD ,具有抑制内皮细胞生长的活性。制备的多克隆抗体检测出内皮抑素在小鼠肝、肾等组织的表达。结论
- 张革柯细松丁爱玲银巍杨琨朱振宇
- 关键词:内皮抑素大肠杆菌生物学活性实体瘤
- 对氧磷酯酶-1与老年人2型糖尿病关系的研究被引量:1
- 2003年
- 目的 探讨血清对氧磷酯酶-1(PON-1)活性、基因Glu-Arg192位多态性与老年人2型糖尿病(DM)及并发症的关系。方法 用酚乙酸酯为底物测定血清PON-1活性;用多聚酶链限制片段多态件反应技术对老年2型DM各组及健康老年人的PON-1基因192位进行基因分型。结果 老年单纯2型DM组PON-1活性为(98.32±21.68)kU/L,比健康对照组显著降低〔(13.29±19.74)kU/L,P<0.01〕,老年2型DM合并大、微血管病变组PON-1活性分别为(73.18±13.00)和(74.02±15.13)kU/L,比老年单纯2型DM组显著降低对(P<0.01)。重庆市老年居民PON-1基因192位A、B等位基因频率在健康对照组为0.44、0.56,老年人单纯2型DM组及大、微血管病变组为0.43、0.57,0.33、0.67和0.38、0.62,老年人2型DM各组与健康对照组比较PON-1、AA、AB、BB基因到分布差异无显著性。结论 PON-1活性在老年2型DM及共发血管病变患者中均显著降低,提示PON-1活性的降低参与了DM血管并发症的发生。重庆市老年居民PON-1基因192位B等位基因与老年人2型DM及2型DM并发血管病变无明显关系。
- 蒲霞曾繁荣曾昭淳刘万里柯细松
- 关键词:老年人2型糖尿病对氧磷酯酶-1基因多态性
- 对氧磷酯酶-1与老年人2型糖尿病关系的研究
- 目的探讨血清对氧磷酯酶-1(PON-1)活性、基因Glu-Arg192位多态性与老年人2型糖尿病(DM)及并发症的关系。方法用酚乙酸酯为底物测定血清PON-1活性;用多聚酶链限制片段多态性反应技术对老年人2型DM各组及健...
- 曾繁荣蒲霞曾昭淳刘万里柯细松
- 文献传递
- 血管发生抑制因子restin的克隆表达及其抗血管活性的初步研究被引量:3
- 2002年
- 目的 :克隆人血管发生抑制因子restin(hRS) ,在E .coli中融合表达 ,并测定其抗血管活性。方法 :用RT PCR法从中国人胎盘组织中扩增hRS基因 ,重组入pGEM T载体中并测序鉴定 ,构建原核表达载体pGEX hRS ,表达融合蛋白GST hRS。融合蛋白经亲和纯化及凝血酶切后 ,采用鸡胚绒毛膜尿囊膜试验检测其抗血管生成活性。结果 :RT PCR产物为 5 64bp ,测序结果与Genbank中胶原XV(COL15A1)的C端序列一致 ,但在 2 1位 (TCT→TCG)引起丝氨酸的同义突变 ,82位 (ACA→TCA)引起丝氨酸突变为苏氨酸。诱导表达的人GST hRS融合蛋白经凝血酶切后 ,分子量为 2 0kD ,具有抗血管生成活性。结论 :hRS的成功克隆、表达为抗血管生成治疗实体瘤的研究奠定了实验基础。
- 张革柯细松冯涛周兰曾昭淳
- 关键词:RESTIN抗血管生成活性胎盘组织基因克隆
- 对氧磷酯酶1与2型糖尿病肾病的关系被引量:13
- 2002年
- 目的 探讨血清对氧磷酯酶 1(PON1)活性与 2型糖尿病 (DM)并发肾病 (DN)的关系。方法 血清PON1活性用酚乙酸酯为底物测定 ,血浆氧化型低密度脂蛋白 (ox LDL)用ELISA法测定 ,尿 2 4小时微量白蛋白用放免法测定。结果 91例 2型DM患者的PON1活性比 5 4例正常对照显著降低〔(138.2± 31.4 )kU/Lvs (184 .1± 2 9.5 )kU/L ,P <0 .0 0 1〕 ,且 2型DM的Ⅰ组 (UAER <30mg/ 2 4h)、Ⅱ组 (UAER 30~ 30 0mg/ 2 4h)和Ⅲ组 (UAER >30 0mg/ 2 4h)相比 ,PON1活性依次显著下降〔(15 1.8± 2 4 .5 )kU/L ,(12 4 .5± 32 .8)kU/L ,(10 1.1± 36 .6 )kU/L ,P <0 .0 1〕 ,而ox LDL的浓度却依次显著升高〔(6 16 .2± 135 .7) μg/L ,(75 3.9± 132 .5 ) μg/L ,(875 .1± 15 3.2 ) μg/L ,P <0 .0 1〕。PON1活性与ox LDL的浓度呈高度负相关 (r =- 0 .83,P <0 .0 0 1) ,也与UAER呈负相关 (r =- 0 .2 8,P<0 .0 5 ) ,多元回归分析表明PON1活性是 2型DM并发DN的高度危险因素 (P <0 .0 1)。结论 PON1活性在 2型DM显著下降 ,且在并发DN的 2型DM患者下降更显著。PON1活性与ox LDL呈负相关。PON1活性降低是
- 曾昭淳刘万里王红漫张革柯细松曾繁荣
- 关键词:非胰岛素依赖型糖尿病糖尿病肾病对氧磷酯酶1氧化型低密度脂蛋白
- PTEN抑癌机制的最新进展被引量:14
- 2001年
- PTEN特异性地使磷脂酰肌醇 - 3,4,5 -三磷酸 [Ptd Ins(3,4,5 ) P3]去磷酸化 ,拮抗了 PI3K/ AKT信号系统 ,具有调节细胞生长、增殖、迁移等多种效应 ,在多种肿瘤中发现有 PTEN的缺失或突变。最近关于 PTEN的抑癌机制取得重要进展 ,为进一步阐明
- 柯细松
- 关键词:PTEN抑癌基因磷酸酶信号转导细胞迁移
- PCR-LIS-SSCP检测大肠癌PTEN基因的点突变被引量:18
- 2002年
- 目的 探讨PTEN基因突变在大肠癌发病机理中的作用。方法 应用聚合酶链反应 -低离子强度 -单链构象多态性技术 ,对大肠癌及正常大肠石蜡包埋组织中PTEN的第 7、第 8个外显子进行点突变检测。结果 在 60例大肠癌组织中 ,第 7个外显子SSCP带型异常的有 2 8例 ,阳性率为 46.7% (χ2 =5 .0 81,P <0 .0 5 ) ,第 8个外显子未见阳性带。在 10例正常大肠组织中 ,2个外显子均未见异常SSCP带型。结论 大肠癌组织中PTEN的第 7个外显子点突变的发生率高 。
- 柯细松曾昭淳刘万里
- 关键词:PTEN基因大肠癌点突变单链构象多态性发病机理
- 人内皮抑素(hES)的亚克隆、表达、抗体制备及其生物学活性的初步研究
- 该课题运用基因工程技术,将从人胎肝组织克隆的内皮抑素(human endostatin hES)基因进行原核表达、纯化,检测重组hES的抑制内皮细胞增殖及抗血管生成的生物学活性,并制备高效坐的特异的抗hES多克隆抗体(p...
- 柯细松
- 关键词:ENDOSTATIN蛋白质复性内皮抑素基因原核表达
- 文献传递