杨正洪
- 作品数：7 被引量：25H指数：3
- 供职机构：中国科学院更多>>
- 发文基金：上海市卫生局“百人计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ELISA法定量检测长春新碱诱导的K562及K562/VCR凋亡被引量：7
- 1999年
- 细胞凋亡是一种不同于细胞坏死的细胞死亡方式，具有特殊的形态学及生物化学特征。其生物化学变化主要表现为内源性核酸内切酶的激活。它依赖于Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋的核酸内切酶从核小体间连接处将双链ＤＮＡ切断，形成以１８０ｂｐ为最小单位的ＤＮＡ片断，经琼脂糖电泳分...
- 朱玉胜吕元吕元林果为林果为张荣兴顾静文
- 关键词：肿瘤细胞凋亡长春新碱ELISAK562
- 表面表位包埋法制备肿瘤表面抗原P185^(neuc-erbB-2)单克隆抗体及其性质研究被引量：14
- 2000年
- 目的 :细胞表面表位包埋法 (SEM)是一种选择细胞表面特定的表达分子制备单克隆抗体的新途径。由于P185 neu c erbB 2 是乳腺癌及其他肿瘤的一个重要表面标志 ,这个研究旨在应用SEM法制备特异性好 ,灵敏度高的P185单克隆抗体并分析其特性以便于临床。方法 :采用细胞表面表位包埋法免疫BALB C小鼠 ,常规杂交瘤技术进行细胞融合 ,ELISA法测定 ,有限稀释法克隆化。结果 :筛选得到 3株能稳定分泌抗人癌基因erbB 2产物P185蛋白的McAb杂交瘤细胞。经间接免疫过氧化物酶染色和流式细胞术分析证明该McAb特异性与P185阳性细胞膜结合 ,而不与结构类似的EGFR膜阳性细胞结合。免疫印迹实验证明这些McAb特异地与P185蛋白结合 ,病理切片免疫组化结果证明该单抗对乳腺癌组织呈特异膜阳性反应。结论 :SEM法制备的肿瘤表面抗原P185的McAb杂交瘤具有很好的用于临床诊断肿瘤抗原P185的价值及工程化改造的前景。
- 王琛李昀李平刘兢杨正洪吕源冈朱德厚张荣兴姚阳吴强管伟宁杨枫
- 关键词：单克隆抗体
- 抗卵巢上皮癌单克隆抗体的制备和鉴定被引量：1
- 1997年
- 以人的浆液性卵巢上皮癌细胞系HO－8910为抗原，制备分泌抗卵巢癌单克隆抗体的杂交瘤，经间接免疫荧光组化鉴定证实。制备的单克隆抗体0C1C3与HO-8910呈强阳性反应，与其他肿瘤细胞系则无反应或反应极弱。在冰冻切片中，单克隆抗体OC1C3与卵巢恶性肿瘤呈强阳性反应（7／8），与绒癌有部分交叉反应（1／2），与正常卵巢和胚胎组织无反应。结果表明OC1C3是卵巢恶性肿瘤的一种特异性抗原的单克隆抗体。为进一步改善卵巢恶性肿瘤的免疫诊断方法提供了有利的基础。
- 陈亚宝吕元杨正洪朱德厚张荣兴
- 关键词：单克隆抗体卵巢癌
- 动物细胞株系的质量控制 一、新生牛血清质量的检测
- 哺乳动物细胞培养,不仅是细胞生物学领域内一种常用的研究手段,而且近年来巳成为重要的生物工程技术。各种杂交瘤所分泌的单克隆抗体和转基因细胞的产物巳开始在生物学和医学上得到应用。迄今,常规哺乳动物细胞培养液都以不同的基础培养...
- 朱德厚杨正洪高效群喻峰
- 文献传递
- 抗p185单克隆抗体的制备及其在乳腺癌诊断中的应用
- 2000年
- 姚阳官伟宁吴强杨枫刘兢王琛李昀杨正洪吕沅冈朱德厚
- 关键词：乳腺癌
- K562及K562/VCR对长春新碱诱导凋亡的敏感性被引量：4
- 1999年
- 研究人类白血病细胞株Ｋ５６２及耐长春新碱的Ｋ５６２变异株Ｋ５６２／ＶＣＲ对长春新碱诱导凋亡的敏感性的差异，以探讨抗凋亡在白血病多药耐药性（ＭＤＲ）中的作用。方法将Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ分别用浓度为０、０．００１、０．０１０μｇ／ｍｌ的长春新碱诱导２４ｈ，用流式细胞仪ＰＩ染色法、ＴＵＮＥＬ法及ＥＬＩＳＡ法分别进行细胞凋亡检测。结果经浓度为０、０．００１μｇ／ｍｌ长春新碱诱导后，Ｋ５６２细胞凋亡率分别为（４．１０±０．１７）％、（１３．３０±３．７４）％，而Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞凋亡率分别为（３．６１±０．６９）％、（９．０６±４．２４）％，统计学显示两者差异无显著性（ｎ＝３，Ｐ＞０．０５）。而长春新碱浓度达０．０１０μｇ／ｍｌ时，Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞凋亡率分别为（３６．４８±６．７０）％、（１０．４５±３．７１）％，两者差异有极显著意义（ｎ＝３，Ｐ＜０．０１）。ＴＵＮＥＬ及ＥＬＩＳＡ检测结果与此类似。结论Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ对长春新碱诱导细胞凋亡的敏感性不同，耐药细胞对药物诱导细胞凋亡的抵抗性增强可能在白血病ＭＤＲ发生中有重要作用。
- 朱玉胜吕元吕元杨正洪林果为张荣兴杨正洪
- 关键词：多药耐药性长春新碱
- 凋亡调节蛋白的表达与K562/VCR多药耐药性的关系
- 2001年
- 目的 探讨K5 6 2 /VCR细胞中凋亡调节蛋白表达的变化与其多药耐药性 (MDR)的关系。方法 通过免疫细胞化学法和免疫印迹法 (westernblot)对凋亡调节蛋白Bcl- 2、Bcl -XL、Bax、Bak在多药耐药细胞K5 6 2 /VCR和药物敏感细胞K5 6 2中的表达进行分析。结果 抗凋亡调节蛋白Bcl- 2、Bcl-XL 在K5 6 2 /VCR细胞中的表达阳性率分别为 (4 0 .0± 8.0 ) %和 (6 0 .0± 10 .0 ) % ,在K5 6 2细胞中为 (1.0± 0 .3) %和 (2 0 .0± 4.0 ) % ,阳性率差异均具有显著性 (n =3,P <0 .0 5 )。促凋亡调节蛋白Bax在以上两种细胞中的表达程度无明显区别。促凋亡调节蛋白Bak在两种细胞中均不表达或表达程度极低。结论 抗凋亡调节蛋白 (Bcl- 2、Bcl-XL)在K5 6 2 /VCR细胞MDR发生中可能发挥重要作用 ,而促凋亡调节蛋白Bax、Bak可能不起主要作用。
- 朱玉胜吕元林果为张荣兴杨正洪吕沅冈
- 关键词：多药耐药性白血病凋亡调节蛋白K562/VCR
