杨文冲
- 作品数:8 被引量:12H指数:3
- 供职机构:长春生物制品研究所更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 冻干型血小板抗体筛检细胞的研制及其应用
- 目的建立覆盖HPA1-5、15系统中12个抗原的血小板抗体筛检细胞,并将其冻干,为临床血小板抗体筛检提供稳定可靠的HPA抗原。方法采用PCR-SSP技术对O型献血者进行HPA1-5、15基因分型,挑选3名献血者血小板组建...
- 段生宝鞠海英杨文冲邰慧波陈喜鹏李勇
- 白细胞介素-2基因佐剂对乙型肝炎疫苗免疫效果的影响被引量:4
- 2005年
- 目的研究白细胞介素-2基因佐剂对乙型肝炎疫苗免疫效果的影响。方法利用分子生物学技术构建含IL-2基因的重组质粒pcDNA3.1/IL-2,经测序鉴定、碱裂解法大量提取及Sepharose4FF柱层析纯化,得到重组质粒pcDNA3.1/IL-2和pcDNA3.1/S,免疫豚鼠后,经ELISA检测豚鼠血清中抗HBsAg滴度,CTLL-2细胞株/MTT法检测IL-2活性。结果序列测定和分析结果表明重组质粒pcDNA3.1/IL-2构建正确。血清中抗HBsAg抗体滴度:铝佐剂+HBsAg组为2116mIU;IL-2+HBsAg组为1987mIU;质粒pcDNA3.1/IL-2+HBsAg组为2252mIU;质粒pcDNA3.1+IL-2+pcDNA3.1/S组为67·19mIU;质粒pcDNA3.1/S组为50·88mIU。重组质粒pcDNA3.1/IL-2免疫1周后,IL-2表达水平达高峰,以后逐渐降低,但1个月后IL-2水平仍高于空白对照组。对抗HBsAg抗体滴度和IL-2活性的检测结果进行统计学分析表明,各组间差异有显著意义(P<0·05)。结论IL-2基因佐剂可以增强乙肝重组疫苗和乙肝DNA疫苗的免疫效果。
- 杨文冲金立杰赵小琳郝富勇
- 关键词:白细胞介素-2基因佐剂乙型肝炎基因工程疫苗免疫保护力
- 冻干型血小板抗体筛检细胞的研制及其应用
- 2010年
- 段生宝鞠海英杨文冲邰慧波陈喜鹏李勇
- 关键词:血小板抗体筛检干型凝集法健康献血者血浆样本
- 重组CHO-C_(28)细胞生长动态的研究
- 2004年
- 观察CHO C2 8细胞在大生产过程中 ,生长状态曲线 ,为细胞培养过程中换液及培养条件提供依据。人为控制培养液中血清含量、加液量、pH值等条件。从生产种子 2 2代左右开始传代 ,经 5~ 6 d形成致密细胞单层 ,一般维持换液次数为 30次左右。如果生产种子代次高 ,其维持换液次数也相应减少 ,根据不同换液次数细胞增殖数量不同 ,总结出重组CHO C2 8细胞生长动态曲线。并根据换收液的HBsAg滴度 ,绘出换液次数和HB sAg相关曲线。结论 :7~ 2 3次换液期间 (缓慢生长期 )HBsAg收获最高。
- 周长军陈万革董雪林赵丽剑杨文冲周安广赵小琳
- 关键词:CHO-C28细胞HBSAG
- 重组卡介苗活载体疫苗的研究进展被引量:3
- 2003年
- BCG不仅是一种活疫苗 ,而且还是外源基因的表达载体和较强的免疫佐剂 ,随着研究的深入 ,很多外源蛋白在BCG中获得表达 ,有的获得了较好的免疫效果。虽然BCG存在一些问题有待解决 ,但从长远来看 ,rBCG具有潜在的应用前景 ,BCG有望在不久的将来应用到临床 ,用于疾病的预防和治疗。
- 杨文冲金立杰杨丽华
- 关键词:卡介苗
- 葡萄球菌蛋白A的纯化新工艺被引量:2
- 2007年
- 目的建立一种高效、简便、实用的分离纯化葡萄球菌蛋白A(SPA)的工艺。方法采用超声波破菌和IgG-Sepharose4B亲和层析分离纯化SPA;以Lowry法检测蛋白含量;双向琼脂免疫扩散法测定效价和特异性;用还原和非还原SDS-PAGE法检测纯度和相对分子质量。结果此法制得的3批SPA的蛋白含量分别为4·7、4·4和5·4mg/ml,收率分别为2·70、2·64和3·78g/100g湿菌。对人IgG的免疫双扩散效价均为1:64;与正常人、豚鼠、家兔和小鼠的血清反应均出现一条沉淀线,而与鸡和羊不出现沉淀线。经非还原SDS-PAGE检测只呈现一条蛋白带,相对分子质量约为160000~180000;经还原SDS-PAGE检测呈现两条蛋白带,相对分子质量分别约为67000和34000。结论已成功建立了分离纯化SPA的新工艺。
- 何小曼张超杨文冲童军刘颖王丹栾勇王玮欣王超
- 关键词:葡萄球菌蛋白A纯化
- 在CHO-C28细胞大规模培养中提高收获次数及HBsAg的表达
- 2003年
- 目的 :在CHO -C2 8细胞大规模培养过程中增加收获次数 ,延长细胞收获周期 ,提高HBsAg收获量。方法 :采用 15L转瓶培养CHO -C2 8细胞 ,分 3组 ,对比观察不同小牛血清含量及pH值对细胞生长及HBsAg表达的影响 ,优化最佳培养条件。结果 :三组比较 ,实验 1组的收获次数最多 ,达 2 5次以上 ,HBsAg的表达量最高 ,收液量最多。结论 :优化了CHO -C2 8细胞的培养条件。
- 周长军金立杰赵小琳陈万革何巍乔宏雷杨文冲
- 关键词:细胞HBSAG
- 国产免疫磁珠与溴化氢活化Sepharose 4B亲和层析分离羊抗人IgG的比较被引量:3
- 2006年
- 目的比较国产免疫磁珠与溴化氢活化Sepharose 4B两种不同介质偶联人免疫球蛋白纯化羊抗人IgG的差别。方法采用亲和层析的方法纯化羊抗人IgG,通过血凝实验检测不同介质纯化产物的效价和特异性。通过SDS-PAGE检测其纯度。通过计算偶联率及蛋白回收率,比较两种介质纯化效率。结果两种不同介质纯化的羊抗人IgG特异性良好,效价均为1∶512,SDS-PAGE检测均为单一条带。采用两种介质纯化羊抗人IgG,蛋白回收率分别为10·03%和17·45%。结论两种不同介质采用亲和层析方法纯化均可获得纯度较高的羊抗人IgG。
- 童军李勇陈亚光刘庆海杨文冲刘颖
- 关键词:免疫磁珠