杨勇
- 作品数：3 被引量：30H指数：2
- 供职机构：复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 抗增殖蛋白抑制转化生长因子-β1诱导的肾脏成纤维细胞增殖和表型改变被引量：18
- 2007年
- 目的研究抗增殖蛋白(prohibitin,PHB)在肾间质纤维化发生中的作用。方法 (1)检测48例原发性肾小球肾炎患儿肾组织中 PHB 蛋白表达,并比较其与肾小管间质损伤程度的相关性。(2)观察 PHB 在大鼠肾脏成纤维细胞(NRK-49F)中亚细胞定位,以 Western 印迹和 RT-PCR 测定NRK-49F 受到转化生长因子β1(TGF-β1)刺激后 PHB 表达的变化。(3)构建 PHB 表达质粒并转染,观察 PHB 对 NRK-49F 细胞周期以及表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白质和 mRNA 的影响。结果(1)PHB 蛋白主要表达于肾间质细胞和肾小管上皮细胞的胞质,随肾小管间质损伤程度加重而逐渐减弱(组间比较,均 P<0.01),PHB 表达量与肾小管间质损伤程度显著负相关(r=-0.802,P<0.01)。(2)激光共焦显微镜下见 PHB 主要分布于 NRK-49F 的细胞质,细胞核亦有较弱表达。TGF-β1刺激后 PHB 蛋白和 mRNA 表达均下调,呈现时间和剂量依赖关系(组间比较,P<0.01)。(3)成功构建 PHB 真核表达质粒,转染48h 细胞中 PHB 蛋白量升高约2.54倍(与未转染组比较,P<0.01)。(4)转染 PHB 基因明显抑制 TGF-β1所诱导的细胞增殖,使更多的细胞处于 G_0/G_1期(与FGF-β1组比较,P<0.01),而对未受刺激的细胞无影响(P>0.05)。(5)转染 PHB 基因明显抑制TGF-β1所诱导的α-SMA 蛋白质和 mRNA 表达(与 TGF-β1组比较,P<0.01),而对α-SMA 基础表达无影响(与 FGF-β1组比较,P>0.05)。结论 PHB 在肾组织中的表达水平可以反映肾小管间质损伤程度,外源性 PHB 显著抑制 TGF-β1诱导的成纤维细胞增殖和表型改变。
- 郭维徐虹黄文彦陈径杨勇傅睿刘海梅查锡良张志刚
- 关键词：转化生长因子Β成纤维细胞表型
- PI3K信号通路通过Skp2、p27调节肝癌细胞的增殖被引量：12
- 2008年
- 探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路调节肝癌细胞增殖的机制.用LY294002特异性阻断PI3K信号通路后,人肝癌细胞(SMMC-7721)的增殖明显被抑制.RT-PCR及蛋白质印迹结果显示,LY294002增加了p27蛋白的表达,但不影响p27的mRNA表达.在LY294002处理的细胞中转入p27的RNAi质粒以干扰p27蛋白的表达后,肝癌细胞的增殖能力可部分恢复.放线菌酮(Chx)处理实验表明,阻断PI3K信号通路使p27蛋白的半衰期延长,稳定性增加.进一步研究发现,LY294002可抑制介导p27蛋白降解的关键分子Skp2的mRNA表达,还可缩短Skp2蛋白的半衰期,降低Skp2蛋白的稳定性.但在SMMC-7721中分别转染PI3K下游重要靶分子Akt的持续激活和失活突变体,却并不影响p27蛋白的表达.这些结果表明,PI3K信号通路在转录及翻译后水平调节Skp2的表达而影响p27蛋白的降解,从而调节肝癌细胞的增殖,但Akt并没有参与这种调节.
- 傅奕方征宇王丽影李增霞杨勇查锡良
- 关键词：P13K信号通路P27SKP2AKT蛋白质降解
- TGF-β1通过Smad和MAPK信号通路下调PTEN表达
- 转化生长因子 TGF-β1是一个有双重作用的细胞因子,在上皮细胞中可以作为抑癌因子存在,但在肿瘤中促进细胞侵袭和肿瘤转移。PTEN 是一个有双重特异性磷酸酶活性的抑癌基因,它在很多人类肿瘤中发现有突变和缺失,研究表明 T...
- 杨勇
- 文献传递
