李鲲
- 作品数：14 被引量：131H指数：7
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- 骨形态发生蛋白-2对原代鼠胚成骨细胞血管内皮生长因子表达的影响被引量：11
- 2006年
- 目的通过不同剂量重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)刺激原代培养的小鼠胚胎成骨细胞,探讨BMP-2对成骨细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及规律。方法取19 d胎龄的小鼠胚胎颅骨成骨细胞进行体外培养,采用RT-PCR法或Western blot法染色法检测不同浓度rhBMP-2、不同作用时间下对成骨细胞VEGF mRNA表达的影响及规律。结果RT-PCR法检测到VEGF mRNA在原代成骨细胞内稳定表达；半定量分析表明,随着rhBMP-2浓度的升高,VEGF mRNA的表达量逐渐增加,当rhBMP-2浓度为300 ng/mL左右时,VEGF mRNA的表达量最高,超过此浓度,VEGF的表达则有下降趋势；应用终浓度rhBMP-2(300 ng/mL)刺激成骨细胞时,不同作用时间下VEGF mRNA的表达量呈双时相,分别在3 h和24 h时出现高峰,48 h时VEGF mRNA的表达仍保持较高水平。除去各自对照组的影响,各时间点VEGF表达的相对值[(rhBMP-2组/对照组)比值]亦呈时间依赖性关系,6 h时明显升高为对照组的2．5倍(P＜0．05),36 h时约升高为对照组的2倍。结论VEGF可在原代鼠胚成骨细胞内稳定表达；rhBMP-2在体外可刺激原代骨细胞VEGF的表达,并呈一定的浓度和时间依赖性关系。
- 傅德皓杨述华肖宝钧杨操叶哲伟李鲲宁旭
- 关键词：血管内皮生长因子重组人骨形态发生蛋白-2成骨细胞原代培养
- Survivin基因干扰RNA对骨肉瘤MG-63细胞系增殖和凋亡的影响被引量：4
- 2006年
- [目的]观察Survivin基因siRNA表达载体对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响。[方法]体外构建SurvivinshRNA表达载体pS ilence 2.1-neo-Survivin,转染骨肉瘤细胞系MG-63,筛选稳定表达的克隆,倒置显微镜观察各组细胞形态学变化,RT-PCR、W eston-b lot方法检测转染后Survivin mRNA及蛋白的表达,噻唑蓝(MTT)法、克隆形成实验检测细胞的增殖情况,吖啶橙荧光染色法观察细胞凋亡情况。[结果]转染后MG-63细胞Survivin基因mRNA水平和蛋白表达显著下降,其抑制率分别为85.08%和81.14%;细胞增殖受到显著抑制,培养48 h后与空白组比较,抑制率达63.41%;吖啶橙染色显示转染组细胞出现明显核碎裂等凋亡改变,转染组凋亡率为24.54%。[结论]靶向Survivin基因的siRNA表达载体可以显著抑制骨肉瘤细胞增殖,促进细胞凋亡。
- 李鲲杨述华刘红云吴强傅德皓
- 关键词：SURVIVINSIRNA短发夹状RNA骨肉瘤
- 骨形态发生蛋白-2诱导成骨过程中血管内皮生长因子的表达及分析被引量：20
- 2006年
- 傅德皓杨述华邵增务李鲲宁旭袁永辉
- 关键词：骨形态发生蛋白-2成骨过程成纤维细胞生长因子骨生长因子诱导成骨
- 利用siRNA抑制人骨肉瘤细胞survivin的表达
- 2006年
- 目的构建生存素(survivin)短发夹状RNA表达载体,检测其对骨肉瘤细胞survivin mRNA及蛋白表达的影响。方法体外构建survivin shRNA表达载体pSilence2.1-neo-survivin,转染骨肉瘤细胞系MG-63,RT-PCR、免疫组化方法检测转染前后survivin mRNA及蛋白的表达,MTT比色法检测细胞增殖活性。结果pSilence2.1-neo-survivin载体转染能显著抑制survivin mRNA、蛋白表达,转染后48h细胞增殖的抑制率为61.83%。结论pSilence2.1-neo-survivin可显著抑制MG-63细胞survivinmRNA、蛋白的表达及细胞的增殖活性。
- 李鲲杨述华刘红云傅德皓宁旭梅荣成
- 关键词：SURVIVINRNA干扰短发夹RNA骨肉瘤
- 钛合金支撑架结合自体骨和DBM治疗股骨头坏死被引量：29
- 2006年
- 【目的】探讨空心钛合金支架植入结合自体松质骨和脱钙骨基质（DBM）治疗成人股骨头坏死初步疗效。【方法】采用经大转子下通过股骨颈钻隧道至股骨头骨坏死区，将装有自体松质骨和DBM的空心钛合金支架经隧道置入骨坏死区直至软骨下骨约5mm处，髓道远端用自体髂骨填塞。【结果】经临床应用13例。15个髋关节，随访14-36个月，并按成人股骨头缺血性坏死疗效百分评价法进行评价，优良率为93．3％。【结论】空心钛合金支架植入结合自体松质骨和DBM治疗成人股骨头坏死具有以下优点：（1）手术操作简单，不破坏患者股骨头本身的血液供应，创伤小。（2）将具有骨诱导活性的DBM直接放入骨坏死区，成骨作用强。（3）增加股骨头负重区软骨下骨的机械支撑，降低局部应力，有利于股骨头坏死的修复及重建。
- 梅荣成杨述华杨操李进叶哲伟李鲲付德浩肖军王锐英邹利军
- 关键词：股骨头坏死骨移植
- 应用脱钙骨基质和硫酸钙颗粒治疗骨缺损的初期结果被引量：12
- 2007年
- 目的探讨使用骨移植替代物脱钙骨基质（DBM）和硫酸钙颗粒（OSTEOSET）治疗骨缺损的疗效。方法对同期手术治疗的52例骨缺损患者的缺损处,分别于术后第1、4、8周及3、6、12个月进行随访并摄X线片直至骨缺损愈合。统计分析患者的临床资料、X线片辅助分析骨缺损修复程度和并发症。结果随访8-12个月,植骨术后6、12个月分别有95%和99%患者的骨缺损显示有明显的新骨形成,修复水平为60%-100%。并发症为3例（5.77%）,经换药后治愈,未发生骨缺损不愈合。结论DBM和OSTEOSET在骨愈合早期可加速骨缺损的修复,并可作为新鲜自体髂骨的替代物。
- 肖军杨述华勘武生李鹏李鲲马德彰
- 关键词：脱钙骨基质硫酸钙骨缺损
- 核因子-κB受体活化因子配体单克隆抗体对骨髓瘤小鼠调节性T细胞分化的影响
- 2013年
- 目的观察核因子一KB受体活化因子配体（Rankl）单克隆抗体对骨髓瘤小鼠体内调节性T细胞（Treg）分化的影响。方法用Rankl单克隆抗体通过尾静脉注射干预人骨髓瘤小鼠皮下模型后，检测肿瘤局部Treg浸润及Rankl的表达，小鼠模型分空白对照组A、高剂量组B、低剂量组C。结果抗体干预后，3组小鼠腹部皮下包块直径：A组（0．970±0．216）cm，B组（0．560±0．164）cm，C组（0．4104-0．152）CiTI（P〈0．05）；流式细胞分析小鼠外周血Treg比率：A组（8．19±1．27）％，B组（6．32-t-O．74）％，C组（3．84．4-0．43）％（P〈0．05）；逆转录一聚合酶链反应（1it—PCR）检测肿块局部RanklmRNA表达（ACt值）：A组0．565±0．029，B组3．390-4-0．333，C组1．041-4-0．083（P〈0．01）。结论骨髓瘤细胞可能通过表达Rankl促进Treg的分化，抑制机体正常免疫，利用Rankl单克隆抗体阻断这一信号通路可以减少Treg的分化。
- 苗润生肖宏周勇李鲲杨波勘武生
- 鼠胚成骨细胞的原代培养与鉴定被引量：25
- 2006年
- 目的探讨经济、高效的原代成骨细胞培养方法,为进一步的实验研究奠定基础。方法孕龄19天的昆明孕鼠(KM),无菌条件下剖腹取出胎鼠,然后取胎鼠的颅盖骨,剔净、漂洗、剪碎。用0.25%胰蛋白酶消化10分钟,终止消化后,将碎骨块接种于培养瓶中培养,通过相差显微镜、透射电镜观察,并用碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫组化染色和钙结节茜素红染色等方法对所获得的细胞进行鉴定。结果所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态特征,碱性磷酸酶染色、骨钙素染色和钙结节染色均呈阳性。结论改良的组织块培养法可在较短时间内获得大量成骨细胞,所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态和功能。
- 傅德皓杨述华马德彰李鲲郜勇
- 关键词：成骨细胞原代培养小鼠胚胎
- 磷酸钙骨水泥强化椎弓根螺钉对骨质疏松性椎体骨折的临床意义被引量：17
- 2003年
- 目的 :评价磷酸钙骨水泥 (calciumphosphatecement ,CPC)强化和修复椎弓根螺钉的生物力学效果。方法 :6具新鲜老人骨质疏松的脊柱标本 ,从T11～L4 共 36个椎体 ,随机选取其中 32个 ,分为 4组 ,每组 8个。A组 :随机选择一侧椎弓根放置直径为 6 .5mm的椎弓根螺钉 ,另一侧以直径为 3.5mm的钻头导孔。向两侧椎弓根孔道注入配制好的磷酸钙骨水泥 (CPC) 3～ 5ml ,体温下 ( 37℃ )放置 2 4h后 ,再行前述拔出实验。B组 :应用PMMA进行修复和强化 ,作为对照 ,操作方法同A组。C组 :植入椎弓根螺钉 ,添加或不添加CPC ,进行周期抗屈实验。D组 :相同方法 ,应用PMMA作为对照。结果 :CPC骨水泥强化组和修复组拔出力明显高于对照组 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5)。结论 :在植入椎弓根螺钉时添加具有生物活性的磷酸钙 (CPC)
- 杨述华傅德皓刘昌胜李进刘国辉许伟华杨操李鲲汪岚
- 关键词：椎弓根螺钉生物力学骨质疏松磷酸钙骨水泥椎体骨折CPC生物力学
- 股骨近端骨折治疗失败的原因分析及挽救性全髋关节置换被引量：2
- 2006年
- 目的分析股骨近端骨折治疗失败的原因,探讨补救性全髋关节置换术(THR)的疗效。方法2002年2月～2005年4月,对23例股骨近端骨折治疗失败的患者(股骨颈骨折17例,股骨转子部骨折5例,股骨头骨折1例)进行回顾性研究,分析其前期治疗失败的原因,总结此23例患者进行补救性THR后的疗效。结果股骨近端骨折治疗失败的主要原因是骨折后复位不良、内固定方式选择不当或技术错误。21例患者获平均32个月(8～46个月)随访。无感染、脱位及假体周围骨折等并发症发生。21例患者髋关节功能均有改善,Harris评分由术前平均48．3分提高到术后87．6分。结论骨折复位、内固定方式或固定技术对股骨近端骨折的治疗非常重要。老年患者的骨质疏松和年轻患者的高能量损伤也增加股骨近端骨折治疗的难度。对于股骨近端骨折治疗失败的患者,进行补救性的THR重建髋关节功能临床疗效满意。
- 傅德皓杨述华杨操叶哲伟李鲲廖翔王晶
- 关键词：股骨近端骨折
