李艳青
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- SGC7901胃癌细胞株中高尔基体的分离及鉴定
- 2010年
- 高尔基体作为主要的分泌细胞器,其功能复杂。从细胞内分离出纯度较高的高尔基体有利于对其功能的深入研究。通过胃癌细胞SGC7901的大量体外培养,差速离心结合蔗糖密度梯度离心法纯化分离出高尔基体后,电镜及中性红超活染色进行形态学鉴定,高尔基体标志酶半乳糖基转移酶Galse及硫胺素焦磷酸酶TPPase活性测定进行纯度分析,首次从胃癌细胞SGC7901内成功分离出纯度较高的高尔基体,为对高尔基体功能的深入研究奠定基础。
- 何婷婷易永芬李艳青肖钟
- 关键词：高尔基体胃癌细胞
- 肝癌及癌旁肝组织的高尔基体差异蛋白质分析被引量：1
- 2010年
- 目的 筛选并鉴定肝癌及癌旁肝组织高尔基体蛋白质组中差异表达的蛋白质，从高尔基体层面解释肝癌的发生和发展机制，为早期诊断和抗癌药物的研发提供线索。方法应用亚细胞比较蛋白质组学研究方法，比较分析肝癌及癌旁肝组织高尔基体蛋白质组。收集肝癌患者手术切除的癌组织和癌旁肝组织标本，蔗糖密度梯度离心法分离高尔基体。建立并优化两种组织高尔基体的双向电泳方法，用PDQuest软件分析差异表达的蛋白质点，然后用质谱仪获取相应蛋白点的肽质指纹图谱，联网到SwissProt蛋白质组数据库鉴定获得的差异蛋白质点，最后用Westernblot验证双向电泳结果。蛋白质相对表达量的比较采用配对t检验。结果获得了分辨率和重复性均较好的双向电泳银染图谱。与癌旁肝组织相比，肝癌高尔基体蛋白质组有包括膜联蛋白5在内的27个蛋白质位点表达上调，包括染色体修饰蛋白2b在内的20个蛋白质位点表达下调，初步鉴定出了其中17个蛋白质，并用Westernblot从蛋白质水平上验证了双向凝胶电泳结果。结论肝癌及癌旁肝组织高尔基体蛋白质组具有不同的蛋白质位点，这些差异表达的蛋白质涉及到细胞的能量代谢、肿瘤的侵袭和转移，细胞周期调控等方面，为进一步阐释高尔基体在肿瘤的发生和发展中所起的作用提供了有价值的信息。
- 肖钟易永芬何婷婷李艳青
- 关键词：高尔基器蛋白质组光谱法
- 高尔基体α-甘露糖苷酶II在胃癌组织和细胞中的表达及其与E-cadherin，Galectin-3的关系
- 目的:探讨Golgiα-mannosidase II(GMII)在胃癌发生发展中的作用及其可能机制。方法:1.应用免疫组化SP法检测65例胃癌,20例正常胃粘膜组织中GMII,E-cadherin,Galectin-3的...
- 李艳青
- 关键词：E-CADHERINGALECTIN-3胃癌
- 文献传递
- 鼠肝高尔基体双向凝胶电泳的建立
- 2010年
- 目的分离纯化鼠肝高尔基体,初步建立一套相对完善、分辨率和重复性均较高的高尔基体双向凝胶电泳技术。方法应用蔗糖密度梯度超离心法分离纯化高尔基体,通过电镜观察和标志酶分析鉴定其形态及纯度,双向凝胶电泳分离高尔基体蛋白质,用PDQuest8.0软件分析电泳图谱。结果电镜观察显示大部分为高尔基体,纯化高尔基体标志酶TPP酶比活力提高了120倍,得到了分辨率和重复性均较好的双向凝胶电泳图谱。结论已成功建立了鼠肝高尔基体双向凝胶电泳技术。
- 李艳青易永芬何婷婷肖钟
- 关键词：鼠肝高尔基体双向凝胶电泳
- 胃癌细胞高尔基体的蛋白质组学技术平台的建立被引量：3
- 2010年
- 采用蔗糖密度梯度超速离心法分离纯化高尔基体,双向凝胶电泳(2-DE)分离高尔基体蛋白质,用ImageMaster 2D软件分析所得图谱,基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI—TOF MS)鉴定蛋白质点等一系列亚细胞器蛋白质组学方法建立胃癌细胞内高尔基体的蛋白图谱。结果显示分离出的纯度较高的高尔基体建立了分辨率和重复性均较好的双向电泳图谱,运用质谱技术鉴定出12个蛋白质,包括蛋白合成相关蛋白、膜融合蛋白、调节蛋白、凋亡相关蛋白、运输蛋白、细胞增殖分化相关蛋白。通过亚细胞器分离纯化,双向电泳的蛋白分离及MALDI-TOF MS蛋白鉴定分析,首次成功建立了胃癌细胞SGC7901中高尔基体的蛋白质组学技术路线,为胃癌细胞内高尔基体功能的深入研究奠定了基础。
- 何婷婷易永芬李艳青肖钟
- 关键词：胃癌细胞高尔基体
- 高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ在胃癌组织和细胞中的表达及其与E-cadherin，Galectin-3的关系
- 目的:探讨Golgiα-mannosidaseⅡ(GMⅡ)在胃癌发生发展中的作用及其可能机制。
方法:1.应用免疫组化SP法检测65例胃癌,20例正常胃粘膜组织中GMⅡ,E-cadherin,Galectin-3的...
- 李艳青
- 关键词：高尔基体GALECTIN-3胃癌免疫组织化学
- 文献传递
- 高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ在胃癌中的表达及其与E-cadherin、Galectin-3的关系被引量：9
- 2010年
- 目的:探讨胃癌高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(Golgiα-mannosidaseⅡ,GMⅡ)、E-cadherin、Galectin-3的表达及其与胃癌发生发展的关系。方法:应用免疫组化SP法检测65例胃癌,20例正常胃黏膜组织中GMⅡ、E-cadherin、Galectin-3的表达情况。结果:65例胃癌中GMⅡ、E-cadherin、Galectin-3的阳性表达率分别为85%(55/65)、40%(26/65)、74%(48/65)。20例胃正常切缘中GMⅡ、E-cadherin、Galectin-3的阳性表达率分别为50%(10/20)、100%(20/20)、40%(8/20)。GMⅡ、Galectin-3在浸润程度深及有淋巴结转移的胃癌组织中表达明显高于浸润程度浅及无淋巴结转移的胃癌组织(P<0.05)。而E-cadherin则在分化程度低,浸润程度深及有淋巴结转移的胃癌组织中表达明显低于分化程度高,浸润程度浅及无淋巴结转移的胃癌组织(P<0.05)。统计学分析GMⅡ与E-cadherin之间呈负相关(P<0.05),与Galectin-3无相关性(P>0.05)。结论:GMⅡ、Galectin-3在胃癌中高表达,且与癌组织的浸润和转移明显相关。同时GMⅡ与E-cadherin呈负相关,提示GMⅡ可能通过下调E-cadherin的表达来促进胃癌的发展。
- 杨雅莹李艳青易永芬何婷婷肖钟
- 关键词：E-CADHERINGALECTIN-3胃癌免疫组化
