李盈淳
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 含非天然氨基酸突变尿酸酶的表达与纯化
- 李盈淳
- 关键词：非天然氨基酸尿酸酶定点突变化学合成
- 细胞内p53蛋白LC-MS/MS定量方法及其应用被引量：1
- 2012年
- 建立细胞样品中p53蛋白的LC-MS/MS定量方法,应用该定量方法测定放线菌素D作用下细胞中p53表达量的变化。采用免疫沉淀法提取细胞样品中的p53蛋白,对提取后的样品进行酶解,基于肽图分析选择特异性肽段VEY-LDDR(m/z 455.22+-681.21+)作为定量肽段,设计合成肽段VEYIEDR(m/z 462.12+-695.21+)作为内标肽段,建立该肽段的LC-MS/MS定量方法,通过该肽段表征p53蛋白的量;应用该质谱定量方法对放线菌素D给药后的HCT116细胞中的p53蛋白的表达量进行测定。p53蛋白质谱定量方法学考证表明,方法的线性良好(R2=0.999 3),范围2.2～112.3 pmol/mL;专属性好,基质中无干扰成分,批内批间精密度及稳定性均符合生物样品的测定要求;放线菌素D给药后细胞中p53蛋白的表达量呈给药浓度与给药时间依赖性增加。建立的细胞样品中p53蛋白的LC-MS/MS定量方法可以准确的测定细胞内的p53蛋白表达量。
- 李盈淳汤志远吴梦秋王广基郝海平
- 关键词：P53LC-MS放线菌素D
- 含组氨酸标签重组人内皮抑素质谱绝对定量方法
- 本发明的含组氨酸标签重组人内皮抑素质谱绝对定量方法，属于分析技术领域。本发明基于LC-MS/MS，利用Ni<Sup>2+</Sup>琼脂糖凝胶树脂提取血浆样品中的含组氨酸标签重组人内皮抑素，并利用重组人内皮抑素经胰蛋白酶...
- 王广基李盈淳郝海平梁艳汤志远肖亚楠
- 文献传递
- 人乳腺癌细胞乙酰化p53蛋白同位素标记定量方法
- 本发明属于分析领域，涉及乳腺癌细胞内源性生物大分子乙酰化p53蛋白同位素定量分析，利用免疫共沉淀，凝胶电泳等技术手段对细胞复杂基质样品中乙酰化p53蛋白进行提取分离纯化。步骤如下：利用重组人p53蛋白、乳腺癌细胞内p53...
- 王广基汤志远郝海平吴梦秋李盈淳
- 文献传递
- 氨基末端定点聚乙二醇化尿酸酶的研究被引量：2
- 2009年
- 制备氨基末端定点PEG修饰的尿酸酶,并比较尿酸酶修饰前后的免疫原性差异。采用M_r 20k的mPEG-丙醛选择性修饰尿酸酶的氨基末端;利用source 30Q离子交换层析和sephacryl S-200分子排阻层析分离纯化修饰后尿酸酶;测定修饰前后尿酸酶的酶动力学参数和免疫原性。尿酸酶和N端PEG修饰尿酸酶的SDSPAGE检测显示单一条带,SE-HPLC测定尿酸酶修饰前后的保留时间分别为26.578 min和23.818 min;PEG修饰后尿酸酶的最大反应速度为尿酸酶的80%;PEG修饰后尿酸酶与抗体的结合能力和体内的免疫原性均明显降低。这种方法可用来制备N端PEG定点修饰尿酸酶,修饰后可明显降低尿酸酶的免疫原性。
- 李盈淳朱姝高向东才蕾姚文兵
- 关键词：尿酸酶氨基末端分离纯化免疫原性
