公共文化服务平台

采用反向PCR技术优化适合毕赤酵母表达的截短型HPV58型L1基因被引量：1: 2009年; 目的:探讨利用反向聚合酶链反应(反向PCR)技术根据毕赤酵母偏爱密码子优化截短型人乳头瘤病毒58型(HPV58)L1基因的研究。方法:设计PCR引物扩增截短型HPV58L1目的基因,将其克隆入毕赤酵母分泌表达载体pPICZαC;测序并对目的基因进行序列分析;根据毕赤酵母偏爱密码子利用反向PCR技术设计引物对目的基因进行扩增。结果:扩增了截短型HPV58L1基因并将其克隆入毕赤酵母分泌表达载体pPICZαC中;根据毕赤酵母偏爱密码子优化了截短型HPV58L1基因。结论:成功构建经密码子优化截短型HPV58L1基因的毕赤酵母分泌表达载体pPICZαC-HPV58L1。; 马团宇丽李发涛周羽竝; 关键词：毕赤酵母

一氧化氮在兔生长板软骨细胞终末分化中的生物学作用被引量：3: 2007年; 原代分离及培养兔肋软骨生长板软骨细胞,添加不同浓度的全反式维甲酸(AT-RA)诱导软骨细胞的终末分化。酶动力学法检测碱性磷酸酶(AKP)及细胞培养上清液中一氧化氮合酶(NOS)活性;硝酸还原酶法检测所培养软骨细胞上清液中一氧化氮(NO)浓度;AT-RA分别联合NOS抑制剂L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)及可以产生NO的S-亚硝基谷胱甘肽(SNOG)作用于原代培养的生长板软骨细胞,分别检测AKP活性。结果发现随着AT-RA浓度的递增,AKP、NOS活性及NO浓度明显增加(P<0.05);L-NAME明显抑制所培养的生长板软骨细胞AKP的活性(P<0.05),SNOG可以提高所培养的生长板软骨细胞AKP的活性(P<0.05)。认为NO可以促进兔肋软骨生长板软骨细胞的终末分化。; 李发涛宇丽李冬艳刘红; 关键词：一氧化氮生长板软骨细胞细胞分化

广东地区HPV16型L1基因的序列分析及其毕赤酵母表达载体的构建被引量：2: 2008年; 目的:分析广东地区人乳头瘤病毒(HPV)16型L1基因结构特点;构建广东分离株HPV16 L1毕赤酵母分泌型表达载体。方法:采用PCR技术从广东地区宫颈癌组织中扩增HPV16 L1基因,克隆入毕赤酵母表达载体pPICZαC,测序并对HPV16 L1基因进行序列分析。结果:成功扩增了广东地区HPV16 L1基因,并构建了其毕赤酵母表达载体pPICZαC-HPV16 L1。广东分离株HPV16 L1基因序列与德国标准株相比有16处不同,同源性为98.99%,其编码的氨基酸序列有8处发生改变;与中国标准株比较有9处不同,同源性为99.18%,其编码的氨基酸序列有4处发生变化;发现在HPV16 L1基因序列中nt5 649、nt5 652、nt5 654、nt5 657、nt5 692、nt5 693,6个位点存在突变。结论:广东地区HPV16 L1基因序列与德国标准株、中国标准株相比较均存在差异;成功构建广东地区HPV16 L1真核表达载体。; 刘红宇丽周羽竝莫宏波刘萍李发涛李冬艳罗京资; 关键词：人乳头瘤病毒16型 L1基因突变毕赤酵母

双胎之一完全性葡萄胎的产前诊断被引量：7: 2015年; 目的探讨双胎之一完全性葡萄胎的产前诊断及临床处理方案. 方法对2例双胎之一完全性葡萄胎的超声检查、细胞学染色体核型分析及分子生物学检查结果进行回顾性分析.终止妊娠后随访血β-人绒毛膜促性腺激素（β-human chorionic gonadotropin,β-hCG）水平. 结果例1妊娠20周时超声发现胎儿与葡萄胎共存,经腹行葡萄胎组织绒毛活检及胎儿脐静脉穿刺.间期细胞荧光原位杂交检查显示,葡萄胎及胎儿均为二倍体核型;荧光定量聚合酶链反应检查显示,胎儿染色体为双亲来源,葡萄胎组织染色体只有父源性,无母源性;葡萄胎绒毛染色体核型分析结果为46,XX,脐血细胞培养染色体核型分析结果为46,XY.诊断为双胎之一完全性葡萄胎,孕妇选择终止妊娠,引产后第28天血β-hCG降至正常.例2妊娠15周时超声发现胎儿与葡萄胎共存,孕妇拒绝进一步侵入性检查,选择终止妊娠.取引产后的正常胎盘及葡萄胎组织行分子生物学检查,结果与病例1相同,也证实为双胎之一完全性葡萄胎.引产后第33天血β-hCG降至正常. 结论产前超声检查发现胎儿与葡萄胎共存时,应立即进行细胞学或分子生物学检查明确诊断,在此基础上评估妊娠预后及制定临床处理方案.; 何怡何晓旋李发涛娄季武隗伏冰刘彦慧; 关键词：葡萄胎妊娠滋养细胞疾病

脂肪来源的间充质干细胞分离方法的改进被引量：7: 2007年; 目的:从供体年龄、取材部位、提取方法3方面来研究稳定的脂肪间充质干细胞(ADMSCs)分离提取方法。方法:从兔颈背部皮下、肌间以及腹股沟皮下的脂肪组织取材,分别采用一次消化收集法和多次消化收集法分离提取ADMSCs,单层传代培养。分别比较不同提取方法,老年兔、壮年兔与幼年兔,同一供体不同部位的脂肪组织,所分离的ADMSCs产量和生物学特性。结果:运用多次消化收集法能从脂肪组织中稳定分离出生长旺盛的ADM-SCs,与一次消化收集法相比能显著提高所获取的的细胞产量。从老年兔、壮年兔、幼年兔以及同一供体的不同部位脂肪组织中所提取的ADMSCs生长增殖活性无明显差异,但从单位体积脂肪组织提取得到的ADMSCs产量显著不同。结论:多次消化收集法能显著提高分离获得的ADMSCs产量,是对传统的一次消化收集法的改进。选择不同供体年龄和取材部位提取ADMSCs,对细胞的生物学活性影响不大,但对细胞产量有明显影响。; 李冬艳宇丽李发涛刘红罗京资; 关键词：脂肪间充质干细胞原代细胞

6.0GyX射线辐照所致BALB/c小鼠造血系统损伤的动态检测被引量：6: 2017年; 目的观察6.0 Gy X射线辐照对BALB/c小鼠造血系统的影响。方法将80只BALB/c小鼠随机分为对照组和辐照组,每组各40只。用直线加速器X射线对辐照组BALB/c小鼠进行一次性全身6.0 Gy X射线照射。照射后,每天记录小鼠体重和状况。辐照前和辐照后1、3、5、7、14、21、28 d检测小鼠外周血血象和骨髓有核细胞数的变化。结果与对照组相比,辐照组小鼠辐照后体重下降(P<0.05),6 d后缓慢上升;外周血象中白细胞、红细胞、血小板和血红蛋白含量均下降(P<0.05),分别于照射后5、14、14、14 d下降至最低值,然后回升;骨髓有核细胞数急剧下降(P<0.05),于照射后5 d下降至最低值,而后逐渐上升。结论 6.0 Gy X射线辐照可引起BALB/c小鼠造血系统损伤,其机体有一定的自我修复机制。; 金宇林吴洁莹陆琰陈劲松李发涛谢闺娥吴韶清; 关键词：X射线 BALB/C小鼠外周血骨髓有核细胞

人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养的新方法被引量：2: 2018年; 建立一种简便、快捷的人胎盘绒毛膜间充质干细胞(human placental chorionic-derived mesenchymal stem cells,hpc MSCs)分离培养方法。用手持电动匀浆器处理人绒毛膜,经酶消化后接种培养,用倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8测定细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞表面标记,成脂、成骨诱导分化试剂盒鉴定细胞的分化潜能。获得的人胎盘绒毛膜间充质干细胞为成纤维细胞样细胞,呈平行排列或漩涡状生长,高表达CD73、CD105、CD90,而CD34、CD45、CD14、CD19、HLA-DR呈阴性,生长曲线为"S"型,经成骨或成脂诱导后,茜素红染色或油红O染色呈阳性。符合国际细胞治疗学会认可的间充质干细胞标准。建立了人胎盘绒毛膜间充质干细胞的分离培养新方法,结合了组织块法和酶消化法的优点,为绒毛膜间充质干细胞的应用提供基础。; 唐书生孙逊沙吴洁莹陆琰陆琰李发涛陈劲松陈劲松; 关键词：间充质干细胞绒毛膜细胞分离细胞培养

血小板上清液对家兔生长板软骨细胞增殖的影响: 2006年; 目的:观察人血小板上清液(hum an p latelet supernatant,hPS)对体外培养幼兔生长板软骨细胞增殖与分化的影响。方法:原代分离培养兔生长板软骨细胞并稳定传代,同时添加不同体积分数的hPS,采用W ST-8染色法检测细胞增殖倍数;A lc ian B lue法测基质蛋白多糖含量;羟脯氨酸法测定软骨细胞胶原产量,酶动力学方法测定碱性磷酸酶(ALP)活性。结果:体积分数5%hPS组显著促进软骨细胞的增殖以及基质蛋白多糖的合成,但形态上失去其软骨表型。各体积分数组hPS对总胶原的合成与对照组相比差异没有显著性意义,hPS抑制了ALP的活性。结论:hPS可以有效地促进生长板软骨细胞的增殖,抑制其肥大化。; 汪卓赟宇丽李秀东李发涛吴凤麟; 关键词：生长板软骨细胞细胞增殖

医学硕士研究生生物化学实验带教的几点体会被引量：12: 2006年; 教学实践是医学硕士研究生学习阶段的一个重要组成部分，是培养和发展硕士研究生教学能力的有效手段，实验教学是教学实践的一种有效形式。为了与广大医学硕士研究生交流实验教学体会，共同提高教学能力，从而提高教学质量，现针对在生物化学实验教学中应注意的一些问题总结了一些自身体会。; 李冬艳宇丽李发涛刘红; 关键词：生物化学教学方法教学实践

一氧化氮在兔生长板软骨细胞终末分化中的生物学作用: 目的：在单层培养及离心管成团培养体系中，观察一氧化氮(nitric oxide，NO)对家兔肋软骨生长板软骨细胞终末分化的影响，探讨分析NO在生长板软骨细胞终末分化中的作用。从而为软骨内成骨的机制及骨软骨发育异常性疾病的...; 李发涛; 关键词：生长板软骨细胞一氧化氮终末分化软骨内成骨; 文献传递

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

李发涛

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

李发涛

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈