朱加明
- 作品数：30 被引量：432H指数：9
- 供职机构：复旦大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市基础研究重大（重点）项目军队“十五”重点课题资助项目更多>>
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- 葡萄糖转运蛋白1基因转染对系膜细胞功能的影响被引量：2
- 2000年
- 目的通过建立葡萄糖转运蛋白 １（ＧＬＵＴ１）的基因转染系统，观察 ＧＬＵＴ１的过度表达对系膜细胞功能的影响。方法利用逆转录病毒载体建立 ＧＬＵＴ１基因转染的大鼠系膜细胞（ＭＣＧＴ１），以β－半乳糖苷酶转染细胞（ＭＣＬａｃＺ）为对照。用２－脱氧－３Ｈ－萄萄糖（２－ＤＧ）测定细胞葡萄糖摄入，流式细胞仪分析细胞表型，３Ｈ－脯氨酸掺入和流式细胞仪分别检测细胞胶原和纤维连接蛋白（ＦＮ）的合成，逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测细胞胶原ＩＶ、ＦＮ的表达。结果ＭＣＧＴ１的２－ＤＧ摄入率明显高于ＭＣＬａｃＺ［（７４１．０±６０．５）ｄｐｍ·μｇ ｐｒｏｔ－１比（９２．２±９．０）ｄｐｍ·μｇ ｐｒｏｔ－１，Ｐ ＜０．０１］。动力学分析发现 ＭＣＧＴ１的 Ｖｍａｘ是 ＭＣＬａｃＺ的 ３ ．７倍，而两者 Ｋｍ值无明显差别。在相同的葡萄糖浓度下，ＭＣＧＴ１的乳酸生成增多，表现出细胞体积增大、ＲＮＡ／ＤＮＡ和蛋白质／ＤＮＡ比值增高等细胞肥大表型。与对照相比，ＭＣＧＴ１的胶原和ＦＮ合成与表达明显增加。结论ＧＬＵＴ１的过度表达使系膜细胞具有糖尿病肾病（ＤＮ）的细胞表型。ＧＬＵＴ１的功能状态直接影响系膜细胞的糖代谢及功能变化。
- 李颖健李颖健刘志红朱加明刘栋黎磊石
- 关键词：肾小球硬化细胞外基质基因转染
- 糖尿病肾病分子病因学及其防治的研究
- 刘志红黎磊石郭啸华朱加明李颖健杨俊伟陈朝红陈惠萍周虹王建平
- 糖尿病的发病率在中国正在逐年升高，糖尿病肾病（DN）是导致糖尿病患者死亡的一个重要原因。该课题通过对DN分子发病机理的研究，探索防治该病的新途径。发病机制的研究：①在国际上首次证实人肾小球系膜细胞上存在功能性葡萄糖转运蛋...
- 关键词：
- 关键词：糖尿病肾病病因学分子病因学疾病防治
- 宫内生理性低氧微环境对哺乳动物胚胎早期肾脏发育的影响
- 2014年
- 目的研究宫内生理性低氧微环境对哺乳动物胚胎早期肾脏发育的影响。方法采用大鼠胚胎肾脏体外培养的方法建立肾脏发育模型，应用低氧培养箱模拟胚胎发育早期宫内生理性低氧微环境，免疫荧光染色技术标记胚肾输尿管芽分枝和后肾间充质向上皮转分化过程，激光共聚焦显微镜观察胚肾发育形态学变化；原位末端转移酶标记技术（TUNEL法）检测胚-肾细胞凋亡的变化，胸腺嘧啶核苷类似物（EdU）掺人法检测胚。肾细胞增殖的变化，实时荧光定量PCR法检测胚肾发育相关基因表达的变化。结果体外培养条件下低氧（3％～5％O2）微环境显著抑制胚肾发育，输尿管芽分枝和肾小球数目均减少（P〈0．05）。低氧（5％O2）条件下胚肾细胞的凋亡程度较常氧下显著减轻，细胞增殖则受到了显著抑制（P〈0．05）。低氧增强胚肾后肾间充质Six2阳性干细胞的自我更新，上调Six2、Wt-1等发育重要相关基因的表达，下调Wnt9b和Wnt4等诱导分化相关基因的表达。结论宫内生理性低氧微环境可能通过影响哺乳动物胚肾发育相关信号通路抑制胚肾干细胞的增殖和分化，从而促进胚肾干细胞维持自我更新。
- 郭佳朱加明俞小芳焦晓燕刘少鹏蔡洁茹滕杰丁小强
- 关键词：胚胎发育
- 大黄酸对转化生长因子诱导内皮细胞纤溶酶原激活物抑制物1表达的影响被引量：33
- 2002年
- 目的 探讨大黄酸对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)mRNA表达和蛋白合成的影响,以阐明大黄酸对内皮细胞的保护作用。方法 以人脐静脉细胞系ECV-304为研究对象,Northern blot检测PAI-1 mRNA的表达,流式细胞仪法检测PAI-1蛋白的合成,免疫沉淀法和Western blot检测p44/p42丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)活性。结果 大黄酸可以快速抑制TGF-β1诱导的内皮细胞PAI-1 mRNA的表达,且呈明显的剂量依赖效应,如果作用时间延长,则对蛋白的合成同样具有明显抑制作用。进一步的研究还发现,大黄酸对TGF-β1激活的p44/p42 MAPK活性具有明显下调作用。结论 大黄酸对TGF-β1诱导的PAI-1高表达的抑制作用可能是其保护内皮细胞功能从而防治糖尿病及其血管并发症的作用机制之一。
- 刘志红朱加明黄海东陈朝红黎磊石
- 关键词：大黄酸内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂
- 小分子RNA干扰沉默缺氧诱导因子1α加重缺氧状态肾小管上皮细胞的生长抑制和坏死被引量：3
- 2010年
- 目的探讨沉默缺氧诱导因子1α（HIF—1α）对缺氧状态肾小管上皮细胞增殖、凋亡和坏死的影响。方法利用氯化钴模拟缺氧状态，并应用小分子RNA干扰（siRNA）技术沉默HIF—1α基因表达。将细胞分成5组，分别是正常培养组、缺氧培养组、转染试剂组、阴性对照组和HIF—1αsiRNA组。用MTT试验检测细胞的生长抑制率；用TUNEL法、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（aspase）-3蛋白定量法检测细胞的凋亡率；检测细胞上清液中乳酸脱氢酶（LDH）活力来测定细胞的坏死情况；用实时定量PCR法和Western印迹法检测细胞HIF—1α、HIF-2α、葡萄糖转运蛋白1（Glut-1）、血管内皮生长因子（VEGF）mRNA和蛋白表达水平。结果（1）siRNA的细胞转染效率为95％-100％。在常氧条件下，终浓度100nmol／L的HIF-1α siRNA沉默HIF-1α基因的效率为70％；在缺氧条件下，HIF—1α siRNA沉默HIF-1α基因的效率达到97％。（2）HIF-1α siRNA组细胞的生长抑制率显著高于其它组（P〈0．05）；细胞凋亡率在缺氧培养组、转染试剂组、阴性对照组和HIF—1α siRNA组4组间的差异无统计学意义（P〉0．05）；HIF—1α siRNA组细胞培养液中LDH水平显著高于缺氧培养组、转染试剂组和阴性对照组（P〈0．05）。（3）HIF—1α siRNA组细胞的HIF—1α、Glut-1、VEGF mRNA和蛋白表达量显著低于缺氧培养组、转染试剂组、阴性对照组（P〈0．05）；而HIF-2α mRNA和蛋白表达在缺氧培养组、转染试剂组、阴性对照组和HIF—1α siRNA组4组间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论siRNA沉默HIF-1α能显著抑制缺氧状态下肾小管上皮细胞Glut-1和VEGF表达，加重缺氧状态下肾小管上皮细胞的生长抑制和坏死。
- 陈越蒋素华朱加明钟一红傅辰生刘红方艺丁小强
- 关键词：缺氧诱导因子1,Α亚基缺氧肾小管上皮细胞
- 成人小脑髓母细胞瘤的临床及病理研究被引量：8
- 1998年
- 目的探讨成人小脑髓母细胞瘤的临床病理特点、组织发生学及影响预后的因素。方法对我院１９７４～１９９５年间２７例成年人（≥１６岁）小脑髓母细胞瘤进行了观察。结果本组年龄１６～５５岁，平均２５．８岁，肿瘤发生于小脑蚓部２１例，小脑半球６例。随访２１例，７例已生存２．５～１７年，１４例死亡。平均生存时间４１．６个月。１年生存率为７１．４％，５年及１０年生存率均１４．３％。组织学类型：经典型１４例，促纤维增生型１３例。结论通过电镜观察及突触素、神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白免疫组化染色观察，证实髓母细胞瘤是具有向神经元及胶质细胞双向分化潜能的原始神经外胚叶肿瘤。影响预后的因素包括年龄、肿瘤部位。
- 李南云朱加明马恒辉孙桂勤严小娟郭慧芳
- 关键词：小脑肿瘤发病年龄髓母细胞瘤病理学
- 罗格列酮对高血压大鼠的肾保护作用及其与血管紧张素Ⅱ受体表达的关系被引量：3
- 2006年
- 目的研究罗格列酮对高血压肾损伤的保护作用,及其与肾内血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)受体表达的关系。方法两肾一夹高血压大鼠随机分为：(1)高血压未治疗组；(2)普通降压组(利血平50μg·kg^(-1)·d^(-1)+二肼苯达嗪6．25 mg·kg^(-1)·d^(-1)+氢氯噻嗪6．25 mg·kg^(-1)·d^(-1))；(3)常规剂量罗格列酮组(罗格列酮5 mg·kg^(-1)·d^(-1))；(4)大剂量罗格列酮组(罗格列酮20 mg·kg^(-1)·d^(-1))。假手术大鼠作为对照。结果常规剂量罗格列酮组收缩压为(176±18)mm Hg,与高血压未治疗组(191±25)mm Hg相比,无显著差异。大剂量罗格列酮组收缩压为(143±16)mm Hg,普通降压组收缩压为(137±27)mm Hg,与高血压未治疗组相比,差异有统计学意义(P＜0．05)。在血压、血糖、血脂水平相似的情况下,大剂量罗格列酮组尿蛋白排泄率为(16．78±3．50)mg/24 h,较普通降压组(27．94±12．79)mg/24 h显著降低(P＜0．05)。未钳夹侧肾脏病理改变轻,大剂量罗格列酮组肾小球损伤指数为18．04±7．76,与普通降压组27．92±6．39相比,差异有统计学意义(P＜0．05)：大剂量罗格列酮组微动脉壁/腔比为1．75±0．38,与普通降压组2．16±0．90相比,差异有统计学意义(P＜0．05)：大剂量罗格列酮组2型血管紧张素Ⅱ受体(AT2R)mRNA表达上调。结论罗格列酮对高血压肾损伤具有保护作用,可能与其上调肾内AT2R表达有关。
- 傅辰生钟一红刘春凤朱加明丁小强
- 关键词：罗格列酮高血压受体血管紧张素肾损伤
- 血管内皮生长因子及其受体在单侧输尿管梗阻大鼠术侧肾脏的表达
- 2007年
- 血管内皮生长因子（VEGF）的主要作用是刺激血管内皮细胞的增殖与分化、抑制内皮细胞凋亡，主要通过两个受体Flk-1和Flt-1发挥作用。本研究旨在明确VEGF及其受体在单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠术侧肾脏不同时间的表达变化情况，为进一步探讨其在UUO大鼠小管间质纤维化中的作用机制提供实验依据。
- 刘春凤丁小强朱加明傅辰生钟一红
- 关键词：血管内皮生长因子单侧输尿管梗阻受体肾脏小管间质纤维化内皮细胞凋亡
- 大黄酸对葡萄糖转运蛋白1基因转染系膜细胞功能的影响被引量：44
- 2001年
- 目的 通过观察大黄酸对葡萄糖转运蛋白 1(GLUT 1)基因转染系膜细胞 (MCGT 1)功能的影响 ,探讨大黄酸治疗糖尿病肾病 (DN)的作用机制。方法 利用逆转录病毒载体建立GLUT 1基因转染的大鼠系膜细胞 ,以 β 半乳糖苷酶转染细胞 (MCLacZ)为对照。用 2 脱氧 3 H 葡萄糖 (2 DG)测定细胞葡萄糖摄入 ,流式细胞仪分析细胞表型 ,3 H 脯氨酸掺入和流式细胞仪分别检测细胞胶原和纤维连接蛋白 (FN)的合成 ,采用比色法测定谷氨酰胺 :6 磷酸果糖转氨酶 (GFAT)的活性 ,RT PCR检测细胞胶原Ⅳ、FN和GFAT的表达。结果 MCGT 1的 2 DG摄入率明显高于MCLacZ[(741± 6 0 5 )dpm·μgprot 1比 (92 2± 9)dpm·μgprot-1],同时表现出细胞大小、RNA/DNA和蛋白 /DNA明显增加的细胞肥大表型 ,细胞外基质合成增加 ,MCGT 1的3 H 脯氨酸掺入量明显高于MCLacZ[(7 0± 0 4)dpm·cell 1比 (4 6± 0 6 )dpm·cell 1],GFAT活性明显增强 (约增加 1 8倍 )。大黄酸能够减少MCGT 1的糖摄取 [(5 6 0± 6 4)dpm·μgprot 1比 (741± 6 0 5 )dpm·μgprot 1) ,纠正MCGT 1的肥大状态 ,并抑制MCGT 1细胞外基质的合成和表达 ,降低MCGT 1的GFAT活性。结论 GLUT 1的过度表达会明显改变系膜细胞的功能 ,大黄酸能逆转GLUT 1基因转染所致系膜?
- 朱加明刘志红李颖健刘栋郭啸华黎磊石
- 关键词：载体蛋白质类细胞外基质系膜细胞大黄酸葡萄糖转运蛋白1基因转染
- 大黄酸防治糖尿病肾病的机制研究
- 该研究在糖代谢途径调控、纠正内皮细胞功能紊乱及对自发肥胖胖性2型糖尿病模型db/db小鼠的肾病疗效方面探讨了大黄酸防治糖尿病肾病的可能作用机制.该研究由三部分组成：研究一,大黄酸对葡萄糖转运蛋白1基因转染系膜细胞中己糖胺...
- 朱加明
- 关键词：大黄酸系膜细胞内皮细胞胰岛素抵抗
- 文献传递
