曾庆飞
- 作品数：23 被引量：65H指数：6
- 供职机构：贵州省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技支撑计划博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 根结线虫拮抗放线菌菌株DA07118的筛选与鉴定及其发酵条件的优化被引量：10
- 2009年
- 从海南东寨港红树林、尖峰岭等原始森林及黄流地区发病蕉园采集土壤样品,分离得到215株放线菌菌株。以根结线虫为靶标线虫对215株放线菌进行筛选,获得18株对根结线虫校正死亡率在80%以上的菌株。菌株DA07118抗线虫活性最强,校正死亡率达100%;经5次继代培养,仍具有稳定产生杀线虫活性物质的能力。通过形态学、生理生化反应和16S rDAN分类鉴定,将该菌株归类为链霉菌属Streptomyces。进一步的发酵条件优化试验,确定该菌株产活性物质的最佳培养基配方为(g/L):麦芽糖10g、蔗糖25g、酵母膏20g、蛋白胨20g、K_2HPO_4 0.5g,初始pH7.0。发酵优化后,菌株发酵液的10倍稀释液处理后24h对根结线虫的校正击倒率从优化前的75.0%提高到93.7%。
- 曾庆飞李传浩黄惠琴方哲鲍时翔
- 关键词：根结线虫放线菌菌株鉴定发酵条件优化
- 一种植物根结线虫人工培养及繁殖保存的方法
- 本发明涉及一种植物根结线虫人工培养繁殖和种类保存的方法。实验室根结线虫的繁殖与保存一直依赖于寄主植物，本发明将根结线虫卵粒或二龄幼虫以较少数量接入特定的二重培养基而不是寄主根系，恒温密闭状态下倒置培养，根结线虫在培养基内...
- 鲍时翔曾庆飞方哲黄惠琴朱军吴晓鹏孙前光
- 文献传递
- 巴哈雀稗PnDREB2基因克隆及时序表达图谱构建被引量：1
- 2019年
- 脱水反应元件结合蛋白(DREBs)在植物非生物逆境胁迫中可调节下游一系列抗逆基因的表达。为探究巴哈雀稗DREB2基因在逆境胁迫下的功能,本研究采用RNA-Seq结合RT-PCR技术从巴哈雀稗中获得一个DREB2基因CDS区全序列,命名为PnDREB2(GenBank登录号:MH150946)。核苷酸序列分析表明,该基因开放阅读框全长774 bp,编码257个氨基酸,相对分子质量为28.09 kD,理论等电点为5.25;该植物蛋白中具有DREB类基因家族典型的保守域AP2结构域,属于DREB2类转录因子A类中A2亚类的亚型1。进化和聚类分析结果表明,巴哈雀稗PnDREB2基因与高粱、割手密、玉米、谷子及牛鞭草亲缘关系较近,氨基酸序列同源性分别为91.10%、89.50%、88.20%、87.60%和87.60%。RT-qPCR和生物信息学分析表明,PnDREB2基因在茎中表达量最高,幼穗次之,叶最低;表达产物定位于细胞质中,具有26个磷酸化位点,并具有结构和功能的特异性。PnDREB2表达量受干旱(PEG-6000,20%)和高温(40℃)的强烈诱导,同时也受到高盐(NaCl,300 mmol·L^(-1))、低温(4℃)、脱落酸(ABA,100μmol·L^(-1))和赤霉素(GA,100μmol·L^(-1))等非生物胁迫和激素的不同程度诱导,随着处理时间的延长,整体上均呈先增加后降低的趋势。本试验为巴哈雀稗抗逆分子机理研究与抗性增强的转基因材料培育奠定了理论基础。
- 张宇君王普昶王普昶赵丽丽曾庆飞陈超陈超
- 关键词：非生物胁迫RNA-SEQRT-QPCR
- 贵州岩溶山区野生天蓝苜蓿根瘤菌资源发掘、固氮特性及其多样性研究被引量：3
- 2022年
- 天蓝苜蓿(Medicago lupulina)是一种广为分布的优良野生豆科饲草植物。为了发掘贵州岩溶山区天蓝苜蓿特定的根瘤菌资源,筛选获得固氮促生能力强、寄主识别范围广的高效抗逆天蓝苜蓿根瘤菌,从贵州省19个县(市)4个不同生态功能区采集天蓝苜蓿根瘤样品,经分离、纯化、菌体形态观察、16S rRNA基因序列比对分析,获得69个根瘤菌保存菌株。区系分析结果表明,分离菌株分属6属25种,其中中华根瘤菌属(Sinorhizobium)的分布频率高达55.71%,为优势属,草木樨中华根瘤菌(S.meliloti)分布频率达到38.51%,为优势种。选择来自不同地域、不同种类的天蓝苜蓿根瘤菌28株,采用百脉根盆栽回接方法,结合菌株固氮酶活性的测定,筛选出优良促生固氮根瘤菌9株,其中5个菌株的酶活力及植物促生效果与另外4株的差异均达显著(P<0.05)或极显著水平(P<0.01),为最优促生根瘤菌。本研究结果可为区域草业发展及生态环境建设提供共生微生物资源。
- 曾庆飞韦兴迪韦鑫欧二绫吉玉玉舒健虹龙忠富
- 关键词：天蓝苜蓿根瘤菌区系分析菌株筛选
- 根结线虫拮抗放线菌的筛选及菌株HA10002的鉴定与活性物质分析被引量：12
- 2011年
- 为了筛选获得对根结线虫具有拮抗能力的强活性放线菌菌株,并从菌株中发现新的杀线虫活性化合物,从海南东寨港红树林采集海泥样品9份,从五指山原始森林等地采集土壤样品51份,用平板稀释法对海泥和土壤样品进行分离;以南方根结线虫2龄幼虫为靶标线虫,采用24孔细胞培养板液体线虫法进行初筛和复筛;根据形态特征、培养特征、生理生化特征和16SrDNA序列对复筛出的活性菌株进行鉴定;菌株发酵液经溶媒萃取、硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶过滤和制备薄层板层析,采用活性跟踪法从中分离纯化杀线虫活性化合物;化合物经光谱及波谱分析和文献对照,进行结构鉴定。从60份样品中分离得到356株菌落形态有差异的放线菌。初筛得到16株对根结线虫校正死亡率在80%以上的菌株,复筛获得3株线虫校正死亡率在95%以上的菌株,其中分离自海泥样品中的菌株HA10002抗线虫活性最强,发酵原液的校正死亡率达100%。HA10002经鉴定为白浅灰链霉菌,从其发酵液中分离获得2个活性化合物,其中A26-3为Nocardamine,A22-1的结构正在进一步鉴定中。上述结果表明,筛选出的放线菌HA10002能合成2种以上杀根结线虫的活性代谢产物,是一株遗传稳定且具有开发潜力的活性菌株。
- 曾庆飞黄惠琴朱军鲍时翔
- 关键词：根结线虫拮抗放线菌菌株鉴定
- 贵州部分地区野生白三叶根瘤菌资源调查与区系分析被引量：6
- 2018年
- 通过对贵州省黔中、黔东北、黔南、黔西南、黔北地区野生白三叶草根瘤菌的资源调查,共采集到根瘤样品73份。采集的根瘤绝大部分着生在侧根和须根上,少数着生于主根;根瘤形状多以掌状、柱状和球形为主,并有少量的扇形和花瓣形,更有个别的呈花朵形;根瘤颜色多以白-粉-绿3色相间排列和粉-绿2色相间排列为主,兼有其他颜色的相间排列;根瘤大小(直径)平均在0.5~3.0mm,说明白三叶草根瘤的形态特征具有丰富多态性,而且与所处的地理生态环境存在着密切的关系。对采集到的73份根瘤样品进行根瘤菌株的分离、纯化和革兰氏染色鉴定,获得107份保存菌株。16S r DNA序列比对及区系分析结果表明,在分离的全部根瘤菌株中,共鉴定出6个属20个种,其中Rhizobium的分布频率高达81.31%,是所调查地区的绝对优势属;另外5个属的分布频率分别为Burkholderiales 5.61%、Agrobacterium 5.61%、Pseudomonas 4.67%、Herbaspirillum 1.87%和Sinorhizobium 0.93%。在优势属Rhizobium中,R.leguminosarum的出现频率最高(38.32%),其次是R.anhuiense(24.30%)和R.laguerreae(9.34%),而在6个属的其余种类中,出现频率都只在0.93%~4.67%。本调查结果为根瘤菌在区域农牧业生产及生态环境建设中的应用提供种质资源。
- 韦兴迪曾庆飞谭玉兰韦鑫李亚娇陈超
- 关键词：根瘤菌资源调查区系分析
- 过表达FaSAMDC基因提高黑麦草属植物的抗旱性和耐热性被引量：4
- 2017年
- 主要探讨了在黑麦草属植物中导入高羊茅S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因(FaSAMDC)对转基因植株抗旱耐热性的提高效果,为培育黑麦草抗旱耐热新品种提供种质新材料。选择黑麦草成熟种子为外植体,采用贵州省草业研究所分子生物学实验室构建的过表达载体以及黑麦草胚性愈伤组织高频植株再生和农杆菌介导的遗传转化体系,将克隆自高羊茅的FaSAMDC基因转入贵州地区主栽品种多花黑麦草特高和多年生黑麦草四季的基因组内,经抗性筛选、PCR检测和Southern杂交分析验证,获得45株特高与44株四季的转基因植株,转化频率分别为2.93%和2.28%。抗旱耐热试验表明,在30℃高温和中度干旱胁迫条件下,特高转基因株系的根冠比比对照组培苗高出7.08%,叶片相对含水量(RWC)比对照高出13.12%,RWC降低幅度比对照少5.49个百分点;四季转基因株系的根冠比比对照组培苗高出6.54%,RWC比对照高出12.54%,RWC降低幅度比对照少6.50个百分点,差异均达到显著水平(P<0.05),证明转入FaSAMDC基因的黑麦草阳性株系的抗旱耐热能力得到了明显提高。形态与生长特征观测结果显示,与非转基因组培苗相比,转基因株系的叶长、株高、主茎节数减小,叶宽、单株分蘖数增加,叶色变深,植株形状趋向于叶片丛生的紧凑型,推测导入的FaSAMDC基因参与了基因表达、细胞分裂等生理功能的调节。
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- 关键词：黑麦草根癌农杆菌
- 贵州岩溶山区多花木蓝根瘤菌及高效菌株筛选被引量：2
- 2021年
- 为了筛选获得寄主识别范围广、结瘤固氮能力强的抗逆高效多花木蓝(Indigofera amblyantha)根瘤菌资源,本研究从贵州省22个县(市)5个不同生态功能区采集多花木蓝根瘤样品,经分离、纯化根瘤菌株,观察菌体形态结构,结合16S rRNA基因序列分析比对结果后,选择来自不同地域、不同种类的多花木蓝根瘤菌,采用盆栽回接方法,结合菌株固氮酶活性的测定,筛选结瘤固氮能力强、植物促生效果好的优良根瘤菌株。结果发现:共分离纯化获得33个根瘤菌株,经鉴定分属6属22种。筛选出优良促生固氮根瘤菌6株,其中分离自罗甸县沫阳镇多花木蓝根瘤样品的菌株LMIR32-1为最优促生根瘤菌,其固氮酶活性高达263.05 IU·L^(-1),酶活力及植物促生效果与另外5个优良菌株的差异均达显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)水平。本研究结果为豆科牧草共生体系在本地区农牧业生产及生态环境建设中的综合应用提供了理论基础。
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- 关键词：多花木蓝根瘤菌区系分析菌株筛选
- 抗线虫海洋放线菌的筛选与鉴定
- 本研究从海南、湛江等近海海域采集海草泥、红树林沉积物、海绵等21份样品，分离得到256株菌落形态有差异的放线菌。运用线虫液筛选模型对256株微生物进行筛选，获得23株具有抗根结线虫活性的菌株。菌株HA07011抗线虫活性...
- 曾庆飞方哲雷敬超黄惠琴鲍时翔
- 关键词：海洋放线菌菌株鉴定杀虫活性
- 文献传递
- 抗根结线虫海洋放线菌菌株的分离筛选及菌株HA07011的分类鉴定
- 从海南、湛江等近海海域采集海草泥、红树林沉积物、海绵等21份样品,分离得到256株菌落形态有差异的放线菌。运用抗线虫组合筛选模型对256株微生物进行筛选,获得23株具有抗根结线虫活性的菌株。菌株HA070l1抗线虫效果最...
- 曾庆飞雷敬超黄惠琴鲍时翔
- 文献传递
