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张鹏飞
作品数:
14
被引量:27
H指数:3
供职机构:
北京生物制品研究所
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相关领域:
医药卫生
生物学
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合作作者
项金忠
卫生部北京生物制品研究所
谢云
卫生部北京生物制品研究所
傅大卫
卫生部北京生物制品研究所
尚继军
卫生部北京生物制品研究所
董明
卫生部北京生物制品研究所
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作者
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张鹏飞
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项金忠
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傅大卫
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尚继军
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韩峰
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中国病毒学
年份
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2003
1篇
2001
1篇
1999
2篇
1998
4篇
1997
4篇
1996
1篇
1995
共
14
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被引量排序
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百日咳毒素亚基基因的克隆与表达及其重组亚基的免疫学特性
被引量:1
1998年
目的从百日咳包特杆菌CS株中克隆百日咳毒素(PT)及其各亚基的基因,并探讨在昆虫细胞中表达百日咳毒素亚基基因片段的可能性及表达产物的生物学特性。方法采用PCR技术进行克隆,并通过限制性内切酶和Southernblot进行分析鉴定。利用重组杆状病毒技术,在昆虫细胞Sf9中表达各亚基基因,并通过免疫荧光实验进行分析鉴定,通过ELISA实验进行重组蛋白的免疫学特性评价。结果获得百日咳毒素及其各亚基的基因,并在昆虫细胞中表达了重组亚基。经体外聚合后的各重组亚基混合物与抗天然完整PT免疫血清的反应性和诱生特异性抗PT抗体的能力都明显高于各重组亚基单体混合物,含有S1重组亚基混合物诱生特异性抗PT抗体水平又明显高于不含S1重组亚基混合物的水平。说明百日咳毒素亚基单体仅具有很弱的诱生特异性抗PT抗体的能力,且抗完整PT的抗血清对百日咳毒素亚基单体也缺乏很好的识别作用。结论百日咳毒素诱导产生特异性抗体的能力依赖于聚合体的空间构型,而且其主要抗原决定簇位于聚合体的S1亚基上。
韩峰
刘德铮
肖詹蓉
项金忠
张鹏飞
关键词:
百日咳
百日咳毒素
疫苗
HIV-1核蛋白p24在昆虫细胞中的表达
被引量:2
1997年
将完整的HIV-1p24基因克隆到杆状病毒转移质粒中。使用重组转移质粒与野生型杆状病毒(AcNPV)DNA共转染Sf9昆虫细胞,经筛选获得带有编码p24基因的重组杆状病毒。重组杆状病毒感染Sf9细胞后在细胞中表达了HIV核蛋白p24。其重组蛋白的分子量为24kD。此重组糖蛋白在免疫荧光,免疫印染和酶联免疫实验中都能被人HIV-1阳性血清和单克隆抗体所识别。
谢云
董明
张鹏飞
关键词:
核蛋白
昆虫细胞
麻疹病毒血凝素和融合蛋白基因的克隆与表达及其重组蛋白的免疫学评价
1997年
采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)的方法从麻疹病毒Edmonston株基因组中扩增出血凝素H基因和融合蛋白F基因,并利用转移质粒将这两个基因分别重组到杆状病毒多角体蛋白启动子(PH)控制之下,获得重组病毒vBMVH和vBMVF。重组杆状病毒感染Sf9昆虫细胞,表达的重组蛋白分别具有血凝、血溶活性。红细胞吸附抑制试验、免疫印迹、酶联免疫试验结果显示重组蛋白在生物学、生化学特性与天然蛋白类似,并能被天然麻疹免疫血清(人、鼠、兔)所识别。动物实验表明,重组蛋白具有诱生中和抗体的能力。重组血凝素免疫血清还具有血凝抑制抗体活性。这些结果说明杆状病毒-昆虫细胞体系表达的麻疹病毒血凝素和融合蛋白具有较好的生物学活性及免疫原性和抗原性。
唐凌云
张鹏飞
章以浩
关键词:
麻疹病毒
融合蛋白
血凝素
杆状病毒
基因表达
HCV核心蛋白在昆虫细胞中的表达及其免疫学特性的初步评价
1996年
通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从丙肝患者的血清中分离出编码完整HCV核心蛋白(C区)的cDNA片段,并将其克隆到杆状病毒转移质粒中。重组转移质粒DNA与线性的杆状病毒DNA共转染Sf9昆虫细胞,经蚀斑筛选获得了带编码全部核心蛋白基因的重组杆状病毒。重组病毒感染细胞后表达HCV核心蛋白,其分子量的为20kD。免疫印染和酶联免疫实验表明,此重组蛋白能被人HCV阳性血清所识别。动物实验表明此重组蛋白能诱导小鼠产生特异性抗体。
项金忠
郭亮
张鹏飞
关键词:
丙型肝炎病毒
核心蛋白
昆虫细胞
免疫学特性
用重组杆状病毒表达甲型肝炎病毒外壳蛋白
被引量:1
1999年
应用分子生物学技术 ,将编码甲型肝炎病毒 (HAV )外壳蛋白的开放读码框架 (ORF)全序列插入杆状病毒多角体启动子下游 ,构建成重组杆状病毒 (r BHAV ) ,并在昆虫细胞 SF9中表达。实验证明 ,在该重组杆状病毒中含有完整的 HAV编码序列 (HAV ORF) ;表达的重组蛋白具有良好的抗原性和免疫原性 ;电镜检查被 r BHAV感染的 SF9细胞中有与甲肝病毒颗粒类似的球形结构 ;经氯化铯梯度离心测得该重组蛋白的浮力密度与 HAV空壳一样。
刘小琳
张鹏飞
关键词:
甲型肝炎病毒
外壳蛋白
杆状病毒
用鳞翅目粘虫卵巢细胞制备流行性乙脑疫苗的方法及疫苗
本发明涉及一种制备流行性乙脑疫苗的方法,它包括在培养基中静止或悬浮培养鳞翅目粘虫(Spodoptera frugiperda)的卵巢细胞,将该细胞感染乙脑病毒继续培养得培养悬液,可部分补充培养液连续培养,得到的病毒灭活或...
张鹏飞
傅大卫
文献传递
乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白基因在昆虫细胞中的表达及其初步鉴定
被引量:8
1997年
从乙肝阳性人血清中克隆HBV含前s区表面抗原基因(PreSZ+S),将其插入到杆状病毒转移质粒PVL1393中,并与昆虫病毒ACNPVDNA共转染Sf9昆虫细胞,筛选出重组病毒。用乙肝放免(RIA)试剂盒及EIAPreS2-Ag检测试剂盒检测重组病毒感染的Sf9细胞,表明细胞中有HBsAg及PreS2-Ag存在。将重组病毒感染的细胞免疫小鼠,在小鼠血清中能检测到anti-HBsAg及anti-PreS2抗体。
尚继军
项金忠
谢云
张国强
冯素英
张鹏飞
关键词:
乙型肝炎病毒
表面抗原
昆虫细胞
蛋白基因
HIV 外膜糖蛋白 gp120 和 gp41 在昆虫细胞中表达及其免疫学特性的评价
被引量:2
1997年
将编码完整gp120和完整gp41的基因分别克隆到杆状病毒转移质粒中。使用重组转移质粒与野生杆状病毒(AcNPV)DNA共转染Sf9昆虫细胞,经挑选获得分别带有编码gp120和gp41基因的重组杆状病毒。重组杆状病毒感染Sf9细胞后在细胞中分别表达了HIV外膜糖蛋白gp120和gp41。其重组蛋白的分子量分别为120×103和41×103。此重组糖蛋白在免疫荧光、免疫印染和酶联免疫实验中都能被HIV阳性血清所识别。动物免疫实验表明此重组糖蛋白能诱导很强的特异性抗体产生。
董明
谢云
项金忠
尚继军
张鹏飞
关键词:
昆虫细胞
艾滋病病毒
免疫性
百日咳毒素的分子生物学研究进展
1996年
韩峰
刘德铮
张鹏飞
关键词:
疫苗
分子生物学
Sf9昆虫细胞作为流行性乙型脑炎疫苗生产用细胞基质的研究
被引量:4
1996年
对Sf9细胞作为制备乙脑疫苗生产用细胞基质的可能性进行了探讨。用抗胸腺细胞血清处理过的新生小白鼠,检查证明Sf9昆虫细胞无致肿瘤原性。将在有血清培养液中乙型脑炎病毒(JEV)P3株持续感染的Sf9细胞,逐步适应到无血清培养液中,此感染细胞持续感染的特性不变。以悬浮培养的方式,无论在有或无血清培养液中培养感染P3株病毒的Sf9细胞,其病变细胞数目比例较静止培养均明显增多,病毒滴度形成高峰时间缩短。将感染的Sf9细胞,经液氮保存后复苏可连续传代,其感染特性未改变。用有血清培养液培养感染细胞第6、11、26周和无血清培养液培养的感染细胞上清制备实验性JEV疫苗,动物实验证明其效力均能达到疫苗生产规程的要求。Sf9细胞有望成为大规模悬浮培养制备JEV疫苗的细胞基质。
傅大卫
张鹏飞
关键词:
流行性乙型脑炎
SF9细胞
疫苗
细胞基质
全选
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