张铸业
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：贵州大学生命科学学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种简单的慢病毒载体介导的同时沉默双基因的方法被引量：1
- 2010年
- 目的建立一种简单的慢病毒载体介导的同时沉默双基因的方法。方法该研究在慢病毒载体的3'LTR区同时插入沉默两个基因p18和MAD1的shRNA(Small hairpin RNA),通过包装细胞293T和包装质粒包装成假病毒颗粒,感染NIH/3T3细胞。其沉默基因的效果用Western blotting来检测。结果载体构建成功,被感染的NIH3T3细胞中,p18和MAD1基因的蛋白表达被显著抑制。结论该载体构建方法操作简单,无需PCR,及多次连接反应,且可达到两种基因同时被稳定、高效沉默的目的,为相关研究提供了方便。
- 左雨娜焦德敏于慧慧张铸业李宙阳袁军刘爱和王彦刈
- 关键词：SHRNA慢病毒载体
- 磷酸钙法将MMP-2,MMP-3双基因干扰载体转入HEK293T细胞的效率观察被引量：2
- 2009年
- 检测用磷酸钙法能否将修饰后用于沉默MMP-2,MMP-3基因的慢病毒载体有效地转入到HEK293T细胞。利用磷酸钙法,MMP-2,MMP-3双基因干扰载体(MMP组)与对照质粒(对照组)被分别转染HEK293T细胞,在转染后的第24,48及72 h,通过计算绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞数的百分比来判断转染效率。转染24 h后,两组细胞均生长状况良好,荧光显微镜下观察,已有大量绿色荧光出现,计算MMP组转染效率为(91.5±6.2)%,对照组转染效率为(80.3±4.7)%;转染后48-72 h,两组感染效率均未见明显下降。与对照相比,插入了MMP-2,MMP-3shRNA模板序列的慢病毒载体没有降低磷酸钙法转染HEK293T细胞效率,反而有所增高。
- 焦德敏于慧慧张铸业李宙阳刘爱和王彦刈
- PG肿瘤分泌物对PBMC活性及细胞因子分泌的影响
- 2012年
- 目的应用PG肿瘤细胞分泌的上清液培养正常外周血单个核细胞(PBMC),探讨PG肿瘤细胞分泌物对正常PBMC的活性及分泌细胞因子的影响,以进一步揭示肿瘤的免疫逃逸机制。方法将不同浓度的肿瘤细胞培养上清液与体外分离的PBMC一起培养,用MTT法检测细胞代谢活性,流式细胞术检测细胞内细胞因子分泌的变化情况。结果 PG培养上清能够提高PBMC活性,并使Th1、Th2类细胞因子表达增加。结论肿瘤上清确实能使PBMC活化,同时激活PBMC细胞分泌细胞因子。
- 张铸业卢忠英高国丽王彦刈
- 关键词：PBMC细胞因子
- 基于造血干细胞为靶细胞的基因治疗被引量：1
- 2011年
- 在基因治疗中,造血干细胞因为具有自我更新及分化为各种血细胞系的能力而成为一种很有吸引力的靶细胞。将外源目的基因导入造血干细胞,以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,特别是血液疾病已取得重要进展,例如:腺苷脱氨酶缺陷病、血友病、地中海贫血症及镰状细胞性贫血症等。而慢病毒以其转染效率高,能够感染非分裂期细胞的特点成为转染造血干细胞的最适合载体,本文就造血干细胞的特性、载体的选择及临床应用和基因治疗的安全性等方面作一综述。
- 张铸业于慧慧王彦刈
- 关键词：造血干细胞基因治疗慢病毒载体
- 人肺癌PG细胞培养上清液对PBMC凋亡的影响
- 2012年
- 目的:探讨PG肿瘤上清对外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)的增殖抑制及诱导凋亡方面的影响,并探讨了PG细胞影响PBMC凋亡的作用机制。方法:在PBMC培养体系中分别加入不同条件的PG培养上清。在24、72小时收集PBMC,采用流式细胞术测定其对PBMC细胞周期、凋亡率的影响,另外,通过免疫印迹法、流式细胞术分别测定了Bcl-2、Fas蛋白表达的情况来观察PBMC凋亡相关蛋白的变化。结果:PG肿瘤上清没有抑制PBMC进入细胞周期,在PG上清的作用下,PBMC凋亡率显著增加,并且发现PG上清能够调节PBMC内凋亡相关蛋白Bcl-2、Fas的表达量。结论:PG上清能够调节PBMC凋亡相关蛋白量,进而诱导PBMC凋亡,这可能是导致肿瘤微环境中PBMC数量低下的主要原因。
- 张铸业王彦刈高国丽卢忠英
- 关键词：PBMC免疫逃逸
