张玉宝
- 作品数：13 被引量：66H指数：5
- 供职机构：哈尔滨医科大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划黑龙江省“十五”科技攻关项目哈尔滨市青年科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰技术沉默Stat3基因对胃癌细胞SGC7901生物学行为影响的实验研究被引量：7
- 2008年
- 目的:构建Stat3-siRNA表达载体,探讨转染Stat3-siRNA表达载体阻断人胃癌细胞系SGC7901的Stat3信号传导通路对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用RNAi技术,构建Stat3-siRNA表达载体,稳定转染胃癌细胞系SGC7901,利用Real-time PCR、Western Blot、MTT、流式细胞技术等方法分别检测Stat3基因mRNA和蛋白表达及细胞增殖和凋亡的变化情况。结果:成功构建Stat3-siRNA表达载体,经测序验证无误。Western Blot及Real-time PCR结果显示:Stat3基因的表达水平均下降,其中以SGC7901-siRNA3干扰效果最明显,差异具有显著性(P<0.05)。MTT法结果显示:稳定转染SGC7901细胞后,细胞的增殖能力明显下降,与对照组相比差别显著(P<0.05)。流式细胞技术显示:Stat3-siRNA3实验组较对照组出现了明显的细胞凋亡,在G1期前出现的亚二倍峰即为凋亡峰。结论:Stat3基因的RNAi重组体可以有效的抑制Stat3基因的表达,RNA干扰技术沉默Stat3基因能够抑制胃癌细胞的生长,促进其凋亡。
- 赵亮赵家宏孙凌宇于旸刘锋张岂凡张玉宝董新舒傅松滨崔滨滨
- 关键词：STAT3RNA干扰
- 铜绿假单胞菌注射液对肝癌瘤株细胞体外杀伤作用的研究被引量：2
- 2013年
- 目的:研究铜绿假单胞菌注射液(PA-MSHA vaccine PA)对肝癌瘤株细胞的体外杀伤作用,并观察其对肝癌瘤株细胞的体外增殖影响及杀伤作用的剂量依赖性。方法:采用MTT比色法观察不同剂量PA对肝癌瘤株细胞生长抑制作用和杀伤作用的影响;扫描电镜观察PA与肝癌瘤株细胞的结合过程及肝癌瘤株细胞的凋亡过程;双染色流式细胞术观察不同剂量铜绿假单胞菌注射液对肝癌瘤株细胞的凋亡影响。结果:PA能结合肝癌瘤株并进入细胞内部,诱导细胞凋亡,从而抑制肝癌瘤株细胞增殖和生长,产生杀伤作用,且杀伤作用随着用药浓度增加而加强。结论:铜绿假单胞菌注射液有直接杀伤肝癌瘤株细胞的作用,且这种作用存在剂量依赖性。
- 孙建民包丽颖张玉宝
- 关键词：铜绿假单胞菌注射液凋亡
- 腺病毒载体介导的早幼粒细胞白血病基因生长抑制因子诱导胃癌细胞凋亡的机制研究
- 2006年
- 目的探讨腺病毒载体介导的早幼粒细胞白血病基因(PML)生长抑制因子诱导胃癌细胞凋亡作用的机制。方法将人PML全长cDNA插入穿梭质粒pSGCMV,再与腺病毒骨架质粒pPE3共转染293细胞后获得重组病毒。用重组病毒感染胃癌细胞系SGC-7901,采用噻唑蓝比色法、流式细胞术以及免疫细胞化学法对p53和bcl-2在肿瘤细胞内的表达以及细胞凋亡的定性与定量指标进行检测。结果经腺病毒介导的PML处理的SGC-7901细胞生长受到明显抑制,凋亡细胞发生率升高,且与MOI值呈正相关,MOI值由5增加到20,细胞的生长抑制率从22．4％增加到38．5％,而细胞凋亡率从37．2％增加到49．8％。经腺病毒介导的PML处理的SGC-7901细胞内p53蛋白表达较对照组明显增加,bcl-2蛋白的表达则无明显变化。结论腺病毒介导的PML对胃癌细胞的杀伤主要是通过诱导细胞凋亡,p53蛋白高表达为其诱发胃癌细胞凋亡的机制之一。
- 吴志民张岂凡薛英威庞达张玉宝
- 关键词：胃肿瘤基因表达细胞凋亡
- 薤白挥发油诱导人胃癌细胞的凋亡被引量：13
- 2006年
- 目的:分析中药薤白挥发油对人胃癌细胞的诱导凋亡作用及其途径,为胃癌患者康复期的中药辅助治疗提供理论依据。方法:实验于2005-04/08在哈尔滨医科大学微生物教研室病毒实验室完成。①胃癌细胞SGC-7901的生长抑制实验:将对数生长期的胃癌细胞以每孔5×104加入培养板中,每孔体积100μL,4个实验孔加入不同浓度穴依次为50,100,200,400mg/L雪的薤白挥发油(由薤白的干燥鳞茎提取),以二甲基亚砜作为阴性对照。采用噻唑蓝比色法检测吸光度,细胞生长抑制率=穴1-实验组吸光度雪/对照组吸光度×100%。应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。②免疫细胞化学法检测p53,bcl-2蛋白表达:将对数生长的胃癌细胞SGC-7901以每孔2×105加入培养板,加入薤白挥发油(200mg/L);在对照孔中加入等量的细胞培养液。应用免疫细胞化学法进行细胞凋亡的定性与定量指标测定。结果评估:p53免疫反应定位于细胞核,bcl-2免疫反应定位于胞质和胞膜,细胞染色呈棕褐色或棕黄色为阳性,连续观察5个高倍视野,计算阳性细胞百分率。结果:①薤白挥发油50,100,200,400mg/L组SGC-7901细胞的生长抑制率分别为15.02%,32.33%,60.17%和93.41%;细胞凋亡率分别为10.03%,21.33%,47.65%和88.78%,均显著高于对照组(F=5.93,5.84,P<0.05)。②薤白挥发油组SGC-7901细胞中p53蛋白的阳性率显著高于对照组眼(56.06±7.31)%,(10.23±5.19)%(F=5.63,P<0.05)演。但两组bcl-2蛋白表达差异无显著性意义(P>0.05)。结论:薤白挥发油对人胃癌细胞的杀伤作用主要是通过诱导细胞凋亡来实现,且这种凋亡作用呈剂量依赖性,提升p53蛋白表达可能是诱发胃癌细胞凋亡的作用途径之一。
- 吴志民张岂凡薛英威庞达张玉宝
- 关键词：胃肿瘤薤白油类挥发
- 肝癌早期筛查肿瘤标记物研究进展被引量：3
- 2013年
- 肝癌的早期筛查和术后复发的监测仍是临床工作中的难点，虽然已经有甲胎蛋白、CA19—9、AFU、GGT、人端粒酶反转录酶mRNA、热休克蛋白等肿瘤标记物在临床上广泛应用，但是每种肿瘤标记物都存在一定弊端，特异性不强，往往需要联合检测才能提高诊断的准确性。糖生物学中的异常糖基化被认为与肿瘤的发生发展有密切关系，因此研究异常糖基化成为近年来的研究热点。N-糖链是异常糖基化的一种，检测特异性的N-糖链有望成为筛查及监测肝癌患者变化的动态指标。
- 孙建民张玉宝
- 关键词：肿瘤标记物肝癌N-糖链
- 180例乳头溢液的外科治疗
- 目的:总结分析乳头溢液的外科治疗经验和方法,为临床更合理的治疗提供科学依据。方法:回顾分析1986年互1999年间,我院外科住院手术治疗180例乳头溢液病例．结果:（1）在非哺乳期间发生乳头溢液多数病理行溢液,常见病有导...
- 张玉宝李栗吴志民王宽张殿忠范国华张立清
- 关键词：乳头溢液外科治疗
- 文献传递
- 铜绿假单胞菌注射液诱导人胰腺癌细胞PANC-1的凋亡
- 2013年
- 目的观察铜绿假单胞菌注射液对体外培养的PANC-1细胞生长抑制及凋亡的影响。方法体外培养人胰腺癌细胞PANC-1,采用MTT法检测不同浓度PA-MSHA(铜绿假单胞菌)对PANC-1细胞的抑制情况,透射电子显微镜观察药物作用后细胞超微结构变化,TUNEL法观察细胞凋亡,采用流式细胞术检测PA-MSHA与对照组(药物浓度为0)的细胞凋亡率,Westen blot检测促凋亡蛋白caspase-3,caspase-7,caspase-8,caspase-9,PARP的表达。结果 MTT观察到不同浓度PA-MSHA(10×108/ml,5×108/ml,2.5×108/ml,1.25×108/ml,0.625×108/ml)分别作用24、48、72 h后和对照组相比(P=0.006)可使PANC-1细胞生长明显抑制,抑制率呈浓度、时间依赖关系;电子显微镜下PA-MSHA作用后形成凋亡小体,细胞内空泡形成;TUNEL法观察细胞核深染,细胞发生早期凋亡。流式细胞术观察PA-MSHA处理组(2.5×108/ml)与对照组分别作用48 h后处理组的细胞凋亡率明显增高,PA-MSHA作用24 h后和对照组相比,随药物浓度增高,凋亡相关蛋白caspase-3,caspase-7,caspase-8,caspase-9,PARP表达随之增强。结论 PA-MSHA可诱导人胰腺癌细胞PANC-1细胞凋亡进而抑制肿瘤生长。
- 包丽颖孙建民张玉宝
- 关键词：胰腺癌凋亡PANC-1铜绿假单胞菌
- 胃癌壁内浸润的临床病理学研究被引量：2
- 1996年
- 本文对91例进展期胃癌壁内浸润的规律、特点及与其它临床病理学因素的关系进行研究、并对不同生物学行为胃癌的合理切除范围提供参考意见。结果认为胃癌壁内浸润的的距离与肿瘤的大体类型、组织学类型、浆膜受浸,淋巴结转移、胃壁内脉管浸润、癌周淋巴细胞反应、癌细胞生长方式及年龄有密切关系,而与性别、肿瘤大小无关。
- 张玉宝张岂凡隋雨辰赵家宏丁立鲁明良
- 关键词：胃肿瘤病理学
- 胃平滑肌肿瘤的诊断和外科治疗被引量：6
- 2002年
- 目的探讨胃平滑肌肿瘤的诊断及治疗方法。方法对 34例经手术治疗的胃平滑肌肿瘤的临床资料进行回顾性分析。结果胃平滑肌肉瘤肿块较大 ,本组中最大直径≥ 5cm者占6 8% ,≥ 10cm者占 5 0 % ;胃平滑肌肉瘤大多位于胃底体区 ,占 94 % ;胃平滑肌肉瘤有三大临床表现 :上腹痛、上腹包块、出血。胃镜、钡剂X线透视、CT有助于诊断。随访结果 :本组 3、5、10年生存率分别是 87%、5 2 %及 2 6 %。结论对胃平滑肌肉瘤应积极考虑手术治疗。根据肿块大小。
- 张玉宝李栗王宽张殿忠张岂凡
- 关键词：胃肿瘤平滑肌肉瘤外科手术
- 胃癌组织p53、p16基因表达的研究被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨胃癌p53、p16基因表达与临床病理因素的关系。方法 采用免疫组化SP法检测63例胃癌患者的原发灶、转移淋巴结及正常粘膜组织的p53、p16基因表达情况,分析其与临床病理因素之间的关系。结果 p53基因与胃癌淋巴转移密切相关,p16基因表达与胃癌临床病理诸因素无关,p53高表达与p16低表达联合与淋巴结转移有关。结论 p53基因的阳性表达与胃癌恶性程度,特别是与淋巴结转移有关,可以作为胃癌淋巴结转移的标志物。
- 张国强王宽张玉宝赵家宏
- 关键词：胃癌P53P16免疫组化SP法淋巴结转移瘤
