张悦 作品数:17 被引量:46 H指数:4 供职机构: 南京农业大学动物医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省农业科技自主创新基金 江苏省科技支撑计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 理学 自动化与计算机技术 更多>>
猪肺炎支原体P65蛋白的克隆表达、单克隆抗体制备及阻断ELISA抗体检测方法建立 猪肺炎支原体(Mycoplasmahyopneumoniae,Mhp)是引起猪支原体肺炎(Mycoplasmapneumoniaeofswine,MPS)的病原,给养猪业造成巨大的经济损失。由于缺乏对具有良好免疫原性的M... 张悦关键词:猪肺炎支原体 P65蛋白 单克隆抗体 黄芪多糖复配辛伐他汀免疫佐剂对鸡免疫H9N2禽流感疫苗免疫效果的影响 被引量:1 2023年 为了实现免疫增强功能优化,将免疫增强剂黄芪多糖和辛伐他汀进行复配,并进一步制备出水包油型和油包水型2种复配油乳佐剂。与灭活H9N2禽流感疫苗联用,颈部皮下接种10日龄海兰褐蛋公鸡,并于二免后定期检测多项免疫指标。结果:通过均质乳化法在合适的条件下能制备出稳定的复配油乳佐剂,且水包油型流动性更佳;接种水包油型灭活H9N2油乳佐剂疫苗后,与对照组相比,血凝抑制抗体效价得到极显著提升,血清IgG抗体含量极显著增加(P<0.001),免疫脏器指数显著升高(P<0.05)。综上,黄芪多糖复配辛伐他汀的免疫佐剂能从多方面提升蛋鸡免疫功能,且水包油型的油乳佐剂效果优于油包水型的油乳佐剂。 徐书雯 张悦 朱天宇 刘振广 杨阳 王德云关键词:黄芪多糖 辛伐他汀 佐剂 免疫功能 猪肺炎支原体P65蛋白的单克隆抗体的制备(英文) 2014年 P65蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,与其他支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白。本实验应用原核表达的重组P65蛋白免疫小鼠,用Mhp全菌蛋白和P65蛋白筛选,制备了1株特异性单克隆抗体3G12。鉴定结果表明,该株单克隆抗体可与P65蛋白和Mhp全菌蛋白反应,采用间接ELISA法测得3G12细胞培养上清与P65蛋白反应抗体的效价为1∶12 800,与全菌蛋白反应抗体的效价为1∶3 200;3G12腹水与P65蛋白反应的抗体效价为1∶4 000 000以上,与168全菌蛋白反应的抗体效价为1∶20 000以上,细胞经长期体外培养和冻存后复苏能稳定分泌抗体。本研究成功获得到1株针对P65和Mhp全菌的单克隆抗体,为猪肺炎支原体致病机制和检测方法的进一步研究提供了基础。 刘茂军 张悦 白昀 王海燕 邵国青关键词:猪肺炎支原体 单克隆抗体 猪肺炎支原体主要抗原蛋白的研究进展 被引量:17 2013年 猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是引起猪支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae of Swine,MPS)的病原,给养猪业造成巨大的经济损失。由于对具有良好免疫原性的Mhp特异性蛋白缺少深入研究,使得Mhp在致病机制、血清学检测方法和新型疫苗的研究发展上受到一定限制,从而影响了对MPS的控制。本研究综合Mhp主要粘附因子、膜蛋白及细胞质蛋白等主要抗原蛋白的研究进展,为该病原致病机理研究、建立特异性诊断方法和推动基因工程疫苗发展提供一定的理论基础,对MPS的正确诊断、检测、免疫预防和控制也有重要意义。 张悦 刘茂军 邵国青关键词:猪肺炎支原体 疫苗 一种抑草秸秆生物质基降解地膜及应用 本发明公开了一种抑草秸秆生物质基降解地膜及应用,该降解地膜是通过如下方法获得的:S1:秸秆生物预处理,将黄孢原毛平革菌与娄彻氏链霉菌复配后接种到秸秆上,调节物料体系碳氮比和含水率,进行有氧发酵;S2:秸秆纤维软化及拆解分... 孙恩惠 黄红英 曲萍 雍宬 翟胜丞 黄莹 袁诚 张悦 吴华山 徐跃定 曹云文献传递 聚乙烯亚胺修饰山药多糖PLGA纳米粒的免疫增强作用 山药(Rhizoma discorea,英文名Chinese Yam)是一种广泛应用的药食同源的植物,干燥的根茎是其药用部位。山药性味甘平,在临床上是滋养脾胃,增益津液,可入肾脾肺三经的良药。山药多糖(Chinese y... 张悦关键词:山药多糖 文献传递 猪肺炎支原体P65基因原核表达及免疫原性分析 被引量:4 2014年 P65蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,与其他支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白。本研究通过基因合成获得P65基因中含有3个稀有密码子的前922bp,利用PCR从Mhp168株扩增获得P65基因后段,然后通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)将前后段连接后,克隆入pET-32a(+)中,获得重组质粒pET-32a(+)/mhp P65,经IPTG诱导获得87ku的重组融合蛋白,Western blot分析表明其与Mhp血清呈强阳性反应。将该重组蛋白免疫小鼠获得了高滴度的特异性抗体,表明该蛋白具有良好的免疫原性。本研究成功表达了可溶性的Mhp P65融合蛋白,其具有较好的免疫原性,这为猪肺炎支原体P65蛋白的功能研究以及诊断学方法的建立和亚单位疫苗的研制提供了帮助。 刘茂军 张悦 杜改梅 白昀 王海燕 姜平 邵国青关键词:猪肺炎支原体 P65基因 原核表达 免疫原性 江苏省农村生活污水处理设施运行及尾水稻田利用的安全性研究 随着我国新农村建设步伐的加快和城乡差距的缩小,农村环境保护越来越受到重视。江苏省农村生活污水处理工作走在全国的前列,为探寻适合江苏省实际情况的农村生活污水处理实用技术和管理措施,本研究依托于环保公益性行业科研专项课题—典... 张悦关键词:生活污水 运行管理 安全性 一种抑草秸秆生物质基降解地膜及应用 本发明公开了一种抑草秸秆生物质基降解地膜及应用,该降解地膜是通过如下方法获得的:S1:秸秆生物预处理,将黄孢原毛平革菌与娄彻氏链霉菌复配后接种到秸秆上,调节物料体系碳氮比和含水率,进行有氧发酵;S2:秸秆纤维软化及拆解分... 孙恩惠 黄红英 曲萍 雍宬 翟胜丞 黄莹 袁诚 张悦 吴华山 徐跃定 曹云文献传递 猪肺炎支原体P159蛋白的截短表达及黏附活性研究 被引量:2 2012年 为了解猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)P159蛋白的黏附活性,本实验利用PCR从Mhp NJ株扩增P159基因片段(3'端),克隆于pET-28a(+)进行表达,并用表达的截短蛋白进行黏附试验。结果表明,PCR扩增的目的基因片段约为450 bp;SDS-PAGE检测重组蛋白分子量为46 ku;western blot检测表明该重组蛋白能够与Mhp阳性血清发生特异性反应,表明该蛋白具有良好的免疫反应原性;表达的截短蛋白与Mhp的黏附试验结果表明,该重组蛋白可以粘附于猪肺上皮细胞(SJPL)表面,并部分抑制Mhp对SJPL的粘附作用。本研究结果为Mhp致病机制的进一步研究奠定了基础。 刘茂军 杜海霞 杜改梅 车巧林 张悦 熊祺琰 白方方 王海燕 冯志新 邵国青关键词:猪肺炎支原体 黏附活性