张念慈
- 作品数:2 被引量:7H指数:2
- 供职机构:浙江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:浙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 一种利用STO饲养层细胞制备拟胚体的新方法被引量:3
- 2005年
- 建立了一种利用STO饲养层细胞制备拟胚体的新方法。该方法选用生长至80%饱和密度的STO细胞,经丝裂霉素C(10 mg/ml)处理4 h后以8×104 cm-2的密度接种培养12 h,制备饲养层,再将ES-D3细胞以1×104 cm-2的密度接种其上,首先用含mLIF的DMEM培养液培养24 h,再更换拟胚体诱导培养液,5~9天后获得了各成熟阶段的拟胚体。形态结构和分化潜能等研究表明,该方法制备的拟胚体结构典型,具有产生3个胚层谱系来源的功能细胞的潜能。与传统拟胚体制作方法如悬滴培养法相比,具有操作简便,拟胚体形成率高,重复性好等优点,是开展哺乳动物早期胚胎发育和干细胞分化研究的理想工具。
- 胡若真周庆军邵健忠项黎新张铭张念慈陆永良姚行戴利成
- 关键词:饲养层培养法分化潜能接种培养
- 人原始生殖细胞的分离和体外培养被引量:4
- 2004年
- 从 4~ 10周龄药物流产胚胎的生殖嵴和肠系膜组织中分离原始生殖细胞 (primordial germ cells,PGCs) ,培养在添加人重组白血病抑制因子 (rh L IF)、人重组碱性成纤维细胞生长因子 (rh b FGF)和 Forskolin的小鼠饲养层细胞上 .经过 4~ 7d培养 ,PGCs形成典型的鸟巢状集落 .集落在传代过程中保持碱性磷酸酶活性 ,且胚胎阶段性特异抗原 1(SSEA- 1)、胚胎阶段性特异抗原 3(SSEA- 3)免疫荧光染色呈阳性 .具有分化潜能的 PGCs能在体外连续传代培养 12代 .结果表明从药物流产胚胎中分离的人类 PGCs可以在体外培养成为具有分化潜能的多能性干细胞 .
- 劳滔滔陆永良戴利成姚行张念慈张铭1
- 关键词:体外培养多能干细胞