张威
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
- 供职机构：复旦大学上海医学院生理与病理生理学系更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 血管内皮祖细胞与老年缺血性心血管病的血管新生被引量：7
- 2004年
- 1997年国内外报道血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)分离培养成功,从而使EPCs成为当前干细胞研究热潮中的一个分支.EPCss是一群具有游走性特征、能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞,由干细胞经成血管细胞分化发育而来,由于缺乏成熟内皮细胞的特征性表型,因此,有人提出对于EPCs的鉴别分离主要靠其特异性的分子标志(CD34+、flk-1+、AC133+)[1];此外也可通过EPCs培养分化形成的成熟血管内皮细胞特征而间接证实.
- 张威曲晓义金惠铭
- 关键词：内皮血管血管生长因子
- 免疫磁珠分离脐血CD133阳性细胞的方法研究被引量：2
- 2005年
- 目的探讨免疫磁珠分离脐血CD133阳性细胞的方法。方法6%羟乙基淀粉(HES)和Ficoll-Paque联合应用分离出脐血中单个核细胞,再用MACSCD133磁珠分离试剂盒分选其中的CD133+细胞。结果经MACS分离的脐血中CD133+细胞数平均为(6.3±2.9)×105/ml,占单个核细胞的(1.41±1.14)%,经流式细胞仪检测CD133+细胞纯度为75%￣85%。结论免疫磁珠法是分离脐血CD133阳性细胞的较好的方法。
- 张威金惠铭周莉曲晓义
- 关键词：免疫磁珠脐血CD133细胞
- 用CD133免疫磁珠分离脐血内皮祖细胞的实验研究被引量：9
- 2005年
- 目的:从脐血中分离、培养血管内皮祖细胞,研究内皮祖细胞的生长特性和诱导分化条件。方法:应用MACS磁球抗体标记法纯化脐血中的CD133+细胞,通过流式细胞仪、免疫细胞化学、免疫荧光等技术及形态学(光镜、电镜)观察研究内皮祖细胞;将细胞接种于添加(或未添加)VEGF、bFGF、干细胞因子(SCF)的含20%胎牛血清(FBS)的IMDM培养基中,观察内皮祖细胞的生长特性。结果:分离新鲜脐血所得CD133阳性细胞占单个核细胞的(1.41±1.14)%,经流式细胞仪鉴定CD133+细胞纯度为75%-85%;将分离细胞接种于纤维连接蛋白包被的24孔板内,培养1-2h即有细胞贴壁,7-10d可见贴壁细胞呈铺路石样排列;14d后细胞出现小圆形、梭形等多样性变化,可见毛细血管管腔样结构,电镜观察可见胞浆内典型的Weibel-Palade小体;在VEGF、bFGF、SCF存在条件下,检测贴壁细胞培养14d后细胞表面抗原表达情况:与培养开始时相比,祖细胞标志CD133和CD34阳性率呈明显下降趋势,分别由(77.0±3.3)%和(93.1±4.7)%降至(1.6±2.2)%和(37.4±4.9)%,P<0.05,内皮细胞特异性标志Flk-1表达明显增加,由(22.3±3.3)%增至(94.3±4.1)%,P<0.05,同时vWF抗原呈强阳性表达,阳性率为(77.9±3.3)%。结论:根据细胞表面特异性分子标志(CD133+/CD34+/Flk-1+)可以从脐血中分离出EPCs,EPCs可在体外一定的诱导因子作用下,培养7-10d分化为成熟内皮细胞。
- 张威周莉金惠铭曲晓义张国平殷莲华朱大年
- 关键词：胎血内皮祖细胞细胞分离
