左玉丰
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 用于靶向结合髓系白血病细胞的抗CD33的工程抗体及其表达载体和用途
- 本发明公开了一种用于靶向结合髓系白血病细胞的抗CD33的工程抗体及其表达载体和用途，由SEQ ID NO.3重链可变区氨基酸序列和SEQ ID NO.4轻链可变区氨基酸序列组成。应用RT－PCR技术，成功的从杂交瘤细胞中...
- 廖晓龙陈小军王洋王敏左玉丰郭桂庆葛新顺屈浩王建祥韩忠朝
- 文献传递
- 抗人CD33单链抗体的基因构建、表达及其生物活性检测被引量：4
- 2007年
- 目的:构建及表达抗人CD33单链抗体(抗CD33-scFv)基因,并检测其生物活性。方法:采用RT-PCR方法从分泌抗人类白细胞表面分化抗原CD33单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞中克隆出VL和VH可变区基因,再通过重叠延伸拼接(splice-overlap extension)PCR方法在VH和VL可变区基因之间引入柔性连接肽(Gly4Ser)3,体外构建抗人CD33-scFv基因。将其克隆至原核表达载体PET-28a(+)并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达。结果:SDS-PAGE和Westernblot分析结果表明,抗CD33-scFv在Rosetta(DE3)菌中获得高效表达,重组蛋白的相对分子质量(Mr)为30000,表达产物以不溶性包涵体形式存在,经过溶解包涵体,镍柱亲和层析纯化和体外复性过程,获得了高纯度的scFv片段。流式细胞术(FCM)分析结果证实抗CD33-scFv可与人类白细胞表面的分化抗原CD33结合,保留了鼠源性mAb的与CD33结合的活性。结论:重组抗人CD33-scFv基因构建与表达成功,并且通过复性得到有生物活性的scFv,为下一步针对髓系恶性肿瘤的靶向治疗奠定了基础。
- 陈小军王洋屈浩葛新顺左玉丰廖晓龙
- 关键词：CD33SCFV复性
- 抗CD33抗体在急性髓系白血病治疗中的作用
- 2004年
- 左玉丰廖晓龙
- 关键词：急性髓系白血病放射性同位素标记
- Siglecs在细胞间和信号传导中的作用
- 本文首先论述了唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素家族成员组成及特征，然后从红细胞表面的唾液酸残基结合、抑制型受体、调节细胞的生长与分化三个方面阐述了唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素家族在细胞间和信号传导中的作用。
- 左玉丰廖晓龙
- 关键词：唾液酸免疫球蛋白信号传导
- 文献传递网络资源链接
- 抗人CD33单克隆抗体(HIM3-4、WM53、M195)抗原识别表位的初步研究被引量：2
- 2007年
- 目的：确定抗人CD33单克隆抗体（HIM3-4、WM53、M195）抗原识别表位所在区域，进而阐明抗体识别表位不同于其介导的生物学作用之间的关系。方法：将四个CD33胞外区不同长度的基因片段定向克隆入真核表达载体pDisplay，构建成真核表达载体pDisplay／EP1、2,3、4，分别将空载体和构建的质粒通过磷酸钙沉淀法转染入293T细胞，瞬时转染48小时后利用流式细胞仪通过抗血凝素A（HA）抗体标记以检测各质粒在细胞表面的表达，同时检测HIM3-4、WM53、M195和不同区段的结合活性。结果：抗人CD33单克隆抗体HIM3-4能识别pDisplay／EP1、2、3表达的蛋白，WM53能识别pOisplay／EP1表达的蛋白，M195则均能识别四个片段所表达的蛋白。结论：HIM3-4、WM53、M195识别的CD33抗原表位分别位于115—170、17—60、170—262氨基酸。
- 左玉丰王敏田征陈凌屈浩王立王建祥廖晓龙
- 关键词：CD33单克隆抗体抗原表位
- 抗人CD33单链抗体轻、重链可变区基因的克隆及单链抗体基因的构建
- 本文利用amersham公司单链抗体构建试剂盒,从抗人CD33鼠杂交瘤细胞株中扩增重链(VH)和轻链(VL)基因,用Linker-PrimerMix将轻、重链可变区基因片段拼接成ScFv基因;将ScFv基因克隆入pMD-...
- 左玉丰廖晓龙
- 关键词：白血病单链抗体基因克隆
- 文献传递
