宋帅
- 作品数：10 被引量：36H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- α1-微球蛋白、C-反应蛋白、D-二聚体联合检验在妊娠期高血压疾病诊疗中的意义被引量：18
- 2017年
- 目的观察分析妊娠期高血疾病孕妇血清中α1-微球蛋白(α1-MG)、C-反应蛋白(CRP)、血浆D-二聚体(D-D)的变化规律及其临床意义。方法回顾性分析2015年10月-2016年12月该院妊娠期高血压疾病孕妇52例为研究组,同期健康孕妇及未孕妇女82例为对照组。采用全自动生化分析仪测定各组孕妇血清中α1-MG、CRP含量,采用全自动血凝仪测定各组孕妇血浆D-D含量。结果研究组孕妇血清中的α1-MG、CRP、D-D浓度均高于对照组,且子痫孕妇要高于子痫前期孕妇,重度子痫前期孕妇高于轻度子痫前期孕妇。结论妊娠期高血压疾病孕妇血清α1-MG、CRP、血浆D-D含量随病情加重而增高。动态监测孕妇血清中α1-MG、CRP、血浆D-D浓度可作为妊娠期高血压疾病诊断、病情监控及防治并发症保护母婴安全的良好指标。
- 耿辉魏雁虹宋帅刁斌斌杨广民
- 关键词：Α1-微球蛋白C-反应蛋白D-二聚体妊娠期高血压疾病
- 人α1微球蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达被引量：2
- 2013年
- 目的构建人α1微球蛋白（α1-MG）基因的原核表达质粒，在大肠杆菌中表达、纯化，为制备仅。一MG诊断试剂中原料抗体、标准品及质控品奠定基础。方法从人胚胎肝脏中提取总RNA，利用反转录聚合酶链反应技术扩增α1-MG基因。然后克隆至PQE30表达载体，转化大肠杆菌M15中进行表达，并经镍固定金属亲和层析进行纯化，蛋白质印迹进行免疫学鉴定。结果获得了与Genebank报道一致的仪。一MG基因片段，成功构建了成熟人α1-MG的原核表达载体PQE30-α1-MG，质粒转化大肠杆菌并经1mmol／L异丙基硫代半乳糖诱导5h后，可表达相对分子质量约25000的外源蛋白，表达的α1-MG大部分在包涵体中，并可经镍固定金属亲和层析纯化，纯化有效率95％以上，BCA法测定纯化的α1-MG蛋白含量为25mg／L。蛋白质印迹表明，该蛋白可与抗人仅．一MG天然抗体反应。结论通过基因工程方法可获得高效表达的重组α1-MG蛋白，该蛋白具备同天然仅。一MG相同的生物学特性，为下一步进行α1-MG相关研究及应用奠定基础。
- 魏雁虹耿辉宋帅孟莹杨广民
- 关键词：Α1微球蛋白重组蛋白反转录聚合酶链式反应蛋白质印迹
- α1-抗胰蛋白酶最新研究进展被引量：7
- 2018年
- 目的α1-抗胰蛋白酶是人体内重要的蛋白酶抑制剂,几乎占据了血浆总蛋白酶抑制能力的90%以上,α1-抗胰蛋白酶参与肺炎、急性肺损伤、慢性阻塞性肺疾病、肝硬化等疾病的发生发展过程。本文对α1-抗胰蛋白酶的最新研究进展进行综述,阐述α1-抗胰蛋白酶的理化性质及生理功能,对α1-抗胰蛋白酶与肺炎、肝脏及胃癌相关疾病发生发展的关系、临床应用和治疗等方面展开探讨。随着α1-抗胰蛋白酶产品的不断研制,在临床研究和应用将更加深入。
- 宋帅杨广民
- 关键词：Α1-抗胰蛋白酶肺炎急性肺损伤肝硬化胃癌
- 下调HMGB2表达对肝癌LM3细胞上皮-间质转化的抑制作用及其AKT/mTOR信号通路机制
- 2024年
- 目的:探讨下调肝癌细胞中高迁移率族框蛋白2 (HMGB2)表达对肝癌细胞生物学行为及上皮-间质转化(EMT)进程的影响,并阐明其作用机制。方法:对数生长期的人肝癌LM3细胞分为阴性对照组和HMGB2 RNA干扰组(HMGB2 siRNA组),分别以Lipofectamin 2000为载体转染无关序列的RNA寡核苷酸(RNA oligo)和敲除HMGB2序列的RNA oligo。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测2组细胞中HMGB2 mRNA和蛋白表达水平,分别采用细胞划痕实验和Transwell小室实验检测2组细胞的迁移和侵袭能力,采用Western blotting法检测2组细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、 N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白表达水平。结果:与阴性对照组比较,HMGB2 siRNA组细胞中HMGB2 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),HMGB2 siRNA组细胞划痕愈合率明显降低(P<0.01),侵袭细胞数明显减少(P<0.01),细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01),N-cadherin、Vimentin、mTOR、AKT和磷酸化AKT (p-AKT)蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:下调HMGB2的表达可降低肝癌LM3细胞迁移和侵袭能力并抑制EMT,其作用机制可能与参与调节AKT/mTOR通路相关蛋白表达有关。
- 魏雁虹杨晨雪杨广民宋帅李明杨海娇魏海峰
- 关键词：上皮-间质转化细胞侵袭
- 血清克隆性免疫球蛋白检查在慢性淋巴细胞白血病患者中的预后价值研究被引量：1
- 2018年
- 目的:探究血清克隆性免疫球蛋白检查在慢性淋巴细胞白血病患者中的预后价值。方法:回顾性分析56例初步诊断为慢性淋巴细胞白血病患者,采用全自动电泳仪以及扫描仪观察并记录患者血清克隆性免疫球蛋白(Ig)的表达情况,并探究血清克隆性Ig的表达情况与慢性淋巴细胞白血病预后因素的影响。结果:56例慢性淋巴细胞白血病患者中11例为克隆性Ig,克隆性Ig G者6例,Ig M者4例,Ig A者1例;血清克隆性Ig的表达情况与慢性淋巴细胞白血病的Binet分期、血清TK1的水平及FISH del(11q22. 3)存在一定的相关性。结论:大部分慢性淋巴细胞白血病患者血清中存在克隆性免疫球蛋白,通过血清克隆性免疫球蛋白的有无可作为慢性淋巴细胞白血病预后研究指标。
- 宋帅杨海娇张梦轩杨广民
- 关键词：慢性淋巴细胞白血病
- 双氢青蒿素通过抑制HMGB2表达及逆转EMT进程抑制肝癌细胞生长及侵袭被引量：3
- 2022年
- 目的:观察双氢青蒿素(DHA)对体外生长的肝癌细胞生物学行为的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养人肝癌细胞HepG2和LM3,采用不同浓度DHA处理,设立不加药的阴性对照组并以顺铂作为阳性对照。MTT、流式细胞术分别检测DHA对肝癌细胞增殖及凋亡的影响;划痕实验、Transwell实验分别观察DHA对肝癌细胞迁移及侵袭能力的影响;Western blot检测DHA对肝癌细胞凋亡相关蛋白、HMGB2及EMT相关蛋白表达的影响。结果:与阴性对照组相比,DHA处理后的肝癌细胞存活率降低、凋亡率提高,迁移及侵袭能力降低(P<0.05),HMGB2蛋白表达显著降低,凋亡相关蛋白Cleavedcaspase3、Bax表达显著增加,Bcl-2表达显著减少,EMT相关蛋白E-cadherin表达显著增加,N-cadherin、Vimentin表达显著减少(P<0.05)。结论:DHA可抑制肝癌细胞生长,促进其凋亡,降低其迁移及侵袭能力,其机制可能为DHA通过降低HMGB2表达抑制肝癌细胞EMT进程。
- 杨晨雪魏雁虹魏海峰米旭光宋帅李明耿辉杨广民
- 关键词：双氢青蒿素迁移上皮-间质转化
- RNAi抑制高迁移率族蛋白B2表达对人肝癌细胞HepG2迁移及侵袭能力的影响及机制
- 2023年
- 目的采用RNA干扰技术下调肝癌细胞中高迁移率族蛋白B2(HMGB2)的表达,观察其对肝癌细胞迁移及侵袭能力的影响,并阐明其作用机制。方法体外培养人肝癌细胞HepG2,分为HMGB2 RNA干扰组(HMGB2 siRNA)及阴性对照组(NC),分别以脂质体2000为载体,转染敲除HMGB2序列的RNA寡核苷酸(RNA oligo)及RNA干扰无关序列。采用RT-qPCR及Western blot法检测细胞中HMGB2 mRNA及蛋白表达水平以验证干扰效果;采用细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测敲低HMGB2对肝癌细胞迁移及侵袭能力的影响;Western blot法检测敲低HMGB2对HepG2细胞EMT相关蛋白表达的影响。结果HMGB2 siRNA组细胞HMGB2 mRNA及蛋白表达水平低于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),表明RNA干扰成功;细胞划痕及Transwell侵袭实验结果显示,HMGB2 siRNA组细胞愈合率及侵入小室的细胞数量少于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),表明下调HMGB2表达可降低HepG2细胞的迁移及侵袭能力;Western blot结果显示,HMGB2 siRNA组HepG2细胞N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平低于NC组,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论下调HMGB2表达可抑制肝癌细胞的上皮间质转化进程,进而降低其迁移及侵袭能力。
- 魏雁虹杨晨雪杨广民宋帅李明杨海娇魏海峰
- 关键词：肝癌迁移上皮间质转化
- 人α1微球蛋白ELISA检测试剂盒的制备及初步应用
- 2014年
- 目的制备人α1微球蛋白（alpha 1-microglobulin,α1-MG）ELISA定量检测试剂盒,并初步应用于临床标本的检测。方法用重组人α1-MG蛋白免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备特异性单克隆抗体,对单抗的特性进行鉴定后,采用双抗体夹心ELISA方法制备α1-MG试剂盒,并进行线性范围、灵敏度、准确性、精密性验证。应用制备的试剂盒检测100份健康人血清中的α1-MG含量,计算正常参考值;分别应用试剂盒及放射性免疫分析法（radioactive immunoassay,RIA）检测87份人血清标本,分析试剂盒与RIA法检测结果的相关性。结果经间接ELISA法筛选及克隆化培养,共获得4株稳定分泌抗α1-MG单抗的杂交瘤细胞株;制备的试剂盒最佳线性范围为0.5-60 mg/L,灵敏度为0.03 mg/L,检测不同浓度α1-MG的回收率在92.7%-97.1%之间,批内、批间变异系数（CV）分别为4.78%-8.57%和4.30%-6.84%;该试剂盒检测健康人血清样本中α1-MG含量正常参考值为15-32 mg/L,与RIA法的检测结果具有良好的相关性（r=0.958 6）。结论制备的人α1-MG ELISA检测试剂盒具有较高的准确性和灵敏度,且与RIA法具有良好的相关性,符合临床免疫分析的要求,适用于临床检测和科研应用。
- 魏雁虹何巍耿辉宋帅刁斌斌杨广民
- 关键词：Α1微球蛋白酶联免疫吸附测定试剂盒参考值
- 慢性乙型肝炎患者血清α1微球蛋白检测的临床意义被引量：5
- 2017年
- 目的:检测不同肝功能损伤情况下慢性乙型肝炎(CHB)患者血清α1微球蛋白(α1-MG)的水平,探讨采用α1-MG评价CHB患者肝功能的临床意义。方法:243例CHB患者分为肝肾功能正常组(n=94)、肝功能正常肾功能异常组(n=20)、肝功能异常肾功能正常组(n=100)和肝肾功能异常组(n=29),同时选取健康体检者67人作为对照组,测定各组受试者血清α1-MG水平,同时测定谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)等肝功能指标及血清肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)等肾功能指标。采用免疫比浊法检测α1-MG水平,采用紫外-乳酸脱氢酶法检测ALT水平,采用紫外-苹果酸脱氢酶法检测AST水平,采用AMP缓冲液法检测ALP水平,采用肌氨酸氧化酶法检测CREA水平,采用紫外-谷氨酸脱氢酶法检测BUN水平。结果:与对照组比较,肝功能异常肾功能正常组患者血清α1-MG水平明显降低(P<0.05),肝肾功能正常组和肝肾功能异常组患者血清α1-MG水平无明显变化(P>0.05),肝功能正常肾功能异常组患者血清α1-MG水平明显升高(P<0.01)。按照α1-MG<10mg·L^(-1)为判断肝功能异常的标准,肝功能异常肾功能正常组患者血清ɑ1-MG阳性率为36%,肝肾功能异常组患者血清α1-MG阳性率为24%;如以α1-MG<15mg·L^(-1)为标准,则肝功能异常肾功能正常组患者血清α1-MG阳性率为68%。肝功能异常肾功能正常组患者血清α1-MG水平与肝功能指标ALT、AST和ALP呈负相关关系(r=-0.934,r=-0.916,r=-0.847,P<0.01),且其数值随着肝损伤程度的加重而降低。结论:α1-MG检测在判断CHB患者肝功能方面具有一定的临床意义,但须排除肾功能损害引起的结果干扰。
- 魏雁虹宋帅耿辉刁斌斌杨广民
- 关键词：血清学检测肝功能肾功能
- 迈瑞CAL8000流水线与Sysmex-XE2100性能对比分析
- 2018年
- 目的:对比分析迈瑞CAL8000流水线与Sysmex-XE2100血细胞分析仪性能,探讨两个品牌血细胞分析仪检测结果的一致性,确保CAL8000检验结果的可靠性。方法:依照IC-SH制定的标准及NCCLS EP9-A2文件,用不同浓度的新鲜全血标本分别在迈瑞BC-6800、BC-6900、Sysmex-XE2100上对白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、血小板计数、红细胞压积五项参数进行测定,综合分析其精密度、准确度、携带污染率、相对偏差、线性范围和可比性试验进行评价。结果:BC-6800、BC-6900 Sysmex-XE210血细胞分析仪的白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、血小板计数、红细胞压积五项参数具有良好的精密度和准确度;携带污染率低于1%,误差在允许范围内;线性范围基本能覆盖临床标本浓度范围,检测浓度与稀释倍数呈线性相关。结论:CAL8000血细胞分析仪分析性能良好,检测结果稳定可靠,能很好地满足临床对血液常规学检验的需求。适用于各大中型医院、科研实验室。
- 耿辉宋帅杨海娇杨广民
- 关键词：血细胞分析仪
