孟文华
- 作品数：10 被引量：24H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- PDI,PPI和伴侣分子催化重组人IL-2和GM-CSF的再折叠被引量：3
- 1994年
- 在PDI,PPI和伴侣分子催化重组人IL-2和GM-CSF的再折叠研究中,观察到PDI可防止二硫键错误配对和通过链间交联形成聚合体,并可纠正二硫键错误配对的IL-2异构体;PPI可提高折叠反应的速率,而伴侣分子则主要是防止折叠过程中形成聚合体。另外,还观察到它们之间的协同作用。
- 徐明波孟文华马贤凯
- 关键词：重组蛋白PDIPPI
- HCV核心区与NS3区抗原表位分析及融合基因表达被引量：1
- 1997年
- ＨＣＶ核心区与ＮＳ３区抗原表位分析及融合基因表达逯好英徐东刚朱分禄孟文华孟庆华军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心（Ｃ）区及ＮＳ３区抗原是第二代抗－ＨＣＶ抗体诊断试剂的主要组分。核心蛋白（Ｃ２２）含有１９１个氨基酸，...
- 逯好英徐东刚朱分禄孟文华孟庆华
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白NS3蛋白抗原
- 二硫键异构酶的纯化及其对重组蛋白体外折叠的影响被引量：1
- 1994年
- 自牛肝中纯化了蛋白二硫键异构酶，并对重组蛋白 的酶促折叠的过程进行了探讨。结果表明，在等摩尔ＰＤＩ的催化作用下，可使１ｍｇ／ｍｌ的ＩＬ－２的正确折叠率提高５８％以上，比活性由４×１０＾６ｕ／ｍｇ增加到８．２×１０＾６ｕ／ｍｇ；ＰＤＩ还能部分纠正二硫键锚配的Ｌ－２异构体成为正确折叠的ＩＬ－２和防止ＩＬ－２通过Ｃｙｓ的链间交联形成聚合体。ＧＭ－ＣＳＦ在ＰＤＩ催化下也有类似的结果。
- 徐明波孟文华马贤凯
- 关键词：重组蛋白折叠二硫键异构酶
- 人白细胞介素-18基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 1998年
- 利用反转录ＰＣＲ（ＲＴＰＣＲ）法从人肝组织中分离人白介素１８（ｈＩＬ１８）基因。克隆到Ｔｖｅｃｔｏｒｅａｓｙ载体中，经酶切初步鉴定后进行ＤＮＡ序列分析，结果表明与文献报道完全一致。以ｐＢＶ２２０为表达载体，在大肠杆菌中高效表达了ｈＩＬ１８基因，重组蛋白占菌体总蛋白的２７．２％。为进一步研究其生物活性奠定了重要基础。
- 徐东刚牛建章孟宗达逯好英逯好英崔泽朱会宾孟文华
- 关键词：CDNA克隆大肠杆菌白细胞介素18
- 原核基因工程中以包涵体形式表达产物的中试分离纯化研究被引量：3
- 1993年
- 徐明波董晓杰孟文华朱耀先张明伟马贤凯
- 关键词：蛋白包涵体提纯基因工程
- 重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子溶液中的稳定性初探
- 1995年
- 在大肠杆菌表达的重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）纯化的基础上,我们研究了其在溶液中的稳定性,发现它在pH6.8的PBS缓冲液中稳定性很好,但在pH8.3的Tris·HCl冲浪中时隔2 wk以上即发生降解,SDS-BAGE分析,相应位置变成两条带,将SDS-PAGE胶电转移至PVDF膜,将膜上出现的两条蛋白染色带剪下,进行N端氨基酸序列分伍,两蛋白均有固定的降解位点.降解的蛋白与未降解的相比,生物活性仅有较激下降。
- 凌明圣孟文华邹民吉徐明波王嘉玺马贤凯
- 关键词：重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子稳定性
- 脯氨酰顺－反异构酶的纯化及对重组蛋白质折叠反应的催化性能被引量：5
- 1994年
- 脯氨酰异构是蛋白质折叠反应的限速步骤之一，体内被脯氨酰顺－反异构酶（ＰＰＩ）所催化．为了研究ＰＰＩ在重组蛋白体外折叠复性中的作用，我们自猪肾脏中纯化了ＰＰＩ，并对重组蛋白的酶促折叠过程进行了探讨．结果表明，ＰＰＩ催化的重组蛋白的折叠反应主要是提高了它们的折叠速率，而不增加正确折叠率和比活性，ＰＰＩ在很低的浓度下即有很高的催化活性．
- 徐明波孟文华马贤凯
- 关键词：重组蛋白折叠
- HBsAg快速全血凝集诊断试剂盒的应用效果评价
- 1998年
- 用改进的化学交联技术将抗人红血球血型糖蛋白Ａ单克隆抗体（ＭＣＡＢ－ＧＰＡ）与ＨＢｓＡｇ单克隆抗体重组，制备出检测ＨＢｓＡｇ的双功能抗体。研制出快速全血凝集ＨＢｓＡｇ检测试剂盒（ＪＫＤ）。鉴定结果表明，该试剂盒可检测１～２．５ｎｇ／ｍｌ水平的ＨＢｓＡｇ。ＪＫＤ与ＥＩＡ和ＰＨＡ方法配对检测，符合率分别为９８．３％和９８．７％。对不同人群中ＨＢｓＡｇ检测表明，１６例ＥＩＡＨＢｓＡｇ阳性病人，ＪＫＤ１００％阳性，７９例肝炎病人阳性率为６４．６％（５１／７９），７３名献血员未检出阳性，一般人群阳性率为３．８％（２／５２）。上述结果表明，该试剂盒不仅简便、快速。
- 牛建章牛建章陈淑芬逯好英于秋丽徐东刚孟文华孟宗达崔泽徐东刚
- 关键词：乙型肝炎表面抗原试剂盒
- 重组白细胞介素2体外折叠的实验研究被引量：6
- 1994年
- 包涵体中的重组蛋白抽提后可以在变性状态下纯化，而纯化后的体外折叠（即复性）是基因工程下游处埋中的重要环节。荧光光谱研究表明，ＩＬ－２分子折叠过程中荧光强度逐渐减小，最大发射峰由３１６ｎｍ红移到３４８ｎｍ。以Ｔｒｐ残基的暴露程度反映分子的折叠状态。ＧＭ－ＣＳＦ在折叠过程中的荧光强度有类似变化；凝胶排阻ＨＰＬＣ可以检测折叠过程中的聚合体；而反相ＨＰＬＣ可以将ＩＬ－２分成三个相互独立的异构体色谱峰。据此可以计算出ＩＬ－２分子的正确折叠率。常用的稀释复性方法，随着ＩＬ－２浓度的增高，它的正确折叠率逐渐降低，蛋白浓度的对数与正确折叠率之间大致呈线性关系。当ＩＬ－２浓度为１ｍｇ／ｍＬ时，其正确折叠率仅为３０％，而采取较低的蛋白浓度进行复性会因大量的样品体积导致后期纯化的困难。
- 徐明波孟文华马贤凯
- 关键词：蛋白折叠白细胞介素2
