孟双
- 作品数：11 被引量：51H指数：5
- 供职机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 2017年9月至2018年5月云南省某院新生儿肠道耐药肠杆菌目细菌筛查及耐药性分析
- 2024年
- 目的 了解产科病房新生儿肠道中耐药肠杆菌目细菌携带状况及菌株特征。方法 收集2017年9月至2018年5月间云南省某医院产科病房新生儿粪便样本277份,通过超广谱β-内酰胺酶(ESBL)显色培养基分离培养、菌株药物敏感检测及代表菌株Illumina基因组测序,分析新生儿肠道耐药菌携带状况,菌株耐药表型、耐药基因型及序列分型(STs)特征。结果 277份样品中113份样品ESBL显色培养基培养阳性,阳性率40.79%。分离鉴定出4个属11个种的113株肠杆菌目细菌,其中,克雷伯属53.10%(60/113),埃希菌属30.10%(34/113),肠杆菌属15.04%(17/113)及勒克氏菌属1.77%(2/113)。菌株呈现多重耐药性,除对二代、三代头孢菌素高度耐药外,对其他种类代表抗菌药物耐药率分别为厄他培南52.21%(59/113)、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑72.57%(82/113)、四环素65.49%(74/113)和环丙沙星54.87%(62/113)。挑选84株代表菌株完成基因组序列分析,共筛查到70种耐药基因,携带率较高的有sul1(84.52%,71/84)、fos A(71.43%,60/84)、tet(A)(67.86%,57/84)、bla_(SHV)(63.10%,53/84)和bla_(NDM)(61.90%,52/84)基因。53株肺炎克雷伯菌呈现优势克隆型集中分布,ST17型占比达92.45%(49/53),且均携带bla_(NDM-1)基因,其他种属菌株ST型别呈多样性。检出携带bla_(NDM-1)的阴沟肠杆菌、霍氏肠杆菌,携带bla_(IMP-26)的格氏克雷伯菌,携带bla_(IMP-1)的勒克氏菌和携带mcr的阿氏肠杆菌、霍氏肠杆菌及赫氏埃希菌。结论 本研究发现了某产科病房新生儿肠道高比例携带ESBL耐药肠杆菌,揭示了耐药菌株极易在新生儿间传播和肠道定植,应高度重视新生儿耐药菌环境暴露风险及对其肠道微生态建立的影响。
- 姜雪琪贾森泉白雪梅孙静刘泽梁龚心怡苗贝贝李杰孟双尹建雯李娟
- 关键词：新生儿超广谱Β-内酰胺酶多重耐药菌耐药基因
- 血浆外泌体microRNA-29c在阿尔茨海默病早期诊断价值的初步研究被引量：11
- 2018年
- 目的初步探讨血浆外泌体内microRNA-29c(miR-29c)在阿尔茨海默病(AD)早期诊断种的价值。方法明确血浆外泌体内miR-29c提取和检测过程的稳定性;检测202例轻度认知障碍(MCI)和痴呆期(DAT)AD患者及120例表面健康受试者的血浆外泌体内miR-29c,建立其生物参考区间,确定截断值,比较其诊断效能。结果对照组、帕金森患者、血管性痴呆患者、MCI和DAT患者miR-29c的回收率均在95%-105%之间,且各组受试者间的回收率无统计学差异(P>0.05);MCI和DAT患者血浆外泌体内miR-29c均显著低于对照组、帕金森患者和血管性痴呆患者(P<0.05),且DAT患者显著低于MCI患者(P<0.05);对照组、帕金森患者和血管性痴呆患者血浆外泌体内miR-29c水平无显著性差异(P>0.05);使用截断值诊断MCI和DAT的灵敏度高于生物参考区间法(P>0.05)。结论外泌体内miR-29c可作为AD诊断,特别是早期诊断的候选生物标志物,且应使用其截断值而不是生物参考区间对AD进行早期诊断。
- 刘辰庚郝婷杨婷婷孟双王培昌
- 关键词：阿尔茨海默病MICRORNA外泌体生物标志物
- 阪崎肠杆菌实时荧光TaqMan PCR检测方法的研究被引量：4
- 2011年
- 目的建立阪崎肠杆菌的TaqMan PCR检测方法。方法将阪崎肠杆菌的菌悬液连续10倍稀释后与健康人新鲜粪便混匀,制备成1.2×100～1.2×108 cfu/ml梯度浓度的粪便模拟标本并提取DNA,用以评价阪崎肠杆菌实时荧光TaqMan PCR法对临床模拟标本检测的灵敏度、特异性和稳定性。结果实时荧光TaqMan PCR法对阪崎肠杆菌粪便模拟标本的检测灵敏度为1.2×103 cfu/ml;其线性检测范围为:1.2×103～1.2×108 cfu/ml;在稳定性评价中,对含菌量为1.2×108、1.2×106和1.2×104 cfu/ml的粪便模拟标本进行实时荧光TaqMan PCR法重复检测10次,结果显示扩增反应Ct值的变异系数(CV)为0.65%～1.47%;在特异性评价中,除了阳性对照其余样本均未见特异性扩增曲线。结论本研究建立了阪崎肠杆菌实时荧光TaqMan PCR法。
- 孟双李娟白雪梅王艳叶长芸
- 关键词：阪崎肠杆菌PCR外膜蛋白A
- 类志贺邻单胞菌实时荧光TaqMan PCR快速检测体系的建立被引量：3
- 2011年
- 目的建立针对类志贺邻单胞菌的高灵敏、高特异的实时荧光TaqMan聚合酶链式反应(PCR)快速检测体系。方法根据类志贺邻单胞菌23S rRNA基因的一段特异性序列设计引物及TaqMan探针,利用实时荧光PCR检测平台探讨该检测体系的灵敏度;用30种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌评价该检测体系的特异性。结果实时荧光TaqMan PCR快速检测体系对类志贺邻单胞菌重组质粒的检测灵敏度为1×102拷贝/反应体系;对类志贺邻单胞菌基因组的检测灵敏度为3×10-2pg/反应体系;该检测体系在检测30种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌时未出现特异性扩增,整个反应在2 h内完成。结论本研究建立的实时荧光TaqMan PCR检测体系可作为类志贺邻单胞菌灵敏、特异、快速的检测方法。
- 孟双王艳白雪梅纪少博李爱华叶长芸
- 关键词：类志贺邻单胞菌PCRRRNA
- 某屠宰场猪粪便中单增李斯特菌携带调查
- 2014年
- 为了初步探索猪的李斯特菌携带情况以及屠宰加工环境中污染的可能性,并进一步对分离到的单增李斯特菌进行分型分析,以了解其分子流行病学特征,为预防控制食源性李斯特菌病提供参考。2011年3月至2012年2月每月月初定点采集某一屠宰场的猪粪便标本和加工场所环境水样标本,进行李斯特菌的病原学分离,对分离到的单增李斯特菌进行血清分型、多位点序列分型(MLST)和脉冲场电泳分型(PFGE)分析。1322份猪粪便标本和104份环境标本中,共分离到7株单增李斯特菌、56株无害李斯特菌。5株单增李斯特菌属于1/2c血清型(ST9型),1株1/2a血清型(ST199型),1株1/2b血清型(ST5型)。4株1/2c型菌株具有完全相同的PFEG带型,与另外1株1/2c型菌株具有相似带型,而与其他2株菌株(分别为1/2a型和1/2b型)的带型具有较大差异。猪的单增李斯特菌携带率较低,但存在污染加工环境的可能性,进而导致生猪肉食品受到污染。对屠宰及加工场所采取有效的消毒灭菌措施能够避免单增李斯特菌的污染和传播。
- 刘凯王艳王天姝贺春月代航于波袁雪娇叶正兴王毅许华青孟双叶长芸
- 关键词：单增李斯特菌分子分型
- 脑脊液谷胱甘肽氧化酶在阿尔茨海默病中的诊断价值被引量：5
- 2019年
- 目的通过检测阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者脑脊液(CSF)中肌酸激酶(CK)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)等活性初步研究其在AD诊断中的价值。方法使用酶学方法检测轻度认知障碍(MCI)、痴呆期AD(DAT)患者、血管性痴呆患者(疾病对照组)及健康对照组受试者CSF的CK、GPx等酶学指标。结果 DAT受试者CSF的CK显著高于MCI组、正常对照组和血管性痴呆组(P <0. 05); MCI受试者CSF的GSSG水平显著高于健康对照组和血管性痴呆组(P <0. 05); DAT受试者的GSSG水平显著高于健康对照组、血管性痴呆组和MCI组(P <0. 05),其GPx、GR和GSH显著低于健康对照组、血管性痴呆组和MCI组(P <0. 05);使用生物参考区间时,CK和GPx具有较高的阳性率和阴性率。结论 AD患者CSF中的CK等损伤性酶学标志物及GR等氧化还原酶学标志物在AD的早期诊断和疾病分期中具有一定价值。
- 刘辰庚孟双高原关小童张齐皓朱继开许清源王培昌
- 关键词：阿尔茨海默病
- 环介导等温扩增技术在嗜水气单胞菌检测中的应用被引量：2
- 2016年
- 目的建立环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)对嗜水气单胞菌检测的方法,并用临床标本对该方法进行评价。方法根据嗜水气单胞菌desA基因的保守序列设计特异性引物,利用参考质粒评价该检测体系的灵敏度;用30种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌评价该检测体系的特异性;用粪便模拟样本以及临床样本评价该检测体系的临床检测的可行性。结果 LAMP检测体系对嗜水气单胞菌重组质粒的检测灵敏度为1×102拷贝/反应体系;LAMP检测体系在检测30种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌时未出现假阳性;LAMP检测体系在粪便模拟标本中的检测下限为5×103 CFU/g;通过与qPCR技术相比较,LAMP具有更高的灵敏度以及更优秀的临床标本的检测能力。结论本研究建立的LAMP方法是首次将LAMP技术运用到了嗜水气单胞菌的检测,所需仪器设备简单,可作为一种快速的筛查方法在临床检验和基层实验室应用。
- 孟双王毅王艳叶长芸
- 关键词：嗜水气单胞菌LAMP
- 外泌体内microRNA-135a跨血脑屏障转运的初步研究被引量：9
- 2017年
- 目的初步研究外泌体内micro RNA-135a(miR-135a)跨血脑屏障和细胞转运的现象。方法提取APP/PS1双转基因小鼠脑脊液(CSF)的高miR-135a外泌体,将其注射入野生型小鼠脑室并干预SH-SY5Y细胞,检测小鼠外周血和培养基外泌体内miR-135a水平及SH-SY5Y细胞β分泌酶-1(BACE-1)的表达和活性。结果高miR-135a外泌体脑室注射能使野生型小鼠CSF和血浆外泌体miR-135a显著升高(P<0.05);经APP/PS1双转基因小鼠CSF源外泌体干预的SH-SY5Y细胞,其细胞内的miR-135a含量显著高于其他干预组和对照组(P<0.05);SH-SY5Y细胞的BACE-1活性显著降低(P<0.05),且其m RNA表达水平的变化趋势与活性变化趋势一致。结论外泌体可将脑脊液中的"高miR-135a"这一生物信号跨越血脑屏障传递至外周血,这为将血浆外泌体miR-135a作为阿尔茨海默病诊断生物标志物提供了更坚实的实验依据。
- 刘辰庚郝婷杨婷婷孟双王培昌
- 关键词：阿尔茨海默病MICRORNA外泌体
- 嗜水气单胞菌实时荧光三重TaqMan PCR快速检测体系的建立被引量：9
- 2012年
- 目的建立针对嗜水气单胞菌的高灵敏、高特异的实时荧光三重TaqMan聚合酶链式反应(PCR)快速检测体系。方法根据嗜水气单胞菌的16SrDNA、气溶素基因(aerA)和丝氨酸蛋白酶基因(ahp)的特异性序列设计引物及TaqMan探针,利用高通量实时荧光PCR检测平台探讨该检测体系的灵敏度;用29种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌评价该检测体系的特异性。结果实时荧光三重TaqMan PCR快速检测体系对嗜水气单胞菌重组质粒的检测灵敏度为1×102拷贝/反应体系;对嗜水气单胞菌基因组的检测灵敏度为5×10-2pg/反应体系;该体系的特异性引物探针在检测29种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌时未出现假阳性,整个反应在2h内完成。结论本研究建立的实时荧光三重TaqManPCR检测体系可作为嗜水气单胞菌灵敏、特异、快速的检测方法,并同时评价嗜水气单胞菌的致病潜力。
- 孟双白雪梅王艳叶长芸
- 关键词：嗜水气单胞菌PCR丝氨酸蛋白酶基因
- 虾源达卡气单胞菌全基因组分析和致病性研究
- 2023年
- 目的为了解虾源达卡气单胞菌的毒力、耐药基因分布和全基因组信息,并初步评估达卡气单胞菌的致病性。方法对虾源分离株进行分子鉴定和多位点序列分型;利用β-溶血和胞外蛋白酶实验、秀丽隐杆线虫液体毒性实验、细胞毒实验、小鼠实验及毒力基因检测研究其致病性;通过药敏实验及耐药基因检测分析其耐药特征;利用eggnog、Prophage Hunter工具对全基因组序列进行分析。结果菌株18FX22鉴定为达卡气单胞菌。该菌的致病性主要表现:有β-溶血能力和胞外蛋白酶活性;对秀丽隐杆线虫、小鼠成纤维细胞和小鼠均有致病性。经检测,该菌携带7种毒力基因和12种耐药基因,发现其对阿莫西林/克拉维酸、头孢唑林和多粘菌素3种药物有耐药性。全基因组测序结果发现:18FX22的全基因组大小为4811079 bp,GC含量为61.33%。COG注释发现18FX22共有3850个基因,具有20类功能。前噬菌体预测结果发现18FX22的基因组中含有2个前噬菌体序列。全球达卡气单胞菌的聚类结果显示该菌与GCA016729585的进化关系更近。结论本研究从商品虾分离出达卡气单胞菌,发现该菌株的毒性较强,指示应加强海鲜食品安全的管控,并为达卡气单胞菌的防治提供参考。
- 渠凤甜周海健薛佳琦杜小莉胡锦瑞崔志刚谢桂林刘辰庚孟双
- 关键词：全基因组测序前噬菌体
