孙旭东
- 作品数：21 被引量：99H指数：5
- 供职机构：清华大学化学工程系生物化工研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金中国石油化工集团公司资助项目更多>>
- 相关领域：化学工程生物学理学轻工技术与工程更多>>
- 游离细胞膜生物反应器法与固定化细胞法在丙烯酰胺微生物转化中的比较被引量：5
- 2003年
- 研究和介绍了一种新的分离方法———游离细胞法 ,并用膜生物反应器分离细胞和产品 ,使其在丙烯酰胺微生物转化中得到了成功的应用。比较了它和固定细胞法的生产工艺、生产效率、产品质量以及生产成本等因素。研究表明 ,在丙烯酰胺微生物转化中 ,游离细胞法优于固定化细胞法。
- 孙旭东史悦于慧敏沈忠耀
- 关键词：丙烯酰胺固定化细胞法膜生物反应器
- 微生物法生产丙烯酰胺的研究(Ⅱ)——腈水合酶催化反应动力学与失活动力学被引量：21
- 2002年
- 在以丙烯腈为原料 ,微生物转化生产丙烯酰胺的过程中 ,酶催化反应是过程的关键。为了了解酶催化的动力学 ,本研究以自由细胞的酶为催化剂 ,进行了腈水合酶的反应动力学和失活动力学的研究。首先研究了菌体浓度、温度、pH值、丙烯腈浓度、丙烯酰胺浓度等对腈水合酶催化反应速度的影响。结果表明 ,在这些因素中 ,温度和丙烯酰胺浓度是最主要的影响因素。 2 8℃时酶活为 5 6 5 9u mL(菌液 ) ,在 5℃时的反应速率仅为 2 8℃时的11 72 % ,相应的表观酶活为 6 6 3u mL(菌液 )。而在丙烯酰胺 45 %浓度条件下的酶活大约只有丙烯酰胺 5 %浓度下的酶活的 1 2。经过对不同温度下的反应速度的研究 ,得到腈水合酶水合反应的活化能为 6 5 5 7kJ·mol- 1 。本文进一步研究了自由细胞状态下 ,菌体浓度、pH值、温度、丙烯腈浓度、丙烯酰胺浓度对腈水合酶失活的影响 ,得到了失活动力学。结果表明 ,在这些因素中 ,对酶失活影响的最主要因素还是温度和丙烯酰胺浓度。尤其当丙烯酰胺浓度到达 35 %时 ,酶活下降得很快 ,在 5 5h后 ,酶活几乎为零。而在丙烯酰胺浓度为 10 %的情况下 ,5 5h的酶活仍然还存在约 5 0 %。试验结果还表明 ,丙烯腈对酶的稳定性的影响很小。经过数据处理 ,得到的 2 8℃的酶失活速率常数为 5℃下的 2 1
- 陈跖孙旭东史悦沈忠耀赵建勋孙小颖
- 关键词：丙烯酰胺丙烯腈腈水合酶失活动力学微生物法
- 诺卡氏菌腈水合酶基因的生物信息学研究及克隆表达
- 以腈水合酶(NHase)为代表的微生物腈代谢酶系以其温和的反应条件、高选择性和高效性,在酰胺、羧酸及其衍生物的合成中具有重要的应用价值。一株工业上应用于生物转化丙烯腈生产丙烯酰胺的诺卡氏菌株(Nocardia Sp.YS...
- 史悦孙旭东于慧敏沈忠耀
- 文献传递
- 腈水合酶基因克隆与调控表达的研究进展被引量：4
- 2004年
- 微生物腈水合酶作为新型生物催化剂得到日益广泛的应用 ,但野生菌株本身存在的酶稳定性差等问题制约了这一绿色工艺的发展 ,基因工程菌为解决这个难题开辟了新的思路。总结了各种菌株中腈水合酶的序列研究进展 ,虽然基因序列和蛋白序列同源性不高 ,但它们都以基因簇的形式存在 ,并具有相同的活性中心序列。归纳了克隆并表达腈水合酶基因的基本步骤和方式 ,并提出几种有效增强重组腈水合酶活性表达的方法。
- 史悦于慧敏孙旭东田卓玲沈忠耀
- 关键词：丙烯酰胺腈水合酶克隆化工原料基因工程菌
- 一种应用膜技术的微生物转化生产丙烯酰胺的方法
- 一种应用膜技术的微生物转化生产丙烯酰胺的方法，含下列工序：微生物菌体的培养，菌体重悬液的制备，以及用游离菌体作为生物催化剂进行丙烯腈水合反应生产丙烯酰胺，分离反应所得的丙烯酰胺水合液。其特征是用微滤膜来净化洗涤发酵液中的...
- 沈忠耀孙旭东于慧敏史悦端木勉刘正光沈瑞华顾宏军薛建菲
- 文献传递
- 游离细胞腈水合酶催化丙烯腈水合反应的双稳态反应动力学被引量：3
- 2010年
- 腈水合酶是能够催化丙烯腈水合生成丙烯酰胺的一种重要的工业酶。本研究建立了游离细胞腈水合酶催化丙烯腈水合反应的双稳态反应动力学模型,关联了底物浓度、产物浓度和温度等主要因素对反应速率(表观酶活)的影响。在实验研究的基础上,通过麦夸特及全局最优化算法求解了动力学模型。结果表明,游离细胞腈水合酶催化的双稳态反应动力学模型是比较典型的产物抑制型,当产物浓度逐渐增大时,高浓度的产物将抑制腈水合酶的活性。当底物浓度<10g·L-1时,由于底物加入反应体系时产生的局部瞬时高浓度,腈水合酶催化的丙烯腈水合反应的表观反应速率不随底物浓度变化。当底物浓度≥10g·L-1时,底物产物浓度对反应速率具有显著影响。温度对酶活的影响也十分显著,相同底物产物浓度下,28℃时的酶催化水合反应速率是15℃时的3.3倍。
- 孙云鹏于慧敏孙旭东沈忠耀
- 关键词：腈水合酶反应动力学
- 六级连续化膜生物反应工艺在丙烯酰胺生产中的应用研究
- ＜正＞ 在丙烯酰胺微生物转化的工业化应用中,基本上采用了固定化细胞的方法,一般采取简单的批式反应方式。固定化细胞催化工艺存在着不少问题,如酶活力损失严重、工艺过程复杂及后处理要求高等。许多研究者已经开始着眼于用游离细胞代...
- 孙旭东于慧敏史悦沈忠耀
- 文献传递
- 聚砜中空纤维膜在丙烯酰胺微生物转化中的应用基础研究被引量：4
- 2004年
- 将聚砜为材料的中空纤维膜组件应用于丙烯腈水合转化为丙烯酰胺的微生物转化和膜分离耦合过程,对其特性进行了初步研究.结果表明:该膜对此反应体系有很好的适用性,通过中空纤维膜使反应液和菌体得到有效的分离,实现了膜分离耦合的酶催化反应过程.20℃时,在不更新菌液的情况下,持续操作5h,丙烯腈转化率达到99%,发酵菌液可催化合成丙烯酰胺2.722g/(mL·h),产物中没有检测到副产物丙烯酸.膜材料的应用研究为长期连续化生产过程的研究打下了基础.该工艺过程以自由细胞替代固定化细胞,实现了连续化操作,具有良好的工业应用前景.
- 孙旭东史悦沈忠耀
- 关键词：聚砜中空纤维膜丙烯酰胺微生物转化膜反应器截留性能
- 六级连续化膜生物反应工艺在丙烯酰胺生产中的应用研究被引量：1
- 2006年
- 以自由细胞替代固定化细胞,成功设计了六级连续化中空纤维膜生物反应器新工艺,应用于丙烯酰胺的微生物转化过程,并对其操作工艺和可行性进行了研究。结果表明:在15℃下,该六级连续化过程稳定运行80 h时,丙烯腈的转化率达99.9%以上,丙烯酰胺产物浓度达434.23 g/L,生产效率达到0.01526 mol/(L.min),生产效率比固定化细胞批式反应提高了一倍以上,产品溶液浓度提高50%以上。中空纤维膜可以使反应液和菌体得到有效的分离,且在反应液中没有检测到副产物丙烯酸。新工艺实现了丙烯酰胺的稳定连续化生产。
- 孙旭东于慧敏罗晖沈忠耀
- 关键词：丙烯酰胺中空纤维膜生物反应器
- 六级连续化膜生物反应工艺在炳烯酰胺生产中的应用研究
- 本文以聚偏氟乙烯材料的中空纤维膜组件设计了六级连续化的膜生物反应工工艺流程,应用于丙烯酰胺的微生物转化过程.在单级膜生物反应器的研究基础上,对六级连续化工艺的可行性进行了研究.15℃下,六级连续化过程稳定运行了80h以上...
- 孙旭东于慧敏史悦沈忠耀
- 关键词：丙烯酰胺微生物转化中空纤维膜固定化细胞
- 文献传递
