孔稳稳
- 作品数:9 被引量:29H指数:3
- 供职机构:东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省高等学校科技创新团队建设计划项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 来源于拟南芥的miRNAID9及其应用
- 本发明公开了一种来源于拟南芥的miRNAID9及其应用。本发明所提供的miRNAID9,为如下(1)或(2):(1)序列表中序列1所示的RNA;(2)序列表中序列2所示的RNA。实验证明,在拟南芥中过表达miRNAID9...
- 李晶纪巍孔稳稳
- 文献传递
- 拟南芥VAM3突变体抗旱相关蛋白质组学研究
- 随着全球温室效应的不断加剧,全球极端环境的不断出现,干旱胁迫已成为在世界范围内限制作物生产力的主要环境因子之一。如何提高作物的抗旱性是提高作物生产力和保障粮食安全的重大挑战。本研究以模式植物拟南芥为研究材料,通过拟南芥表...
- 孔稳稳
- 关键词:干旱胁迫蛋白质组学
- 文献传递
- 植物转录因子最新研究方法被引量:16
- 2013年
- 转录因子可以调控众多下游基因的表达,在植物的生长发育、代谢及对外界环境的反应中起着重要作用。我们结合近年来植物转录因子的研究进展,归纳分析了高等植物转录因子研究的主要策略和最新的技术方法,并从生物信息学分析、瞬间转化技术的应用、突变体表型分析及调控网络等几个方面进行了全面阐述,为植物转录因子的预测、功能鉴定及靶基因分析等相关研究提供理论和方法的参考。
- 王传琦孔稳稳李晶
- 关键词:植物转录因子功能分析生物信息学调控网络
- 人工miRNA沉默基因的研究被引量:6
- 2014年
- 人工miRNA(amiRNA)是一种高效的基因沉默技术,其原理是以植物内源miRNA的前体为基本骨架,将其茎环结构中的miRNA/miRNA*序列替换为amiRNA/amiRNA*序列,使产生的amiRNA作用于目标靶基因,以实现对靶基因表达的抑制。以拟南芥中转录因子基因MYB28为例,介绍了amiRNA的设计基本原理和构建方法。在MYB28基因序列的3'端、5'端和中间部分分别设计了amiRNA,以拟南芥内源的miRNA 319a前体为骨架,以靶向于MYB28的amiRNA序列替代原有的miRNA 319a序列,在拟南芥中过量表达,获得的转基因植株中MYB28表达水平平均降低了86%。根据试验结果对人工miRNA沉默基因技术的特点及应用前景进行了讨论。
- 张献贺孔稳稳李勇李晶
- 关键词:RNA干扰拟南芥基因沉默
- 来源于拟南芥的miRNAID9及其应用
- 本发明公开了一种来源于拟南芥的miRNAID9及其应用。本发明所提供的miRNAID9,为如下(1)或(2):(1)序列表中序列1所示的RNA;(2)序列表中序列2所示的RNA。实验证明,在拟南芥中过表达miRNAID9...
- 李晶纪巍孔稳稳
- 文献传递
- 西兰花CYP83A1基因的克隆及序列分析被引量:3
- 2015年
- 为深入研究西兰花4-甲基亚磺酰丁基芥子油苷的合成代谢途径,对关键合成酶基因CYP83A1进行了克隆与生物信息学分析。根据前期西兰花转录组测序工作中获得的序列数据,同时参照Gen Bank数据库中拟南芥、小白菜和油菜等7种植物的CYP83A1基因CDS序列与西兰花进行比对,确定西兰花CYP83A1基因(Bo CYP83A1)的CDS序列。采用RT-PCR技术对其进行了克隆,获得Bo CYP83A1基因的CDS区序列,其全长为1 509 bp,编码502个氨基酸。预测该蛋白质的分子量为57.47 k D,理论等电点为7.1,包含2个跨膜结构域,且整个序列中不含信号肽,具有一个典型的P450结构域。氨基酸同源性分析表明,西兰花与油菜、大白菜的CYP83A1的相似性较高,均为98%。首次获得Bo CYP83A1的CDS序列,其登录号为KM111290。
- 曹阳理惠李勇孔稳稳李晶
- 关键词:西兰花芥子油苷抗癌活性
- 利用放线菌酮提高黄素单氧化酶FMO_(GS-OX1)亚细胞定位的准确性被引量:1
- 2017年
- 研究蛋白质亚细胞定位的常规方法是构建由35S启动子驱动目的基因与绿色荧光蛋白基因(GFP)融合的表达载体,在细胞中瞬时或稳定表达来确定该蛋白质在细胞中的定位。35S启动子的优势是能够获得较强的GFP信号,但同时也可能因为蛋白质合成量过大,导致部分蛋白滞留在运输途径中或出现在其真实定位以外的区域。为了解决这一问题,以模式植物拟南芥中黄素单氧化酶FMOGS-OX1为例,利用蛋白质抑制剂放线菌酮处理过量表达FMOGS-OX1-GFP融合蛋白的烟草叶片。结果表明:未经放线菌酮处理的烟草叶片表皮细胞,细胞质和内质网中均呈现了较强的荧光信号,放线菌酮处理后,内质网上的信号消失,而细胞质则呈现出稳定的信号,因此判断FMOGS-OX1合成后可能是经过内质网运输到细胞质中的。上述结果证明适当的放线菌酮处理,能够避免强启动子驱动报告基因造成的蛋白质合成过量的问题,可有效地提高蛋白质亚细胞定位的准确性。
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- 关键词:GFP放线菌酮内质网
- 脂肪族芥子油苷侧链修饰酶基因FMO_(GS-OX4)表达模式分析被引量:1
- 2013年
- 芥子油苷是一类由氨基酸衍生而来的、在植物抗生物胁迫防御性反应中起重要作用的次生代谢产物,其生物活性与侧链结构密切相关。拟南芥中有5个黄素单氧化酶FMOGS-OX1-5具有催化芥子油苷侧链上硫原子氧化的活性,使甲基硫烷芥子油苷转变为甲基亚磺酰烷芥子油苷。前期研究工作表明,在5个FMOGS-OX基因缺失突变体中,除了fmogs-ox4外均表现出芥子油苷侧链结构变化的表型。为了深入揭示FMOGS-OX4的表达特性和它对芥子油苷侧链的修饰作用,利用GFP和GUS为报告基因,系统地分析了FMOGS-OX4在不同组织中的表达情况。结果表明FMOGS-OX4主要在花梗、叶片及角果的维管组织中表达,在正常生长条件下,FMOGS-OX4表达的空间位置与芥子油苷的分布不重叠,因而,酶与底物的分离可能是fmogs-ox4没有明显表型的主要原因。
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- 关键词:拟南芥