孔宇
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学文化科学更多>>
- PCR依赖型方法构建高质量酵母基因突变文库被引量:2
- 2011年
- 针对定向进化中利用亚克隆的方法建立酵母突变文库建库周期长、效率低、库容量低、丰度低等问题,建立了一种基于体内同源重组构建酵母整合型基因突变文库的新方法。步骤为:构建目标基因的重组表达质粒;以此为模版,设计长引物片段,PCR/易错PCR/DNA Shuffling等方法扩增得到两端带有与表达载体40~70 bp同源序列的突变基因;再利用PCR扩增得到表达载体;将扩增得到的目标基因和表达载体以一定的摩尔比混合电转化酵母,目标基因和表达载体在酵母体内同源重组成为完整的表达盒,整合入酵母基因组,获得基因突变文库。对构建的突变文库进行筛选,分别得到了酶活、蛋白表达量及热稳定性提高的突变株。该方法为完全PCR依赖型(PDM),在体内构建表达盒,效率高,操作方便,将建库周期由2周缩短为3 d,将库容量从传统的103~104提高到105以上,库阳性率达到95%。
- 王睿喻晓蔚徐岩郅岩孔宇
- 关键词:同源重组毕赤酵母
- 高等教育国际化背景下行政秘书素质培养
- 2016年
- 院系行政秘书管理素质的高低直接影响高校是否能成为世界一流大学。本文分析了应对高等教育国际化,高校行政秘书要具备的能力以及专业知识与技能,阐述了行政秘书的素质培养途径,以推进我国高等学校国际化进程。
- 孔宇
- 关键词:高等教育行政秘书
- 通过基因拷贝数优化及重组菌表型优化提高华根霉CCTCC M201021脂肪酶proRCL在毕赤酵母中的表达水平
- 脂肪酶(triacylglycero]1ipase EC3.1.1.3)是广泛存在的一种酶,具有多种催化能力,在工业生产中应用范围相对较宽,例如油脂工业、制药工业、食品工业、洗涤工业和饲料工业等。本研究室从酿造浓香型大曲...
- 沙冲喻晓蔚徐岩郅岩孔宇
- 文献传递