孔凡志
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
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- 特异性敲除β-连环蛋白基因对小鼠肝缺血再灌注损伤的影响被引量：1
- 2011年
- 目的通过构建特异性敲除小鼠模型观察β-连环蛋白（13-catenin）基因在小鼠肝缺血再灌注损伤中的作用。方法应用Cre—lox系统构建肝细胞特异性敲除B—catenin基因小鼠模型，90min半肝血流阻断制造肝脏缺血再灌注小鼠模型，分为B—catenin基因敲除组及对照组，再灌注后0…3620h测血清谷丙转氨酶（ATJT）、谷草转氨酶（AST）及其肝脏组织学改变。结果肝细胞特异性敲除p—catenin基因小鼠基因表型为：ctnnb纯合（10xP／loxP）并且Alb—Cre阳性表达，Westernblot方法证实其β-catenin蛋白表达丰度明显低于对照组。再灌注3、6、20h敲除组小鼠血清ALT水平分别为282、405及128U／ml；对照组分别为221、295及101U／ml。敲除组AST水平分别为603、805及396U／ml；对照组分别为421、398及336U／ml，各时间点两组间差异均有统计学意义（P〈0．05）。其肝细胞坏死、窦状隙充血以及炎细胞浸润程度明显重于对照组。结论B—catenin对肝脏缺血再灌注引起的肝损伤起保护作用。
- 周文华霍守俊孔凡志周联明张学利
- 关键词：Β-连环蛋白缺血再灌注损伤基因敲除肝脏小鼠
- β-连环蛋白保护肝缺血再灌注损伤的机制研究
- 2011年
- 目的应用特异性基因敲除小鼠模型研究β-连环蛋白(β-catenin)对小鼠肝缺血再灌注损伤的保护机制。方法建立β-catenin基因敲除小鼠(实验组,6只)和野生型小鼠(对照组,6只)肝缺血再灌注模型,采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)法检测两组小鼠肝组织细胞凋亡;应用实时定量聚合酶链反应(PCR)技术测定两组小鼠再灌注后0、6 h时的肝细胞白细胞介素-6(IL-6)mRNA及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达水平。结果肝脏缺血再灌注0 h时,实验组肝细胞凋亡数、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA与对照组间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。缺血再灌注6 h时,实验组凋亡细胞数为(56±15)个/高倍视野,显著多于对照组的(27±8)个/高倍视野(P<0.05);实验组TNF-αmRNA、IL-6 mRNA分别为2.5±0.3、7.8±2.6,均显著高于对照组的1.1±0.1、4.8±1.3,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论β-catenin可通过抗凋亡和抗炎作用对肝脏缺血再灌注引起的细胞损伤起保护作用。
- 黄忠明霍守俊孔凡志陈建荣张学利
- 关键词：Β-连环蛋白缺血再灌注损伤基因敲除小鼠肝脏凋亡
- lumican基因在胃癌组织中的表达及其临床意义被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨lumican基因在胃癌组织中的表达及其与预后的关系。方法:采用免疫组化方法检测144例胃腺癌组织及其癌旁正常黏膜组织中lumican基因的表达情况;提取40例患者新鲜胃癌组织及对应癌旁正常黏膜组织的总RNA,逆转录成cDNA,采用实时荧光定量PCR方法检测lumican基因的表达情况,分析其表达与临床各指标的关系。结果:lumican在胃癌组织的表达率显著高于癌旁正常黏膜组织(89.6%比8.3%,P<0.01),其表达与患者性别、年龄、淋巴结转移、远处转移、脉管侵润、癌栓无相关性(P>0.05)。与浸润深度(P<0.01)、肿瘤直径(P<0.05)、肿瘤部位(P<0.05)和UICC分期(P<0.05)明显相关。胃癌组织中lumican mRNA表达水平显著高于癌旁正常黏膜组织[(2.58±1.62)比(3.95±1.34)],差异有统计学意义(P<0.05)。lumican表达阴性组、弱阳性组和强阳性组胃癌患者的术后5年总体生存率分别为86.7%、46.9%和30.9%,组间差异有统计学意义(χ2=16.927,P<0.01)。多因素COX模型分析显示,lumican表达、远处转移、肿瘤直径、国际抗癌联盟(UICC)分期和脉管侵犯是影响总体生存的独立预后因素。与lumican表达阴性组比较,强阳性组和弱阳性组有增加胃癌病死风险的趋势;强阳性组、弱阳性组与阴性组比较,强阳性组RR=4.972(95%CI:1.110～20.822)、弱阳性组RR=5.910(95%CI:1.399～24.922)。结论:lumican表达水平与胃癌增殖、侵袭能力、病理分期及总体生存率密切相关,对判断胃癌患者预后有一定的临床参考意义。
- 孔凡志李芳周文华周联明张光军黄忠明张学利
- 关键词：LUMICAN胃癌预后
- Lumican对胃腺癌腺细胞生物学特性影响及临床意义
- 肿瘤微环境在肿瘤的发生、发展和转移的各个阶段中都起着至关重要的作用。其中细胞外基质蛋白是肿瘤微环境的重要组成部分，在肿瘤中常常发现基质蛋白有异常表达，其有助于肿瘤的进展和转移，近年来研究显示，Lumican的表达与许多恶...
- 孔凡志
- 关键词：胃腺癌细胞生物学病理特征免疫印迹法
- 文献传递
- 胃癌组织中microRNA-650的表达及其生物学作用和临床意义
- 2012年
- 目的:研究microRNA-650(miR-650)在胃癌组织中的表达及其与胃癌细胞增殖、凋亡及转移的关系。方法:采用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测miR-650在胃癌组织标本及胃癌细胞株中的表达量,胃癌细胞株转染miR-650模拟剂以及miR-650抑制剂-LNA寡核苷酸后采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,采用LC-MS/MS系统定量分析筛选miR-650靶蛋白,采用蛋白质印迹检测miR-650靶蛋白RGS7的表达水平。采用裸鼠异种移植模型验证miR-650对胃癌细胞的生物学作用及其抑制剂的生物疗效。结果:胃癌细胞株KATO III、NUGC4及SGC-7901高表达miR-650,而NCI-N87及MKN-45仅微量表达miR-650。在转染miR-650抑制剂-LNA寡核苷酸后胃癌细胞增殖水平显著下降,凋亡水平显著上升。G-蛋白信号调节因子7(regulator of G-protein signaling-7,RGS7)是miR-650下游靶点之一,靶蛋白RGS7表达水平与miR-650表达水平呈负相关,miR-650抑制剂可抑制肿瘤生长。结论:胃癌细胞株中miR-650的高表达可促进胃癌细胞增殖及转移并抑制其凋亡,机制可能是通过抑制靶蛋白RGS7的表达。
- 霍守俊薛锋孔凡志李芳单远州周联明张学利
- 关键词：胃癌凋亡增殖
