姜永华
- 作品数:12 被引量:46H指数:5
- 供职机构:西北农林科技大学园艺学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金西安市科技计划项目陕西省农业科技攻关项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- AM真菌和根结线虫互作对黄瓜幼苗生理变化的影响被引量:7
- 2016年
- 以黄瓜为试材,采用盆栽方法,设置了播种30d后接种根结线虫(M.)、接种G.i 30d后接种根结线虫(G.i+M.)和接种G.v30d后接种根结线虫(G.v+M.)3个处理,研究了2种AM真菌Glomus inartradiees(G.i)和Glomus versiforme(G.v)与根结线虫Meloidogyne sp.(M.)互作对黄瓜幼苗生理变化的影响。结果表明:黄瓜幼苗受到根结线虫侵染后,叶片的PAL、PPO活性及总酚含量分别在144、72、288h达到最高;接种AM真菌提高了黄瓜幼苗PAL、PPO活性及多酚含量,表明接种AM真菌可提高黄瓜幼苗对根结线虫侵染的抗性。接种G.v和G.i真菌均使黄瓜幼苗MDA含量低于对照,降低了后期根结线虫侵染造成的膜脂过氧化伤害。综合以上分析可知,接种AM真菌G.v和G.i不仅激发了黄瓜幼苗较高的保护性酶活性,且激发了黄瓜幼苗的次生代谢物质总酚的积累,增加了植株对根结线虫的抗性,同时维护了细胞膜的完整性。G.v对黄瓜植株的保护作用要优于G.i。
- 李许真姜永华陈书霞
- 关键词:黄瓜丛枝菌根真菌根结线虫酶活性
- 苹果HD-ZipⅠ家族基因序列特征及其在果实中的激素响应被引量:6
- 2015年
- [目的]对苹果基因组中挖掘得到的HD-Zip Ⅰ(Homeodomain leucine zipper Ⅰ)家族基因进行生物信息预测,结合生理生化数据为苹果果实发育的激素调控网络研究提供最佳候选基因。[方法]应用Ex PASy进行HD-ZipⅠ家族蛋白基本理化性质分析,采用MEME和PLACE软件预测各成员启动子含有的顺式作用元件及其功能,利用GSDS绘制基因内含子/外显子结构示意图;通过内源乙烯浓度、可溶性固形物、可滴定酸、硬度等品质指标检测‘皇家嘎啦’苹果果实在不同激素处理条件下的后熟进程;运用半定量RT-PCR分析HD-Zip I家族各成员对外源激素的响应。[结果]鉴定完整的22个HD-ZipⅠ基因可以细分为5个亚类,同一亚类基因的内含子/外显子结构相似,但仍有差异;各基因起始密码子上游-600 bp区域内广泛分布多个响应赤霉素、细胞分裂素、茉莉酸、乙烯和脱落酸的顺式作用元件,以(GA/TC)8重复序列最为保守和丰富。乙烯和脱落酸两种激素处理后,果实内源乙烯浓度及硬度等各指标变化表现出极高的相似度,均加快了‘皇家嘎啦’果实的后熟进程;不同于其他各家族成员,MdHZ1和MdHZ17两个基因的转录水平在乙烯和脱落酸处理后48 h均被不同程度的上调,而在有延缓果实衰老效果的腐胺(PUT)和赤霉素(GA4)处理组中表现为下调,表明MdHZ1和MdHZ17可能与果实的后熟进程有较为紧密的联系。MdHZ16在成熟果实组织中未检测到表达,其他家族成员的激素响应特性未表现出一定的规律性,表明同一家族内即使结构相似的基因也并不一定呈现相似的表达模式,家族基因上游调控机制有一定的复杂性。[结论]通过苹果基因组扫描获得22个HD-Zip I基因,这些基因编码的蛋白结构相似度较高;基因启动子区域含有多个参与不同激素交互作用的顺式作用元件,这或许为家族成员差异响应各外源激素处理的原因;MdHZ1和MdHZ17两个基因�
- 温小红姜永华亢键王豪杰任小林
- 关键词:苹果激素后熟差异表达基因
- 苹果ACO1转录因子MdHB-1基因的克隆及其真核表达载体的构建被引量:5
- 2012年
- 【目的】通过生物信息学分析,将苹果的一段EST序列初步定性为转录因子MdHB-1基因,对该基因进行克隆和真核表达载体构建,为进一步研究其分子生物学功能奠定基础。【方法】根据番茄LeACO1转录因子LeHB-1的基因序列,对苹果EST库进行Blast,获得一段EST序列,根据该EST序列设计1对特异性引物,以"皇家嘎啦"苹果花器总RNA为材料,经RT-PCR得到1条长约1 000bp的cDNA片段,T/A克隆后进行序列测定及分析。将基因MdHB-1与真核表达载体pPICZA连接,构建真核表达载体pPICZA-MdHB-1,并导入毕赤酵母菌种GS115,通过PCR鉴定该载体的导入情况。【结果】克隆到苹果MdHB-1基因(GenBank登录号为JQ678788),其开放阅读框为1 011bp,编码336个氨基酸。Blastn和Blastp序列比对分析发现,MdHB-1与已登录的其他物种的HB-1基因相似性达50%~60%。该基因编码的氨基酸中存在保守序列HD-Zip结构域,该保守序列与已经报道的番茄LeHB-1、拟南芥AtHB-1的保守序列的同源性均大于85%。重组表达载体PICZA-MdHB-1构建正确并已成功导入酵母基因组中。【结论】成功克隆了苹果转录因子MdHB-1基因全长,并正确构建了其真核表达载体。
- 于巧平尹明安任小林姜永华
- 关键词:苹果花器真核表达载体
- 苹果转录因子MdHB1自激活作用及其互作蛋白分析被引量:1
- 2015年
- 筛选苹果转录因子MdHB1的互作蛋白,可以为研究苹果生长发育过程中各种信号分子网络提供线索和依据。本文以苹果品种‘皇家嘎啦’为试材,应用SMART技术构建酵母双杂交cDNA文库。分析MdHB1的转录活性区域并验证其对Y2HGold的细胞毒性作用,利用诱饵载体pGBKT7-MdHB1-N进行文库筛选,获得了24个阳性克隆,测序分析后得到9个无重复的MdHB1互作蛋白,其涉及光合作用、病虫害防御、逆境胁迫等过程。
- 刘艳利姜永华王豪杰戚英伟刘翠华任小林
- 关键词:SMART技术
- 一种评价成熟期苹果果实角质膜发育状况的方法
- 本发明涉及一种可以评价成熟期苹果果实角质膜发育状况的方法,在0.04-0.1MPa的真空条件下,通过对苹果进行苯胺蓝染色,测定染色前后果实的吸水量值及染色面积,评价苹果果实角质膜发育质量,本发明所述方法可以减少人为因素误...
- 任小林陈柏向春燕杨艳青于建娜姜永华樊丽
- 文献传递
- AM真菌和根结线虫互作对黄瓜生长及生理特征的影响被引量:12
- 2012年
- 通过盆栽试验研究了丛枝菌根真菌Arbuscular mycorrhiza(AM)和南方根结线虫Meloidogyneincognita互作对黄瓜幼苗生长及生理特征的影响。结果表明,预先接种地表球囊霉Glomus versi-forme再接种线虫处理的鲜、干重较只接种线虫的处理显著增加;预先接种AM真菌再接种线虫处理的根结线虫病情指数、AM真菌侵染率较只接种线虫的处理明显降低;接种线虫使黄瓜植株的过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)及苯丙氨酸解氨酶(PAL)、总酚含量有不同程度提高,其中预先接种根内球囊霉G.intraradices对黄瓜植株起到了较好的保护作用;与对照相比,只接种线虫处理的叶片磷含量降低了25.26%,预先接种AM真菌再接种线虫处理的叶片磷含量较只接种根结线虫的含量高。
- 陈书霞姜永华刘宏久程智慧
- 关键词:黄瓜AM真菌根结线虫生理特征
- 苹果MdHB-1基因启动子中的乙烯响应元件对外源乙烯的响应分析被引量:3
- 2016年
- 通过PlantCARE和PLACE软件在线分析预测表明,在苹果Md HB-1启动子中存在一个乙烯响应元件(距ATG上游576 bp)。为了探究该启动子中的乙烯响应元件对不同浓度乙烯的响应,以苹果品种‘皇家嘎拉’(Malus domestica Borkh.cv.Royal Gala)基因组DNA为模板,用PCR方法扩增得到长度分别为680 bp(含有乙烯响应元件)和485 bp(不含有乙烯响应元件)的启动子序列,构建GUS报告基因瞬时表达载体,依靠农杆菌介导转化烟草叶片,检测经过不同浓度乙烯利(0、500、1 000和1 500mg·L^(-1))处理的转基因烟草叶片的GUS蛋白活性。结果表明,该乙烯响应元件受到外源乙烯正调控作用,随着处理的外源乙烯浓度的增大,正调控效应先升高达到最大值后逐渐减弱,500 mg·L^(-1)乙烯利能最大程度地提升乙烯响应元件活性。
- 王豪杰姜永华刘艳利戚英伟刘翠华任小林
- 关键词:苹果
- 苹果果实HD-ZipⅠ转录因子亚家族基因鉴定及表达分析被引量:5
- 2014年
- 转录因子在调控苹果果实成熟衰老过程中起到至关重要的作用。利用生物信息学方法从苹果基因组数据库筛选出22个HD-ZipⅠ转录因子家族成员并进行分类。通过对不同组织基因表达特异性分析,筛选出6个在成熟果实中表达的基因,进一步分析其在果实成熟贮藏过程中的表达差异。实时荧光定量PCR分析结果表明,在‘富士’果实采后贮藏过程中,有3个家族成员的表达与乙烯存在不同程度的联系,其中MdHZ 6在果实常温贮藏中的表达与内源乙烯含量变化有较高的相关性,且均在35d达到峰值;MdHZ 15和MdHZ 17在内源乙烯高峰之前有显著上调,预测三者与苹果的成熟衰老相关。
- 亢键姜永华王豪杰杨艳青任小林
- 关键词:苹果转录因子
- 苹果HD-Zip I亚家族转录因子鉴定及其与乙烯的关系
- 利用苹果基因组筛选同源异形盒家族基因,通过qRT-PCR 探索它们在苹果各器官组织与激素处理的表达特性,并分析其表达与乙烯和果实后熟的关系。结果表明,苹果中有鉴定完整的22个HD-Zip I亚家族基因。
- 姜永华亢键温小红王豪杰刘翠华任小林
- 关键词:苹果果实乙烯
- 转录因子MdHB1调控‘澳洲青苹’苹果花青苷合成的分子机制研究
- 果实着色情况在很大程度上影响了果实的商品特性和营养价值。苹果(Malus×domestica)果皮和果肉的红色性状主要是由花青苷累积造成的,红肉苹果因富含花青苷而具有重要的经济和生物学价值。花青苷积累调控机制的研究对果实...
- 姜永华
- 关键词:苹果育种转录因子花青苷合成分子机制
- 文献传递