唐迎胜
- 作品数:4 被引量:4H指数:1
- 供职机构:中南大学湘雅医学院生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖南省自然科学杰出青年基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- K562细胞定向表达cDNA文库的快速构建被引量:3
- 1996年
- 采用一步法快速从培养的K562细胞中抽提、纯化mRNA,逆转录成cDNA分子后,通过在cDNA分子两端加EcoRI适配子、T4多核苷酸激酶作用下磷酸化、NotI内切酶消化、过SepharoseCL-4B柱等步骤,与λExCell/NotI/EcoRI/CIP载体连接,然后用包装蛋白在体外包装连接产物,感染E·ColiNM522以构建cDNA文库。经检测:该文库含有1.0×106个重组子,cDNA分子长度在0.4~8.5k6范围,扩增后的滴度达1.2×1010pfu/ml,完全达到筛选低表达基因的要求,为从K562细胞中克隆新的锌指蛋白cDNA基因奠定了基础。
- 刘智唐迎胜周钢曾海涛朱定尔
- 关键词:白血病K562细胞CDNA文库锌指蛋白
- 多发性骨髓瘤恶性相关基因MYEOV2对NIH/3T3细胞生长的影响被引量:1
- 2004年
- 目的 分析多发性骨髓瘤恶性相关基因MYEOV2对NIH/ 3T3细胞生长的影响。方法 将MYEOV2基因克隆到真核表达载体pcDNA3 1( +)上 ,并将阳性重组子通过脂质体转染入NIH/ 3T3细胞中 ,G418筛选获得转染阳性克隆并用RT -PCR检测MYEOV2基因的表达。运用流式细胞分类法、细胞生长曲线分析MYEOV2基因对NIH/ 3T3细胞生长的影响。结果 成功获得转染pcDNA3 1( +) /MYEOV2的细胞阳性克隆。流式细胞分析显示转染pcDNA3 1( +) /MYEOV2、转染空载体及未转染的NIH/ 3T3细胞的S期细胞分别为 3 0 9%、2 0 1%、16 1% ,前者较后两者S期细胞增多 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。细胞生长曲线显示转染pcDNA3 1( +) /MYEOV2、转染空载体、未转染的NIH/ 3T3细胞的倍增时间分别为 13 6h、2 5 3h、2 7 4h ,前者细胞倍增时间较后两者缩短 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 MYEOV2基因的表达增加促进DNA合成增加 ,细胞增殖加快 。
- 汤立军胡维新唐迎胜江元山罗赛群刘静
- 关键词:多发性骨髓瘤NIH/3T3细胞生长细胞周期肿瘤
- 8例葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的快速基因诊断
- 1995年
- 8例葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的快速基因诊断湖南医科大学分子生物学研究室(410078)唐迎胜,谢慎思,彭兴华,朱定尔葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphatedehydrogellase,G6PD)缺乏症是人类最常见的遗传性酶...
- 唐迎胜谢慎思彭兴华朱定尔
- 关键词:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因诊断缺乏症基因突变分析产前基因诊断分子生物学研究
- 一个新的C2H2型锌指蛋白cDNA基因的克隆
- 2001年
- 目的 :从K5 6 2细胞中克隆新的锌指蛋白cDNA基因片段。方法 :提取K5 6 2细胞中总RNA ,逆转录后 ,用CX2C和H -CLink引物进行加端PCR ,扩增产物经限制性内切酶酶切后 ,重组至 pGEMTZf(+ )载体 ,用末端终止法测定插入片段的序列。结果 :测出五个插入片段的序列。与GenBank核酸数据库中的已知序列进行同源性比较分析 ,发现一个序列为新的cDNA基因片段。该基因编码产物至少含有五个C2H2型锌指结构。结论 :从K5 6 2细胞中克隆出一个新的C2H2型锌指蛋白cDNA基因片段 ,为测定该基因的全序列和功能研究奠定了基础。
- 曾海涛周钢唐迎胜刘智胡维新
- 关键词:克隆C2H2型锌指蛋白CDNA基因