周树民
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
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- Toll样受体信号通路可促进IL-17RA在神经胶质细胞中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的：研究IL-17R在神经胶质细胞中的表达是否会受到Toll样受体（TLR）信号通路的调节及可能的调节方式。方法免疫诱导B6小鼠发生实验性自身免疫性脑脊髓炎（ experimental autoimmune encephalomyelitis ， EAE），real-time PCR检测Il17ra、Il17rc在脑及脊髓组织中的表达。组织化学染色显示脊髓组织的脱髓鞘情况、IL-17 RA阳性及CD3阳性细胞的分布。在Rag1-/-小鼠中进行相同测定，以判断IL-17RA在EAE小鼠脊髓组织中的高表达是否与CD3细胞的侵润有关。以不完全弗氏佐剂（IFA）与TLR的配体相配伍替代CFA免疫B6小鼠，检测Il17ra在中枢神经系统（CNS）中的表达。自新生小鼠脑组织分离星形胶质细胞、小胶质细胞及少突胶质细胞进行体外培养，以TLR的配体进行干预，qPCR及Western blot测定其中IL-17RA的表达。进而以IL-17A及LPS协同干预体外培养的星形胶质细胞，ELISA检测培养基中CCL2、CXCL8及IP-10等趋化因子的含量。结果 EAE小鼠CNS中存在Il17 rc的高表达，脊髓组织有明显的脱髓鞘病变、大量IL-17阳性细胞分布及CD3细胞侵润。在Rag1-/-小鼠中的测定结果则提示，CNS中IL-17 RA的高表达与T淋巴细胞的侵润无关。IFA与TLRs配体相协同即可体内促进Il17rc在小鼠CNS中的表达。体外实验也证实，某些TLR配体，特别是LPS及polyI∶C，可直接上调Il17rc在星形胶质细胞、小胶质细胞及少突胶质细胞中的表达。 LPS与IL-17RA相协同可显著刺激体外培养的星形胶质细胞分泌趋化因子，其效力远高于两者的单独作用。结论某些TLR信号通路可直接刺激IL-17 RA在神经胶质细胞中的表达。所表达的IL-17R为功能性受体，可刺激胶质细胞分泌趋化因子。
- 周树民陈松刘国萍郭洁汪志云梁东春
- 关键词：TOLL样受体胶质细胞
- Toll样受体增强树突状细胞中腺苷受体A2B亚型的表达及功能
- 2014年
- 树突状细胞(dendritic cell,DC)表面所表达的腺苷受体A2B亚型(ADOR-A2B)可促进DC对辅助性T淋巴细胞(T helper cell,Th)的激活,导致自身免疫性疾病的发生或加重.本文旨在研究作为免疫反应的诱导分子Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是否可调节ADOR-A2B在DC中的表达并籍此影响其功能.体外诱导小鼠骨髓细胞分化为树突状细胞(BM-DC),以多种TLRs的配体,Pam3csk4、polyIC、LPS及CpG进行干预.提取细胞总RNA,real-time PCR测定ador-a2a、ador-a2b的表达;放射性配体结合实验测定BM-DC对3H-腺苷结合能力的变化.以LPS及选择性ADOR-A2B激动剂BAY 60-6583协同干预BM-DC,ELISA测定培养基中IL-1、IL-6及IL-12的含量.以干预后的BM-DC刺激naive CD4细胞,ELISA测定培养基中IL-17A、IFNγ的含量,荧光抗体染色及流式细胞仪分析检测CD4细胞的分化.结果显示,TLR-4的配体LPS可显著提高BM-DC中ador-a2b的表达及对腺苷的结合能力.BAY 60-6583与LPS相协同可刺激BM-DC分泌多种致炎因子,并增加其诱导CD4细胞向Th1及Th17分化的能力.由此可见,Toll样受体可上调adora2b在DC中的表达,并可籍此增加DC分泌促炎因子的能力及对CD4细胞的刺激作用.
- 周树民赵嵘左爱军
- 关键词：树突状细胞TOLL样受体腺苷受体
- 腺苷受体A1亚型对视网膜色素上皮细胞免疫调节功能的影响
- 2018年
- 目的研究视网膜色素上皮细胞(RPE)主要是通过何种亚型的腺苷受体(ARs)来结合腺苷,及其对RPE功能的影响。方法体外培养人ARPE-19细胞系,定量PCR检测4种腺苷受体(ARA1、ARA2A、ARA2B、ARA3)基因的表达;提取细胞膜蛋白,Western blot检测4种腺苷受体在RPE细胞膜上的存在。体外培养ARPE-19细胞至80%融合后随机分为A^E组。其中,A组为无干预对照组,B^E组分别给予ARA1拮抗剂DPCPX(50 nmol/L)、ARA2A拮抗剂SCH58261(100 nmol/L)、ARA2B拮抗剂MRS1754(100 nmol/L)及ARA3拮抗剂MRS1220(5μmol/L)干预。利用H3-腺苷进行放射性配体结合实验,计算各组细胞对腺苷的最大结合容量(Bmax)。以肿瘤坏死因子α(TNF-α)10μg/L及γ干扰素(IFN-γ)1 000 U/m L联合干预体外培养的ARPE-19细胞,给予或不予ARA1激动剂(CCPA),酶联免疫吸附试验(ELISA)测定培养上清中白细胞介素(IL)-6、IL-10、转化生长因子β(TGF-β)、单核细胞趋化因子(MCP)-1、趋化因子C-X-C配体10(CXCL10,IP-10)的含量。结果在ARPE-19细胞中即可检测到4种腺苷受体基因的表达,也可探测到其分子在细胞膜上的存在。A^E组ARPE-19细胞结合腺苷的Bmax(单位:fmol)分别为2.04±0.31、0.44±0.06、1.82±0.28、2.01±0.42及2.06±0.44,其中B组较其他各组Bmax均降低(P<0.01)。以TNF-α及IFN-γ激活ARPE-19细胞,与对照RPE组比较,CCPA干预RPE组IL-6、MCP-1及IP-10的含量降低、IL-10的含量增加(P<0.01)。2组TGF-β的含量差异无统计学意义。结论 ARA1对ARPE-19细胞结合腺苷的能力具有重要的调控作用,ARA1受体介导的信号可抑制ARPE-19细胞分泌促炎因子及驱化因子,具有潜在的免疫抑制作用。
- 孔繁强周树民张伟陈松
- 关键词：受体视网膜色素上皮细胞
- 基质金属蛋白酶-9调控CD73自视网膜色素上皮细胞膜表面脱落机制的初步研究被引量：1
- 2017年
- 目的探讨基质金属蛋白酶（MMP）-9调控CD73自视网膜色素上皮（RPE）细胞膜表面脱落的机制。方法以脂多糖及肿瘤坏死因子-α共同干预体外培养的人RPE细胞，诱导RPE细胞膜表面CD73脱落。同时给予磷脂酶C（PLC）抑制剂ET-18-OCH，30．0gmol／L或广谱MMP抑制剂ONO-48175．0gmol／L进行干预；流式细胞仪检测RPE细胞膜表面CD73含量变化。以选择性MMP．2、MMP-9抑制剂或相应siRNA进行干预；利用基因定点突变技术改造CD73中潜在的MMP．9识别位点，在CD73^-/-。RPE细胞中过表达野生型（Wt）及突变型（Mut）CD73，检Nwt、Mut．CD73脱落情况。结果广谱MMP抑制剂可有效抑制CD73自RPE细胞膜表面脱落；PLC抑制剂不能抑制CD73自RPE细胞膜表面脱落。选择性抑制MMP-9活性或以siRNAT调MMP-9的表达也均可抑制CD73自RPE细胞膜表面脱落。表达于CD73。RPE细胞膜表面的Wt．CD73可发生脱落，而Lys^547Phe^548编码位点突变的CD73未见脱落。结论MMP．9通过水解Lys^547Phe^548位点而参与炎症状态下CD73自RPE细胞膜表面的脱落。
- 孔繁强周树民陈松
- 关键词：视网膜色素上皮
- 基质金属蛋白-9抑制剂阻断视网膜色素上皮细胞表面CD73脱落防治实验性自身免疫性葡萄膜炎的初步研究被引量：3
- 2020年
- 目的:初步探讨MMP-9抑制剂阻断RPE细胞表面CD73脱落,防治实验性自身免疫葡萄膜炎(EAU)的机制。方法:体外培养分离自野生型C57BL/6小鼠及CD73基因敲除(CD73-/-)小鼠的RPE细胞,以脂多糖及TNF-α共同干预,诱导RPE表面CD73脱落。依据是否同时加入MMP-9抑制剂CTK8G1150(终浓度5.0μmol/L),将两种小鼠培养的RPE细胞分别设为MMP-9抑制剂干预组及无干预对照组。每组细胞给予溶媒、1μmol/L单磷酸腺苷(AMP)、1μmol/L AMP及3μmol/L 5'-α,β-亚甲基-二磷酸腺苷(APCP)(AMP+APCP)进行干预。氚化胸苷掺入法检测不同组别RPE细胞对CD4+T细胞增生的刺激作用。分别以野生型B6小鼠及CD73-/-小鼠为受体,过继免疫诱发EAU。受体小鼠分别随机分为MMP-9抑制剂干预组及未干预对照组,于过继免疫后4、7、10 d视网膜下腔分别注射CTK8G1150或溶媒。实时定量PCR(RT-PCR)、Western blot法检测受体小鼠RPE细胞中CD73 mRNA及蛋白表达。组间比较采用单因素方差分析。结果:刺激方式为AMP时,C57BL/6 MMP-9抑制剂干预组CD4+T细胞的增生能力较无干预组显著下降,差异有统计学意义(F=13.28,P<0.01);溶媒、AMP+APCP时,两组CD4+T细胞增生能力比较,差异无统计学意义(F=7.78、6.58,P>0.05)。CD73-/-MMP-9抑制剂干预组、无干预组不同刺激方式CD4+T细胞增生能力比较,差异均无统计学意义(F=5.24、6.12、7.04,P>0.05)。RT-PCR检测结果显示,B6受体小鼠MMP-9抑制剂组、无干预对照组RPE细胞中CD73 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(F=6.54,P>0.05)。Western blot检测结果显示,B6受体小鼠MMP-9抑制剂组RPE细胞中CD73蛋白表达较未干预对照组显著增加,差异有统计学意义(F=15.24,P<0.01)。结论:MMP-9抑制剂阻断RPE细胞表面CD73的脱落对EAU具有保护作用。
- 周树民孔繁强陈松
- 关键词：视网膜色素上皮
- 急性心肌梗塞患者血小板计数及平均血小板体积的观察被引量：3
- 2000年
- 目的 :观察和分析急性心肌梗塞 ( AMI)时血小板计数 ( BPC)及平均血小板体积 ( MPV)的变化。方法 :用 MICRO- OT- 1 8型全自动血细胞分析仪对 52例 AMI患者的 BPC和 MPV进行测定 ,并与 50例健康查体者的检测值做对照。结果 :发现 AMI患者的 BPC比对照组显著减少 ( P<0 .0 1 ) ,MPV比对照组显著增大 ( P<0 .0 5)。结论 :AMI患者冠状动脉血栓的形成可能与 MPV增大有一定关系 ,而与血小板的数量关系不大。
- 曹风林李立丰陈宗铠周树民刘延庆
- 关键词：急性心肌梗塞血小板计数平均血小板体积
- 腺苷受体A2B亚型增加肠黏膜树突状细胞对Crohn’s病的致病性被引量：1
- 2014年
- 目的研究Crohn’S病存在时其肠黏膜树突状细胞（dendriticcell，DC）中腺苷受体（ADOR）A2A及A2B的表达是否发生了变化，及对DC的功能产生了何种影响。方法自不同来源的肠组织中分离肠黏膜pc（mucosaDC，mDC），real—timePCR测定ador-a2a及a2b基因的表达；放射性配体结合实验测定腺苷与mDC的结合能力及受体选择性。选择性激活mDC中的ADOR—A2A及A2B通路，以此DC刺激分离的CIM’细胞，ELISA测定细胞因子的分泌，荧光抗体染色及流式细胞仪分析检测CIM’细胞的分化。分离外周血单个核细胞（PBMC）诱导分化为树突状细胞（Mo-DC），以不同Toll样受体（TLR）的配体进行干预，测定ador—a2a及a2b基因的表达；选择性激活Mo—DC中的ADOR—A2B通路，检测其对CD4’细胞的刺激作用。结果Crohn’s病患者肠黏膜DC中ador—a2b基因的表达显著升高，该受体被激活后可刺激mDC分泌IL-1、IL-6及IL—12，并可促进CIM’细胞向Th1、Th17细胞的分化。TLR2的配体pam3csk4或TLR4的配体LPS可促进Mo—DC中ador—a2b基因的表达；该受体与LPS相协同显著增加Mo—DC的致病性。结论Crohn’S病肠黏膜DC中存在腺苷受体A2B亚型的高表达，该受体可增加mDC的致病功能且其在DC中的表达会受到某些T0u样受体通路的调节。
- 赵嵘周树民左爱军
- 关键词：树突状细胞腺苷受体
- 先兆子痫生物标志物的研究进展被引量：2
- 2018年
- 先兆子痫因缺乏明确的疾病病因,诊断和治疗手段效果欠佳,仍是引起孕产妇和胎儿死亡的主要原因。目前先兆子痫的生物标志物包括细胞因子、蛋白、血管生成因子和抗血管生成因子,这些因子参与先兆子痫的发病机制,成为影响其致病的因素。目前已发现的评估先兆子痫有效性的生物标志物,在诊断先兆子痫的不同阶段时却是无效的。尚未发现可以早期诊断先兆子痫的单一生物标志物。然而,胎盘衍生的外泌体是合胞体滋养细胞的重要组成部分,未来可能成为先兆子痫的最佳生物标志物。
- 程颖周树民
- 关键词：先兆子痫生物标志物细胞因子外泌体
