周晓波
- 作品数：4 被引量：147H指数：3
- 供职机构：哈佛大学更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人乳头瘤病毒致癌机制的研究进展被引量：2
- 2007年
- 人乳头瘤病毒(HPV)是一种常见的小DNA双链病毒,主要感染上皮黏膜细胞,引起良性乳头瘤病变和恶性肿瘤,高危型HPV在子宫颈癌组织中的检出率可高达90%以上。E6和E7是HPV最重要的两个病毒癌基因,在病毒整合入宿主细胞基因组后可持续表达,并分别与细胞内重要的抑癌基因p53和pRb的蛋白产物相互作用,阻遏其对细胞增殖分化的负调控,从而诱发细胞恶性转化。此外,E6和E7表达还可影响基因组稳定性。
- 周晓波徐宁志
- 关键词：人乳头瘤病毒病毒癌基因基因组稳定性
- 抗凋亡基因survivin促进细胞转化的作用机制被引量：115
- 2002年
- 目的 探讨抗凋亡基因survivin在细胞转化中的作用机制。方法 利用RT PCR获得survivin编码区序列 ,双酶切后 ,将其定向克隆至原核和真核表达载体 ;生长曲线观察高表达survivin对细胞增殖的影响 ;软琼脂集落形成实验观察细胞的接触抑制生长能力 ;WesternBlot检测survivin高表达引起的蛋白质分子改变。结果 通过分子克隆 ,构建survivin原核和真核表达载体 ,并可在大肠杆菌和真核细胞中表达。生长曲线表明 ,转染survivin的 2 93细胞的增殖速度略快于对照细胞 ,尤其在细胞生长至高密度时 ;Survivin可以明显提高 2 93细胞的软琼脂集落形成能力 ;Survivin的高表达可以引起癌基因cyclinD1和c myc的蛋白表达水平增高。结论 抗凋亡基因survivin具有促进细胞转化的作用 ,这种作用可能依赖于cyclinD1和c
- 朱红霞刘爽周翠琦周晓波张帆全兰平徐宁志
- 关键词：基因表达细胞转化肿瘤抗凋亡基因SURVIVIN
- HPV16 E7蛋白对TNF-α诱导食管癌细胞凋亡及其机制的探讨被引量：10
- 2013年
- 目的:探讨HPV16E7蛋白表达对TNF-α诱导的食管癌细胞凋亡的作用及其机制。方法:构建HPV16E7蛋白高表达的食管癌细胞系KYSE150,药物处理后利用流式细胞学检测及PARP蛋白的切割来鉴定细胞凋亡。蛋白质印迹法检测代表AKT活性的AKT473位丝氨酸磷酸化水平,荧光素酶报告基因实验检测Survivin的转录活性。结果:TNF-α与放线菌素D可以诱导食管癌细胞KYSE150发生细胞凋亡。空载细胞的细胞凋亡率从0h的1.2%增加到10h的12.1%和20h的26.5%;E7高表达的KEYE150细胞凋亡率从0h的2.5%增加到10h的20.9%和20h的40.5%。与空载相比,HPV16E7表达的细胞凋亡率明显增多,在处理20h后E7表达的KYSE150细胞凋亡率为对照细胞的1.53倍。HPV16E7高表达的KYSE 150细胞PARP的116×103条带弱于对照细胞,而89×103条带则明显强于对照组。KYSE150GFP-E7细胞AKT143丝氨酸磷酸化水平仅为对照细胞的57.4%。TNF-α/ACD处理可以引起AKT磷酸化水平升高,但KYSE150GFP-E7细胞中AKT磷酸化水平的升高仍低于对照细胞。E7蛋白表达使得Survivin启动子区活性下调42.8%,而外源性过表达c-AKT及持续活化型AKT(myr-AKT)则使Survivin启动子区活性回复。外源性过表达AKT可以拮抗HPV16E7对于TNF-α诱导的细胞凋亡的促进作用。结论:初步研究结果提示,HPV16E7蛋白表达可促进TNF-α诱导的食管癌细胞凋亡,其分子机制可能是抑制AKT-Survivin通路。
- 朱红霞周晓波刘梅全兰平徐宁志
- 关键词：TNF-Α细胞凋亡
- 突变型Survivin逆转HeLa细胞恶性表型的研究被引量：25
- 2003年
- 背景与目的:在大多数肿瘤组织中都发现了survivin的异常高表达现象,这说明survivin在肿瘤发生中具有重要作用。本文的目的在于研究突变型survivin对肿瘤细胞恶性表型的影响,并初步探讨其可能机制。方法:构建突变型survivin的表达载体,转染HeLa细胞,通过G418筛选,得到稳定表达的细胞克隆;利用流式细胞仪分析HeLa细胞的凋亡;通过Westernblot检测突变型survivin对细胞周期蛋白的影响。结果:突变型survivin表达质粒在HeLa细胞中表达良好,利用相应的抗体可以检测到其表达的蛋白;表达突变型survivin的HeLa细胞与正常对照相比,克隆形成能力明显减弱;瞬时转染突变型survivin的HeLa细胞可以自主发生凋亡;而且,突变型survivin还可以使多核HeLa细胞增多,survivin-N端的作用比survivinT34A更明显;突变型survivin可以影响周期蛋白的cyclinD1,使其蛋白水平分别下降了68%和12%。结论:突变型survivin可以部分逆转HeLa细胞的恶性表型,cyclinD1蛋白水平下降可能是其发挥作用的重要机制之一。
- 朱红霞周翠琦张果周晓波刘爽白瑾峰全兰平董志伟徐宁志
- 关键词：逆转肿瘤细胞
