周宇箭
- 作品数:7 被引量:21H指数:3
- 供职机构:重庆医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市教委科研基金重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 上调RI对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞EMT及转移的影响被引量:1
- 2016年
- 目的研究核糖核酸酶抑制因子基因表达对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞EMT及转移的影响。方法构建RI真核表达质粒p IRES2-EGFP-RI,稳定转染B16-F10细胞。RT-PCR、Western blot和免疫荧光检测RI的表达;HE染色及相差显微镜观察细胞形态;FITC标记的鬼笔环肽染色,激光共聚焦观察细胞骨架;黏附实验、划痕实验和Transwell法检测细胞黏附、迁移和侵袭能力的变化;Western blot检测EMT及转移相关蛋白的表达;分别将各组B16-F10细胞眼眶静脉注射到c57/BL小鼠,建立肺转移动物模型,注射3周后处死小鼠。取肺称重,在解剖镜下计数肺转移结节数;肺组织切片HE染色观察肿瘤细胞转移;免疫组化检测肺转移瘤组织中转移及EMT相关蛋白的表达。结果 RI表达上调后,细胞由间质型向上皮型转换,细胞骨架重排;B16-F10-RI细胞组黏附、迁移和侵袭能力下降;与对照组相比,B16-F10-RI细胞中MMP2、MMP9、snail、slug、vimentin、twist和N-cadherin的表达明显降低,而E-cadherin,nm23-H1蛋白的表达明显增加(P<0.01或P<0.01)。实验组与对照组比小鼠肺的转移结节明显减少,同时EMT及转移相关蛋白在瘤组织中表达与体外细胞一致。结论上调核糖核酸酶抑制因子能够显著抑制B16-F10细胞EMT及侵袭、转移,RI可望作为治疗黑色素瘤的靶蛋白。
- 周宇箭潘湘阳陈俊霞
- 关键词:核糖核酸酶抑制因子EMT
- 一种不脱钙骨切片的染色方法
- 本发明属于生物医学技术领域,具体公开了一种不脱钙骨切片的染色方法,包括如下步骤:将骨组织用金刚刀切片机切片后,用磨片机打磨成厚度为15‑25μm的骨切片,将骨切片脱水后,用松香染色,再用中性树胶封固,得到染色的不脱钙骨切...
- 周宇箭蒋玲芳秦启忠
- 文献传递
- pIRES-IL-24-PTEN双表达载体的构建及鉴定被引量:1
- 2012年
- 目的构建携带人IL-24和10号染色体缺失的磷酸脂酶与PTEN双基因的真核表达载体,为研究其表达产物的抑癌机制提供基础。方法通过PCR方法获得PTEN、IL-24基因片段,进行T-A克隆,再酶切亚克隆到pIRES载体,酶切、测序鉴定正确后命名为pIRES-IL-24-PTEN载体。脂质体转染A549细胞,提取细胞的总蛋白,Western blot检测IL-24和PTEN蛋白的表达。结果酶切、测序显示pIRES-IL-24-PTEN载体序列正确,Western blot检测到IL-24和PTEN蛋白表达。结论成功构建pIRES-IL-24-PTEN载体,为后续研究奠定基础。
- 丁嵩涛彭惠民周宇箭刘含登
- 关键词:PTENIL-24肿瘤基因治疗
- 沉默FNBP1表达诱导7703细胞形态重塑被引量:3
- 2010年
- FNBP1在真核细胞中广泛表达,能通过诱导细胞膜管状化、内陷或变形及后续膜曲率依赖性肌动蛋白聚合过程,参与细胞内吞和运动;还可参与端粒维持及FasL与溶酶体结合过程的调控。研究发现,在肝癌细胞7703中,利用RNA干扰(RNA interferencetechnology,RNAi)技术使内源FNBP1基因表达沉默以后,7703细胞形态发生重塑,由上皮样转变为树状分枝的纤维状,表明FNBP1在细胞形态维持过程中亦具有不可或缺的潜在作用;通过对已知FNBP1蛋白相互作用情况的分析推断,FNBP1可能是通过对肌动蛋白骨架动态组装过程的分子调控参与7703细胞形态的控制。
- 林明明张乾英王蕴红周宇箭张军
- 关键词:RNA干扰肌动蛋白
- 拓扑替康诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的初步研究被引量:6
- 2002年
- 背景与目的:拓扑替康(topotecan,TPT)是新一代水溶性、半合成喜树碱类衍生物,系拓扑异构酶I抑制剂、细胞周期特异性抗肿瘤药物;肝癌为我国发病率居第三位的恶性肿瘤,现有治疗方法的临床疗效均不理想。本文研究TPT诱导肝癌细胞株HepG2凋亡的作用,及其细胞毒作用。方法:运用MTT、HE染色、透射电镜、流式细胞仪、免疫组化技术等实验方法,对TPT杀伤HepG2细胞的程度进行了测定并观察了其诱导凋亡的过程。结果:TPT能通过诱导HepG2细胞凋亡的方式,杀伤HepG2细胞,TPT对HepG2细胞具有较强的体外杀伤作用,并存在明显的剂量、时间依赖关系,IC50约为95μg/L。TPT将HepG2细胞阻断在S期,并进一步诱导其凋亡。凋亡形态特征表现为典型的间期凋亡:细胞核染色质固缩,呈新月形聚集于核膜周缘,胞质浓缩,出现空泡。在TPT诱导HepG2细胞凋亡的过程中,不影响bcl-2基因蛋白正常表达(P>0.05)。结论:TPT能诱导HepG2细胞凋亡,细胞毒性较强。
- 张军蒲淑萍周宇箭
- 关键词:肝癌拓扑替康肝癌细胞株HEPG2细胞凋亡
- 一种不脱钙骨切片的染色方法
- 本发明属于生物医学技术领域,具体公开了一种不脱钙骨切片的染色方法,包括如下步骤:将骨组织用金刚刀切片机切片后,用磨片机打磨成厚度为15‑25μm的骨切片,将骨切片脱水后,用松香染色,再用中性树胶封固,得到染色的不脱钙骨切...
- 周宇箭蒋玲芳秦启忠
- 文献传递
- 2型糖尿病合并高血压患者血清NO、NOS水平的研究被引量:10
- 2004年
- 目的 通过对 2型糖尿病 (2 - DM)合并高血压 (EH)患者血清一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)的测定 ,探讨其在 2 - DM合并 EH发生发展中的意义。方法 设正常对照组、单纯 2 - DM组和 2 - DM合并 EH组 ,分别测定血糖、胰岛素、血脂、NO及 NOS。结果 2 - DM合并 EH组空腹胰岛素 (FINS)、舒张压 (DBP)和收缩压 (SBP)等均显著高于单纯 2 - DM组和正常对照组 ;胰岛素敏感指数 (ISI)和 NO均显著低于其他两组。相关分析显示 NO与 FINS和血压呈明显负相关 ,与 ISI呈显著正相关。结论 血清中 NO含量与胰岛素抵抗和血压密切相关 ,2 - DM患者血清 NO水平的降低可能参与了 2 - DM患者合并 EH的发病。
- 郭风劲彭惠民张政晏宁周宇箭魏倩萍
- 关键词:2型糖尿病合并症高血压血清NOS一氧化氮一氧化氮合酶