吴锋
- 作品数：11 被引量：44H指数：4
- 供职机构：温州医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 输血前感染性指标检测结果分析及其意义被引量：12
- 2006年
- 目的了解患者输血前血液感染性指标的阳性率,探讨其检测的意义。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中乙型肝炎病毒标志物(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(抗HCV-IgG)、梅毒螺旋体抗体、人类免疫缺陷病毒抗体(H IV1+2抗体)。结果HbsAg的阳性率为10.38%,抗HCV-IgG的阳性率为1.04%,梅毒的感染率为1.59%,H IV抗体的阳性率为0.05%。结论对患者进行输血前感染性指标检测可了解受血者输血前状况,避免和预防患者院内感染和医护人员的职业感染,可以减少不必要的医疗纠纷,为举证倒置提供有力的证据。
- 王珏程茂良吴锋
- 关键词：输血前
- 温岭市孕妇TORCH五项感染检测结果分析被引量：8
- 2006年
- 目的调查分析温岭市孕妇TORCH感染的情况。方法采用免疫印迹法检测孕妇血清中TORCH特异性IgM抗体。结果受检测孕妇血清弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒和单纯疱疹病毒II的IgM抗体阳性检出率分别为0.53%、1.19%、4.08%、2.51%和1.07%。结论TORCH感染与优生优育有重要关系,孕前检测TORCH十分必要,对于血清IgM抗体阳性者,应在转阴后再怀孕。
- 程茂良王珏吴锋
- 关键词：孕妇TORCH感染优生优育免疫印迹法
- 博卡病毒VP2基因在昆虫细胞sf9中表达及临床标本筛查被引量：2
- 2009年
- 目的表达人博卡病毒（HBoV）vP2蛋白，用于临床标本HBoV的筛查。方法将VP2基因重组于杆状病毒基因组，重组的杆状病毒感染昆虫细胞sf9，用HA抗体进行Western Blot鉴定重组融合vP1蛋白表达。通过电镜观察重组蛋白颗粒。以vR2蛋白作为抗原对176例临床样本进行免疫印迹筛查。结果在昆虫细胞中vB蛋白的表达量约占细胞总蛋白的60％以上，VP2蛋白相对分子质量为60×10^3。电镜观察博卡病毒vP，蛋白形成病毒样颗粒（VLP），其大小在20nm左右；采用免疫印迹技术从临床标本中筛查出4例患者HBoV阳性，阳性率达到2.28％（4／176）。结论本研究成功的在昆虫细胞中表达了博卡病毒VR蛋白；表达vP2蛋白具有一定抗原性，为开展人博卡病血清学研究方法建立提供基础。
- 滕灵方林峰郑美云郑昌华吴锋曾爱平黄恩佩莫一涵郑敏巧李旭阳侯建毅
- 关键词：基因表达调控免疫印迹法
- 利用人支气管上皮细胞系分离和培养人博卡病毒被引量：4
- 2009年
- 目的研究人博卡病毒（HBoV）在呼吸道感染中致病性及机理。方法利用人支气管上皮细胞系进行HBoV分离及培养，通过电镜对培养细胞中HBoV的形态及感染细胞进行研究，并采用逆转录PCR（RT-PCR）方法，检测HBoV在细胞中转录产物mRNA，同时对扩增产物进行测序及分析。结果将含有HBoV阳性痰液标本无菌接种人支气管上皮细胞系，出现2例致使细胞发生明显的病变（CPE）。电镜观察在细胞质中散在六角形或圆形的病毒粒子，大小18-26nm之间，大部分是20nm。RT-PCR扩增产物经电泳检测与预期结果相符是295bp，扩增产物测序结果与GenBank中HBoV序列比较，核苷酸同缘性99％，氨基酸同缘性100％。结论HBoV感染人支气管上皮细胞后能够在该细胞内增殖，并产生特征性生物学改变。本研究为今后HBoV致病性及免疫应答谱研究奠定基础。
- 林峰滕灵方郑美云郑昌华吴锋李桦郑敏巧曾爱平黄恩佩莫一涵侯建毅
- 关键词：支气管上皮细胞细胞
- 三种食源性致病菌的多重PCR检测
- 2007年
- 目的:建立一种痢疾志贺菌、沙门菌和单增李斯特菌的多重PCR诊断方法。方法:根据伤寒沙门菌VipR基因、痢疾杆菌侵袭性质粒抗原H(ipaH)基因和单增李斯特菌溶血素hlyA基因序列作为目的基因片段痢疾志贺菌、沙门菌和单增李斯特菌的特异性抗原基因序列,分别设计一对引物,优化各种工作条件,建立一种多重PCR诊断方法。结果:本法特异性好,敏感性可达104拷贝,整个实验过程在3 h～5 h内完成。结论:建立的方法在理论和实际应用上都有优越性,且一次可检测出三种病原菌,可用于临床诊断。
- 郑敏巧金大智刘琪琦曾爱平吴锋
- 关键词：多重PCR检测痢疾志贺菌沙门菌单增李斯特菌
- 浙江沿海一家系脊髓小脑性共济失调的基因突变检测与临床表现
- 2009年
- 目的探讨浙江沿海脊髓小脑性共济失调的基因突变检测与临床表现。方法对该家系18例患者的临床表现、头颅MRI等辅助检查资料分析，并与10名家系中未发病成员及12名非血缘的健康人进行SCA3／MJD基因CAG三核苷酸重复数目比较。结果家系18例患者均为SCA3／MJD型，同时检测出家系中未发病对照组有2例为SCA3／MJD型基因携带者。产物测序结果家系对照组与健康对照组CAG重复数为14～27次；SCA患者CAG重复数为67～82次；SCA3／MJD携带者CAG重复数为28—45次。在现存三代18例患者中，每代均有患者，男女均受累，起病年龄平均38岁，以行走不稳、动作笨拙和言语含糊为突出表现，MRI检测结果小脑、脑干明显萎缩。结论在我国沿海存在SCA3／MJD家系遗传。临床均以共济失调和构音障碍为突出，CAG重复数目检测可为基因诊断和症状前诊断提供依据。
- 金友雨曾爱平蔡海波吴锋冯忠洪庆章立江志开
- 关键词：脊髓小脑变性基因三核苷酸重复扩增
- 人博卡病毒外壳蛋白（VP3）的重组表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2007年
- 人博卡病毒（Human Bocavims）是2005年Tobias Allander等从小儿下呼吸道感染分泌物中分离到的新细小病毒，我们曾报道中国分离的人博卡病毒（WLL-1株）的全基因组序列。为了进一步检测分析人博卡病毒感染情况，我们重组表达了人博卡病毒WLL-1株的外壳蛋白（VP3）并建立了间接ELISA检测方法。
- 林峰曾爱平郑敏巧金大智吴锋
- 关键词：间接ELISA检测人博卡病毒外壳蛋白小儿下呼吸道感染
- 幽门螺杆菌的培养及药物敏感试验分析被引量：10
- 2007年
- 目的分析温州地区幽门螺杆菌(Hp)临床分离株对多种常用抗幽门螺杆菌抗生素的药敏和耐药情况。方法收集我院2289例胃病患者的标本,取其胃黏膜活组织进行幽门螺杆菌培养,对培养到的Hp菌采用抗生素药敏试验纸片琼脂扩散法作药物敏感试验。结果Hp培养阳性率依次为消化性溃疡50.00%,活动性胃炎40.77%,胃癌31.87%,萎缩性胃炎17.92%。898例Hp阳性患者的药物敏感试验结果表明左氧氟沙星的耐药率最低,暂未发现耐药株,其次为庆大霉素(1.11%)、克拉霉素(13.14%)、羟氨苄青霉素(13.36%)、呋喃唑酮(32.29%),甲硝唑的耐药率最高(100%)。结论Hp感染与多种胃病关系密切,临床上对Hp感染的患者可选择左氧氟沙星、庆大霉素、克拉霉素、呋喃唑酮及羟氨苄青霉素治疗,不宜选用甲硝唑。
- 郑敏巧吴锋莫一涵曾爱平丁玎
- 关键词：药物敏感试验
- 检测人博卡病毒抗体间接酶联免疫吸附法的建立及临床应用被引量：1
- 2010年
- 目的建立间接酶联免疫吸附法（ELISA）检测人博卡病毒（HBoV）抗体，探讨其临床应用的可行性。方法以重组表达的HBoV融合蛋白VP2作为包被抗原，建立检测HBoV抗体的间接ELISA，优化该检测方法的最佳条件，观察其精密度、敏感度和特异性，并与荧光定量PCR方法对比检测40份临床样本，同时采用免疫印迹法（Westernblot）确认其符合率。结果所建立的间接ELISA最佳抗原包被浓度为2mg／L，酶标二抗工作浓度为1：5000，血清标本最佳稀释度为1：200。该方法平均批内变异系数为6．87％，平均批间变异系数为4．67％。40份临床样本间接ELISA检测结果与荧光定量PCR及免疫印迹结果一致，符合率100％。结论利用VP2融合蛋白作为抗原，建立的检测血清HBoV抗体间接ELISA方法特异性强、重复性好，可用于HBoV抗体的定量和定性检测。
- 林峰滕灵方郑敏巧郑昌华吴锋黄恩佩侯建毅
- 关键词：抗体酶联免疫吸附测定临床实验室技术
- 人博卡病毒感染支气管上皮细胞生物学特征的研究被引量：6
- 2008年
- 目的研究人博卡病毒（HBoV）在呼吸道感染中的致病性及机制。方法采用人博卡病毒阳性标本感染健康人支气管上皮细胞，观察HBoV感染支气管上皮细胞后的生物学特征，并进行病毒空蚀斑、红细胞吸附抑制及免疫荧光测定。结果75％感染细胞变圆并堆积成葡萄状，伴随有坏死、破碎、脱落。病毒蚀斑测定出典型“猫头鹰眼”现象。红细胞吸附实验观察到90％以上红细胞附着感染支气管上皮细胞。荧光检测出在细胞核内具有典型荧光块。结论支气管上皮细胞可用于分离HBoV，HBoV感染支气管上皮细胞后能够在该细胞内增殖，并导致特征性生物学改变。本研究为今后人博卡病毒致病机制研究奠定基础。
- 林峰侯建毅郑敏巧吴锋曾爱平李桦郑昌华陈弘李旭阳饶高峰莫一涵黄恩佩
- 关键词：上皮细胞支气管
