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吴更

作品数：34 被引量：30H指数：4
供职机构：上海交通大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会创新基金上海市教育发展基金会“曙光计划”项目更多>>
相关领域：生物学医药卫生环境科学与工程化学工程更多>>

合作作者

文献类型

  • 21篇期刊文章
  • 7篇会议论文
  • 3篇专利
  • 1篇学位论文
  • 1篇科技成果

领域

  • 16篇生物学
  • 8篇医药卫生
  • 6篇环境科学与工...
  • 2篇化学工程
  • 2篇农业科学
  • 1篇理学

主题

  • 8篇蛋白
  • 8篇尼古丁
  • 6篇信号
  • 6篇通路
  • 5篇单加氧酶
  • 5篇信号通路
  • 5篇恶臭
  • 5篇恶臭假单胞菌
  • 4篇蛋白纯化
  • 4篇亚基
  • 4篇结构域
  • 4篇化合物
  • 4篇降解
  • 4篇分子
  • 4篇硫
  • 3篇修饰
  • 3篇水合
  • 3篇水解酶
  • 3篇尼古丁成瘾
  • 3篇人工酶

机构

  • 33篇上海交通大学
  • 1篇宁夏大学
  • 1篇中国科学院

作者

  • 33篇吴更
  • 8篇许平
  • 7篇唐鸿志
  • 4篇陶飞
  • 3篇林葵
  • 2篇崔立
  • 2篇华修国
  • 2篇傅艳琨
  • 2篇郭亮
  • 1篇于昊
  • 1篇于浩
  • 1篇刘光
  • 1篇王晓雷
  • 1篇马旅雁
  • 1篇周静
  • 1篇齐晓龙
  • 1篇邓子新
  • 1篇闫丽君
  • 1篇肖亚飞
  • 1篇王玉炯

传媒

  • 5篇中国细胞生物...
  • 3篇微生物学通报
  • 3篇上海交通大学...
  • 3篇基因组学与应...
  • 2篇生物技术通报
  • 2篇中国生物化学...
  • 1篇广东农业科学
  • 1篇微生物学杂志
  • 1篇广州化工
  • 1篇第十七次全国...
  • 1篇中国生物化学...

年份

  • 2篇2023
  • 1篇2022
  • 2篇2020
  • 1篇2018
  • 2篇2017
  • 3篇2016
  • 4篇2015
  • 6篇2014
  • 5篇2013
  • 4篇2012
  • 2篇2011
  • 1篇2004
共 34 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
戊型肝炎病毒ORF3蛋白的原核表达和纯化
2013年
戊型肝炎病毒(HEV)是一种无包膜、单股正链RNA病毒,其基因组长约7.2kb,包含3个开放阅读框(ORF)。ORF3位于ORF1和ORF2之间,编码含有123个氨基酸的磷酸化蛋白。本文通过PCR扩增HEV ORF3基因,将扩增产物双酶切后,插入具有相同多克隆位点的pET28a(+)、pGEX-4T-1和pET-43.1a(+)载体中,构建pET28a-ORF3、pGEX-4T-1-ORF3和pET43a-ORF3原核表达载体。将重组质粒转入E.coli DH5α,菌液PCR筛选阳性结果。序列测定正确后,将其转化E.coli BL21(DE3),加入IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析目的蛋白表达后,进一步利用亲和层析法纯化目的蛋白。结果表明,成功构建了原核表达载体pET28a-ORF3、pGEX-4T-1-ORF3和pET43a-ORF3,所构建的载体均可在宿主菌E.coli BL21(DE3)中表达ORF3蛋白。通过Ni-TNA和GSH-Sepharose层析纯化分别分析3种融合蛋白,发现pET43a-ORF3最适合获得纯化蛋白的ORF3蛋白,这为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了基础。
傅艳琨郭亮吴更华修国崔立
关键词：戊型肝炎病毒原核表达蛋白纯化
Hedgehog信号通路研究进展被引量：7
2013年
Hedgehog(Hh)信号通路是目前研究最热的信号通路之一。它作为进化中保守的信号通路,在脊椎动物和非脊椎动物的发育中起重要调控作用。而且越来越多的研究表明,众多的肿瘤发生都与该通路的异常相关。该文综述了该通路如何通过它的成员来调控Hh信号的产生、传播、接收和转导及其与肿瘤的相关性,旨在为相关领域的研究提供参考。
齐晓龙王玉炯吴更
关键词：HEDGEHOGPTCSMOCIGLI
mTORC1通路中氨基酸信号转导相关机制研究进展被引量：3
2012年
雷帕霉素靶点蛋白(target of rapamycin,TOR)作为细胞内重要的生长和代谢调节中枢,主要通过形成两种复合物TORC1与TORC2发挥其功能。其中TORC1接收广泛的细胞内信号,如氨基酸水平、生长因子、能量以及缺氧状态等,通过调控蛋白质合成来促进细胞的增殖与生长。在这些信号当中,氨基酸不仅能够激活TORC1通路,还同时作为其他信号激活TORC1的必需条件。目前,对于生长因子和能量水平激活TORC1过程的分子机制已有较深入的认识,而对于氨基酸信号如何转导至TORC1的分子机制直到近年来才有了新的突破。该文通过梳理已发表的哺乳动物细胞中氨基酸信号调控mTORC1分子机制的相关实验结论,对该领域的研究方向进行了总结和展望。
高源吴更
关键词：RAGGTPASEP62
恶臭假单胞菌分解环境毒物尼古丁代谢途径下游的酰胺水解酶和顺反异构酶的底物识别与催化机理探索
含氮杂环化合物是重要的环境污染物,导致肿瘤等疾病.某些微生物可以有高效地清除这些含氮杂环污染物,如恶臭假单胞菌S16可以高效降解烟草加工废弃物中的尼古丁.
吴更
抑制型Smad对TGF-β信号通路的负调控研究进展被引量：4
2012年
转化生长因子TGF-β超家族是一类在结构上相关的蛋白,目前发现在哺乳动物中有超过30多个细胞因子可能属于这一超家族。它们在各类细胞中广泛参与细胞生长、黏附、迁移、分化及凋亡等过程。其中抑制型Smad(I-Smads,包括Smad6和Smad7)是TGF-β/BMP信号通路里重要的抑制型蛋白,在多种细胞与组织的发育过程以及疾病的发生过程中扮演着重要的角色。对其研究已经过10多年,取得许多重大的进展,但也还有很多重要的问题还没有解决。着重介绍I-Smads对TGF-β信号通路的负调控研究进展。
高磊林葵吴更
关键词：TGF-Β信号通路SMAD6SMAD7负调控
PDZ结构域的结构特点及其识别特异性配体的机制被引量：4
2011年
PDZ结构域作为介导蛋白质之间相互作用的重要结构域之一,参与到细胞内运输、离子通道、以及各种信号传导通路等多种生物学过程.PDZ结构域是由80～100个氨基酸组成的小的球状结构域,对某些多PDZ结构域蛋白来说,需要一前一后形成串联体才能正确折叠.另外,PDZ结构域相互之间也可以形成同源或异源二聚体.这些PDZ结构域的突出特点是能特异性地识别配体靶蛋白C末端短的氨基酸序列,但有些也能识别靶蛋白的内部β发夹结构.而一些支架蛋白的PDZ结构域与细胞膜上脂类的相互作用则增加了其与膜的亲和性.本文简要概括了PDZ结构域的结构特点及其对配体的各种特异性识别的机制,从而为研究各种PDZ蛋白的功能提供了结构基础.
李华林葵吴更
关键词：PDZ结构域配体
DNA末端硫修饰依赖的体外大片段DNA连接法
2023年
【背景】DNA组装技术是基因组合成中的一个关键技术。探索低成本、高效率的基因组合成技术一直是合成生物学的重要研究领域。在某些细菌如变铅青链霉菌中,DNA上有磷硫酰化修饰(简称硫修饰),而在另一些细菌如天蓝色链霉菌中存在一种含有硫修饰识别结构域(sulfur-binding domain,SBD)的识别蛋白,可以特异性识别DNA上的硫修饰,这启发了我们发展出一种新的DNA组装技术。【目的】探究在DNA末端硫修饰的连接中,T4 DNA连接酶与SBD相融合蛋白和单独的T4 DNA连接酶相比,是否有更高的连接效率。【方法】根据同源重组原理,设计硫修饰引物,扩增硫修饰的DNA片段。构建T4 DNA连接酶与SBD融合蛋白的3种表达载体T4-linker-SBD(Hga)、T4-linker-SBD(Spr)和T4-linker-SBD(Mmo),表达纯化以上3种融合蛋白。比较3组浓度梯度(2.4、0.24、0.024 mg/mL)T4 DNA连接酶与融合蛋白在2.5 kb和8.0 kb DNA片段连接上的差异。【结果】DNA末端硫修饰的2.5kb和8.0kb的两端片段均能扩增,而且3种融合蛋白均能表达。在两段2.5 kb片段的体外连接实验中,每组T4 DNA连接酶与融合蛋白均能连接成5 kb片段;然而在两段8.0 kb片段的体外连接实验中,相同连接时间和相同酶浓度下,仅融合蛋白T4-linker-SBD(Hga)能够将8.0 kb片段连接成16 kb的长片段。【结论】根据两组琼脂糖凝胶电泳的实验结果可知,在两段8.0 kb的DNA长片段连接实验中,T4-linker-SBD(Hga)融合蛋白具有更高的连接效率。本研究方法以较低的成本和比较高的效率为大片段DNA组装提供了一种新的方法和思路。
胡媚月吴更
铜绿假单胞菌Psl多糖转运蛋白PslD的表达与纯化研究
2015年
条件性致病菌铜绿假单胞菌是细菌生物被膜研究的模式菌,其分泌的胞外多糖Psl在生物被膜形成中起关键作用。PslD为Psl多糖的转运蛋白,由256个氨基酸构成,生物信息学分析揭示其有N端信号肽且为一次跨膜蛋白。分离纯化完整跨膜蛋白需要去垢剂的作用,去垢剂种类繁多且性质不一,研究设计了一套筛选溶解PslD的去垢剂的方案。通过抗组氨酸标签的Westernblot分析,n-Decyl-β-D-maltopyranoside(DM),n-Decyl-N,N-dimethylamine-N-oxide(DDAO)及n-Dodecyl-N,N-dimethylamine-N-oxide(LDAO)被认为溶解PslD的效率较高。通过改变总蛋白与去垢剂比例,进一步优化了去垢剂的溶解条件,即8mg/mL总蛋白质量分数为1%的LDAO。在此溶解条件下,仅通过第一步Ni柱亲和纯化目的蛋白纯度可到达80%以上,这为进一步结晶尝试及其结构生物学研究奠定基础。
唐玮蔚马旅雁吴更
关键词：铜绿假单胞菌胞外多糖去垢剂
与DNA硫修饰相关的DndB蛋白纯化体系的建立
2013年
根据DndB蛋白表达载体的特性,建立了一套集Ni2+-NTA亲和层析、Source Q阴离子交换层析和Superdex 200分子筛层析于一体的纯化体系,纯化得到高纯度的DndB蛋白,可用于后续的蛋白质结构生物学和酶学特性研究,为阐明DndB蛋白的功能以及DNA硫修饰的机理打下了良好的基础。
张洪乐吴更
人类mTOR信号通路Ragulator复合物的各亚基的原核表达与纯化
2018年
Ragulator是mTOR信号通路中的一个关键蛋白复合物,分别由p18、p14、MP1、Lamtor4、Lamtor5五个蛋白通过相互作用复合而成。Ragulator在mTOR通路中起到结合Rag GTPases并锚定到溶酶体表面的作用,而后者招募并激活mTORC1。本研究通过生物信息学和分子克隆相结合的手段,构建各组分蛋白全长的质粒以及截短p18（41～161）和Lamtor（83～173）片段,相应转化到大肠杆菌中进行蛋白的表达。使用Ni2＋柱亲和层析,阴离子交换层析和快速蛋白液相色谱相结合的蛋白纯化手段得到纯度较高的稳定的Ragulator复合物,为后续的晶体制备和生物学结构奠定了基础。同时也为进一步深入了解该信号通路的机制以及相关药物的开发与研究作出了贡献。
李卫松吴更
关键词：蛋白表达纯化MTOR分子克隆
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