吴晓娟
- 作品数：21 被引量：73H指数：5
- 供职机构：贵阳医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- PCR扩增16SrDNA在幽门螺杆菌感染诊断中的运用被引量：18
- 2010年
- 目的 探讨16SrDNA聚合酶链式反应 （PCR）在幽门螺杆菌（Hp）感染检查中的应用价值.方法 疑似慢性胃炎、胃及十二指肠溃疡患者于胃镜下取其病变部位组织活检标本,胃癌患者于术中取病变部位组织活检标本,进行Hp的分离培养、提取活检组织DNA进行16SrDNA PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳,并将二者结果进行比较.结果 85例病例中,54例16SrDNA PCR阳性,阳性率为63.5%;34例Hp分离培养阳性,阳性率为40%.结论 两种检测方法阳性率相比较,PCR检查法明显优于分离培养法（P＜0.005）.
- 吴晓娟陈峥宏王菲
- 关键词：幽门螺杆菌细菌培养PCR
- 两种人体带绦虫幼虫入侵对家猪肠黏膜屏障功能的影响被引量：2
- 2012年
- 为了研究亚洲带绦虫和链状带绦虫六钩蚴对中间宿主肠黏膜屏障功能的影响,试验分别以链状带绦虫和亚洲带绦虫虫卵经消化道感染乳猪,对感染前后及对照组乳猪进行了外周血细菌培养、血清D-乳酸比色法定量检测、血清内毒素显色基质鲎试剂法定量检测及小肠组织病理学检查。结果表明:在两种带绦虫虫卵经消化道感染第4天的乳猪中,分别有1头乳猪的外周血细菌培养由感染前的阴性转为阳性,检出大肠埃希菌和变形杆菌;各感染乳猪血清D-乳酸和内毒素含量均较感染前增高(t检验,P<0.05);光镜下可见肠黏膜明显损伤,损伤级别为Ⅲ～Ⅳ级;电镜观察可见小肠上皮细胞间紧密连接破坏,线粒体肿胀甚至破裂,小肠微绒毛排列紊乱或脱落。
- 陈峥宏吴晓娟包怀恩杨廷秀胡兴竹
- 关键词：亚洲带绦虫六钩蚴肠黏膜屏障
- 四环素抑制大鼠细菌性前列腺炎组织中金黄色葡萄球菌生长被引量：3
- 2007年
- 目的探讨大鼠前列腺药物活性研究的实验方法。方法雄激素和细菌注射法制备大鼠的细菌性前列腺炎（BP）模型以及良性前列腺增生合并细菌性前列腺炎（BPH-BP）模型，口服四环素后不同时间检测大鼠血清和前列腺组织的药物活性、前列腺细菌数量及组织病理学改变。结果病理学检查见雄激素注射10d的前列腺有明显腺体及间质增生，感染2d后形成急性化脓性炎症。给药3．5～4h后，BP及BPH-BP组每克前列腺组织的药物浓度分别为22．44mg和20．26mg，高于同期血清的药物活性及药物最低杀菌浓度；治疗8～11d后，BP及BHP-BP组的前列腺无菌；治疗11d并停药1周后的BP组前列腺未见急、慢性炎性改变，感染28d的对照组每克前列腺可检出30个细菌，并有急、慢性化脓性炎症。结论四环素可进入BP及BPH-BP的前列腺组织内，超过血清浓度与药物的MBC，使敏感细菌的数量减少和消失。
- 吴晓娟王和
- 关键词：前列腺四环素透过性
- 用cox1基因片段的PCR鉴别亚洲带绦虫和牛带绦虫被引量：8
- 2009年
- 目的:用cox1基因片段的PCR技术对亚洲带绦虫和牛带绦虫的快速鉴别。方法:用亚洲带绦虫和牛带绦虫线粒体cox1基因片段的特异性引物以及带绦虫cox1基因片段的通用引物,对贵州省都匀地区和从江地区的带绦虫虫卵和节片DNA进行常规PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测和核酸序列测定,并用NC-BI Blast对扩增产物的核酸序列与NCBI数据库中带绦虫的cox1基因进行比对。结果:5株都匀带绦虫DNA样品经亚洲带绦虫cox1基因片段的特异性引物PCR,均扩增出约260 bp的产物,PCR产物的核酸序列与NCBI数据库中亚洲带绦虫线粒体cox1基因片段的同源性为100%;2株从江带绦虫的DNA样品用亚洲带绦虫特异性引物和牛带绦虫特异性引物的PCR均未见扩增产物,而通用引物PCR则扩增出约1 000 bp的产物,核酸序列与NCBI数据库中牛带绦虫线粒体cox1基因片段的同源性为99%,在牛带绦虫特异性引物的结合位点存在一个碱基差异。结论:常规PCR扩增特异性的cox1基因片段可快速鉴定亚洲带绦虫;从江牛带绦虫株的cox1基因特异性片段部分存在变异,导致与特异性引物结合能力的差异,可采用cox1基因通用引物PCR结合测序进行鉴定。
- 陈峥宏郎书源吴晓娟包怀恩
- 关键词：聚合酶链反应
- 抗生素致幽门螺杆菌细胞壁缺陷的研究
- 目的研究抗生素对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)细胞壁的影响,探讨胃部疾病反复发作、迁延不愈的原因。方法将于哥伦比亚血琼脂培养基上微需氧传代培养至对数生长期的幽门螺杆菌NCTC11637、SS1...
- 吴晓娟陈峥宏王菲
- 关键词：抗生素幽门螺杆菌
- 文献传递
- 幽门螺杆菌临床菌株克拉霉素耐药性及耐药基因突变位点分析被引量：8
- 2012年
- 目的检测贵阳地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株对克拉霉素耐药性及相关基因突变情况。方法采用琼脂稀释法对临床分离鉴定的Hp菌株,进行体外抗生素敏感试验,选取Hp克拉霉素耐药的临床菌株10株、克拉霉素敏感的临床菌株4株和质控菌株2株,进行23SrRNA基因功能区V区片段的PCR扩增和测序,与GenBank中公布的Hp菌株相关序列进行比对分析。结果贵阳地区Hp临床分离株对克拉霉素的耐药率达30.9%(13/42)。贵阳地区10株Hp耐药菌的23SrRNA基因片段的碱基突变包括T2183C(10/10)、T2245C(9/10)、A2144G(6/10)、C2196T(1/10)、A2224G(1/10),4株敏感菌株在2183、2196、2224和2245位点也存在碱基差异,2144位点的基因突变仅存于耐药菌株中。结论贵阳地区Hp克拉霉素耐药率较高,耐药菌株23SrDNA与耐药性相关的基因突变主要为A2144G。
- 司书梅张涛陈峥宏王菲吴晓娟綦廷娜杨廷秀
- 关键词：幽门螺杆菌克拉霉素耐药性基因突变
- 幽门螺杆菌药物敏感性检测方法的比较被引量：4
- 2013年
- 目的探讨E-test法、纸片扩散法和界值法检测幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)药物敏感性的优缺点及一致性。方法采用界值法、纸片扩散法和E-test法对20株Hp临床菌株进行甲硝唑、克拉霉素、四环素和阿莫西林的药物敏感性检测。结果界值法中,各临床菌株在对照平板上均良好生长,根据在界值平板上生长情况,获得20株Hp对甲硝唑、克拉霉素、四环素和阿莫西林的药物敏感性结果;E-test法中,20株Hp有12株检测到MIC(minimum inhibitory concentration,最低抑菌浓度),8株因抑菌圈不规则,未获得MIC值;纸片法检测中,10株Hp观察到规则的抑菌圈并测量出抑菌圈直径,另10株抑菌圈不规则或不明显,未能测量到抑菌圈直径。三种方法均有检测结果的10株Hp中9株对克拉霉素、阿莫西林、四环素和甲硝唑的药物敏感性结果一致;1株对甲硝唑的敏感性,以E-test法检测为敏感,以琼脂稀释法和纸片扩散法检测结果却为耐药。结论三种药物敏感性检测方法中,界值法较E-test法和纸片法稳定;三种方法检测克拉霉素、阿莫西林和四环素的药物敏感性结果一致,但甲硝唑的药物敏感性结果不一致。
- 张涛罗冰松田宇帅靖司书梅杨廷秀吴晓娟
- 关键词：幽门螺杆菌药物敏感性
- 大鼠肺炎支原体感染的ELISA实验研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨支原体感染大鼠的血清抗体反应及其间接ELISA检查与诊断方法。方法将肺炎支原体疫苗分别以滴鼻、腹腔注射、尾静脉注射方式免疫大鼠,收集动物血清,以方阵滴定法和间接法确立ELISA检测实验的最适条件,用间接法检测不同方法与时间免疫动物的血清特异性IgG抗体。结果ELISA系统的最适工作条件包括抗原包被浓度10×10^(-6)g/ml、血清稀释度1:40、酶结合物1:5000。以该系统检测滴鼻免疫大鼠共21只,免疫6次2只大鼠血清抗体阳性(66．67%),免疫7次后阳性率达100%;腹腔免疫和静脉免疫大鼠各18只,免疫2次后2只大鼠可检出特异性抗体(66．67%),免疫5次后全部动物均为血清抗体阳性(100%)。结论肺炎支原体0．0016 g/只以滴鼻、腹腔注射、尾静脉注射的方法均能够使大鼠产生特异性抗体,以间接ELISA检测法检查腹腔免疫组和静脉免疫组大鼠血清免疫2次后即有部分大鼠血清抗体检测即呈阳性,5次后阳性率达100%,而滴鼻免疫组大鼠直至免疫6次后部分血清抗体检测才可呈阳性其阳性率与腹腔免疫和静脉免疫2次阳性率相当。间接ELISA法可有效检测支原体感染动物的血清特异性抗体,是一种具有较高特异性的快速简便方法。
- 吴晓娟王和陈峥宏
- 关键词：支原体ELISA免疫
- 亚洲带绦虫六钩蚴和囊尾蚴的光学显微镜和扫描电镜观察被引量：2
- 2010年
- 目的了解亚洲带绦虫六钩蚴和囊尾蚴的形态及其表面超微结构。方法以人工胃液和人工肠液孵化亚洲带绦虫虫卵,密度梯度离心法纯化六钩蚴,于倒置显微镜观察其形态;以及经戊二醛及四氧化锇固定,梯度乙醇脱水,醋酸异戊酯置换,进行临界点干燥,喷碳、喷金,扫描电镜观察其表面超微结构。将六钩蚴经皮下注射感染小鼠,55 d后剖检取囊尾蚴,经胆汁孵化翻出头节,于光学显微镜直接观察或经硼酸卡红染色后镜检。另将囊尾蚴经PBS洗3次,依次经戊二醛固定、四氧化锇固定,梯度乙醇脱水,干燥、喷碳、喷金,扫描电镜观察。结果六钩蚴呈卵形,大小为（10.7~14×14~18.7）μm,表面凹凸不平,形成脊状突起。囊尾蚴呈椭圆形,囊膜表面见疣状突起。头节顶部有吻状顶突,顶突周围及凹陷处均密布大量菜花样突起。吸盘表面不光滑,底部有3~4圈珊蝴样排列的指状突起。颈节表面分布较多大小为（1~3×3~5.5）μm近似球形的颗粒。结论亚洲带绦虫六钩蚴表面凹凸不平,囊尾蚴有明显的吻状顶突,顶突处无小钩,但却分布大量的菜花样突起。
- 陈峥宏吴晓娟包怀恩郎书源
- 关键词：亚洲带绦虫六钩蚴囊尾蚴扫描电镜
- 云南、贵州两省38条人体带绦虫的分子鉴别被引量：10
- 2010年
- 目的对采自云南、贵州两省的38条人体带绦虫进行分子鉴别,了解当地猪带绦虫、牛带绦虫和亚洲带绦虫的分布状况。方法对云南大理和贵州都匀及从江地区有排节片史的病人以槟榔-南瓜子法驱虫,虫体经形态学初步鉴别后,以组织DNA提取试剂盒提取虫体基因组DNA,分别采用亚洲带绦虫、牛带绦虫和猪带绦虫线粒体细胞色素C氧化酶亚单位1基因(cox1)片段的特异性引物对各DNA样品进行常规PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳检测;PCR阴性样品采用带绦虫cox1片段PCR通用引物进行扩增,并选择1份亚洲带绦虫特异性PCR阳性的样品作为对照。从3种带绦虫PCR阳性的扩增产物中各选择1份进行核酸序列测定,并用NCBIBlast将各核酸序列与GenBank数据库中带绦虫的cox1进行比对分析。结果采自大理的4条带绦虫(DL1～4)的猪带绦虫cox1片段PCR为阳性,扩增产物约980bp;其余25条大理带绦虫(DL5～29)和5条都匀带绦虫(DY1～5)的亚洲带绦虫cox1片段PCR为阳性,扩增产物约260bp;各样品的牛带绦虫cox1片段PCR均为阴性。DL2PCR产物的核酸序列与GenBank中猪带绦虫cox1的同源性为99%～100%,DY1PCR产物的核酸序列与亚洲带绦虫cox1的同源性为100%。特异性PCR均阴性的4条从江带绦虫(CJ1～4)和亚洲带绦虫特异性PCR阳性的DL7以带绦虫cox1片段通用引物的PCR扩增出约1kb的产物。测序表明,CJ1片段的核酸序列与牛带绦虫cox1的同源性为99%,DL7与亚洲带绦虫cox1的同源性为99%～100%。结论cox1片段PCR扩增和核酸测序分析表明,采集的云南大理人体带绦虫为猪带绦虫和亚洲带绦虫,贵州都匀和从江人体带绦虫分别为亚洲带绦虫和牛带绦虫。
- 陈峥宏包怀恩牟荣吴晓娟郎书源杨廷秀胡兴竹
- 关键词：亚洲带绦虫猪带绦虫牛带绦虫分子鉴别
